孕激素對兔血管平滑肌細胞ＡＴ〈ｓｕｂ〉ｌ〈／ｓｕｂ〉受體基因表達的作用差異及機制分析

尚美生　喬中東　呂吉元　趙榮瑞

摘要：目的通過觀察孕激素對培養血管平滑肌細胞(VSMCs)AT_lRmRNA表達的影響，并尋求探索其潛在的分子機制，為臨床干預提供實驗依據。方法分別用孕激素及其特異性受體拮抗劑對培養的血管平滑肌細胞行不同時間、不同濃度的處理，然后用胰蛋白酶—EDTA消化，離心收集，提取總RNA，用RT—PCR對AT，R mRNA進行半定量分析，利用Westem—blot對其相應的蛋白進行測定。結果孕酮對VSMCsAT_lR的影響呈現明顯的時間依賴性，12 h達到最大值為156％±18％，表現為上調；并呈現濃度依賴性，當孕酮濃度是10^-10M時對ATlRmRNA的上調影響達到最大為59．9％±4．2％；孕酮對AT_lRmRNA蛋白的上調以12h為最大，達到最大值為8．44％±1．08％；孕酮受體拮抗劑0．1 nM的米非司酮對VSMCsAT_lRmRNA無影響，但米非司酮抵消了孕酮對VSMCsAT_lR mRNA的上調作用，而孕酮引起的AT_lRmRNA的上調只能被三磷酸肌醇(IP₃)的抑制劑Wortmannin所抑制。結論孕酮對VSMCsAT_lRmRNA表現為上調，其特征呈現時間和濃度依賴性，其最大上調作用發生于12 h，最大作用的濃度為0．1 nM，孕激素的作用機制可能是與其受體結合后激活了IP₃激酶的第二信號系統。

關鍵詞：動脈粥樣硬化；平滑肌細胞；孕激素；AT_l受體

中圖分類號：R329．3R285．5

文獻標識碼：A

文章編號：1672—1349(2005)11—0977—04