竹叢枝植原體１６ＳｒＤＮＡ片段克隆與序列分析
2005-04-29 00:44:03蔡紅張華明陳海如秦洋
植物保護(hù) 2005年2期
蔡 紅 張華明 陳海如 秦 洋
摘要利用植原體16SrKNA基因序列設(shè)計(jì)合成的引物，對表現(xiàn)叢枝的竹子植株總DMA進(jìn)行直接PCR及巢式PCR擴(kuò)增，得到長1．2kb的目的片段。將此片段與pGEMTEasy載體連接并轉(zhuǎn)化到大腸桿菌DH5α。感受態(tài)細(xì)胞中。通過酶切、PCR鑒定，對篩選得到的重組陽性克隆進(jìn)行核酸序列測定及同源性比較分析，結(jié)果表明其與植原體16SrⅠ組中的西方翠菊黃化植原體(SAY)同源率為99％。依據(jù)16SrDNA序列建立了竹子叢枝病植原體株系的系統(tǒng)進(jìn)化樹。對云南竹子叢枝病植原體株系分類鑒定與已報(bào)道的結(jié)果相似。
關(guān)鍵詞分子生物學(xué)；竹子叢枝病；植原體；16SrlDNA
中圖分類號S180．37
