化學(xué)致癌物DNP致人胚鼻咽上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化相關(guān)基因的鑒定

段朝軍　關(guān)勇軍　何春梅　李　峰　肖志強(qiáng)　陳主初

摘要：為了探討DNP致癌的分子機(jī)理，鑒定出化學(xué)致癌物二亞硝基哌嗪（DNP）致人胚鼻咽上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化相關(guān)的基因及其活化方式。采用DNA共轉(zhuǎn)染、裸鼠致瘤性試驗(yàn)、Southern雜交、PCR測(cè)序和序列同源性比較分析等，對(duì)DNP轉(zhuǎn)化的人胚鼻咽上上皮細(xì)胞株HENE-DNP進(jìn)行研究。經(jīng)過(guò)兩輪DNA共轉(zhuǎn)染和裸鼠致瘤性實(shí)驗(yàn)，Southern雜交表明，裸鼠腫瘤DNA中均含有人特異性高度重復(fù)序列Alu。用人Ha-ras、Ki-ras及N-ras癌基因特異性引物對(duì)裸鼠腫瘤DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，僅能擴(kuò)增出人Ha-ras基因相應(yīng)的片段。Southern雜交進(jìn)一步證實(shí)，裸鼠腫瘤DNA中存在與人Ha-ras基因片段大小一致的雜效帶。RT-PCR產(chǎn)物測(cè)序，并將測(cè)序結(jié)果與GenBank進(jìn)行序列同源性比較分析，發(fā)現(xiàn)裸鼠腫瘤中人Ha-ras基因cDNA第26位密碼子第2位堿基發(fā)生了T→C的轉(zhuǎn)換，編碼的氨基酸由亮氨酸相應(yīng)地變換成絲氨酸。化學(xué)致癌物DNP致人胚鼻咽上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化相關(guān)的基因是Ha-ras，原癌基因c-Ha-ras激活可能是DNP轉(zhuǎn)化人胚鼻咽上皮細(xì)胞的分子機(jī)制之一。

關(guān)鍵詞：二亞硝基哌嗪；共轉(zhuǎn)染；轉(zhuǎn)化基因或癌基因

中圖分類號(hào)：R392

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1007-7847(2005)01-0084-06