反義及正義ａ一ＳＭＡ的表達對成纖維細胞與平滑肌細胞的影響

[摘要]目的：利用a—平滑肌肌動蛋白(a—SMA)基因，重組反義和正義逆轉(zhuǎn)錄病毒載體，評價a—SMA逆轉(zhuǎn)錄病毒對NIU3T3細胞和血管平滑肌的影響。方法：用含全長a—平滑肌肌動蛋白(a—SHA)cDNA的質(zhì)粒DNA的酶切、連接，重組反義和正義 a—SMA的目的cDNA，構(gòu)建逆轉(zhuǎn)錄病毒載體，并感染培養(yǎng)的NIU3T3細胞與平滑肌細胞，進行細胞形態(tài)學(xué)和基因表達的觀察。結(jié)果：反義和正義重組逆轉(zhuǎn)錄病毒能夠攜帶的目的基因并成功整合到NIH3T3細胞基因組中；利用兩種逆轉(zhuǎn)錄病毒分別感染NIH3T3、血管平滑肌細胞，發(fā)現(xiàn)對細胞生長和形態(tài)有一定的影響，反義重組逆轉(zhuǎn)錄病毒使細胞活性下睜、基因表達減弱，而正義重組逆轉(zhuǎn)錄病毒使細胞活性下降、基因表達增強明顯。結(jié)論：a-SMA重組病毒對細胞的形態(tài)、突起的生長甚至細胞的生存均有影響。

[關(guān)鍵詞]逆轉(zhuǎn)錄病毒；轉(zhuǎn)染；a—平滑肌肌動蛋白；基因

[中圖分類號]Q786 [文獻標(biāo)識碼]A [文章編號]1008—6455(2005)04—0399—03