云南省毛葉棗主要真菌病害調查

張國輝　王　蘭　趙明富　何月秋

摘要本文對云南省毛葉棗的主要真菌病害作了介紹，主要為炭疽病、白粉病、疫病、黑斑病和煤污病。

關鍵詞植物病理學；毛葉棗；真菌；病害

中圖分類號S 435．622．9

毛葉棗(Zyziphus mauritiana Lam．)系鼠李科(Rhamhacene)棗屬(Ziziphus Mill)滇刺棗(J．mauril,iana)的一個變種，義名臺灣青棗、印度棗、緬棗、四四果等，在干熱濕潤地區有廣泛分布，原產于我國云南省于熱地區和印度南部。云南省的保山市、兩雙版納州、玉溪市的元江縣等地還可以見到大量的野生毛葉棗，有的被做成籬笆防止牲U進入田園。云南省于1970午代末至1980年代初從緬甸引種高產、優質商用品種挾得成功，我國南方其他省區從臺灣省引進經芽變培育優良的品種，把產量和品質提高到了一個新的水平。但隨著栽培面積的不斷擴大，毛葉棗在生產上的一些制約因子也突顯了出來，如病害問題、貯藏問題、綜合開發問題等。2004年2月上旬，作者到云由省西雙版納自治州景洪市景洪鎮采集毛葉棗病害標本，發現所有果樹都發病，所有葉片輕輕一碰即掉，發病程度從未見過如此嚴重，部分果園絕產。本文以報道近年來對毛葉棗上主要真菌病害研究的結果為主，同時，綜合廠部分研究者的研究成果，以供其他研究者參考。

1炭疽病

毛葉棗上的炭疽病發生極為普遍，在后期造成嚴重落果，落果率高達10％左右，果肉品質變壞而喪失食用價值。此外，帶菌果實在運輸過程中及貯藏期，還造成大量爛果，爛果率高達40％或更高，損失極其嚴重。病果產生橢圓形或圓形的褐色壞死斑，后期產生子實體。受傷果實更易感染該病。葉片上病斑多發生在葉緣或葉尖，少數發生在中央。病斑不規則形或十圓形。病斑深灰色，略凹陷，病健交界明顯，大小0．5～1．0cm，病部表面可見黑色小點，即病原菌1：的分生孢子堆。果實上的病斑初為小禍點，漸擴大成大圓形或近圓形、淺禍色至褐色病斑，大小可達3 cm以上，凹陷，多數病斑上子實體少見，但在天氣潮濕時，部分病果上可形成典型的炭疽病病斑，有輪狀著生的分子孢子盤，其上分泌出淡黃泥土色的分牛孢子團(由于與外界環境的接觸，其顏色與培養基上略有不同)，有的果實表面留有清晰可見的分生孢子突破表皮的痕跡。

病原為Colletotrichum gloeosporioides(Penz．)Sacc但王蘭等(結果未發表)測量了該菌的分生孢子盤、分生孢子大小及用中國棗炭疽菌(C．gloeosporioides)做對照、以棉花炭疽菌(C．gossy－pii)、辣椒炭疽菌(C.capsici和黃瓜炭疽菌(C，lagenarium)等進行分子聚類分析，利用9條RAPD)隨機引物進行擴增，發現毛葉棗炭疽菌與中國棗上的炭疽菌不能聚為一類。雖然毛葉棗炭疽菌和小國棗炭疽菌均以蛋白胨為最適的氮源，但前者利用硫酸銨較后者好，后者則利用磷酸二氫銨較前者好，前者可以很好地利用脲作為氮源，而后者則不能很好地利用脲。

病菌的單根菌絲灰白色，成簇時近鼠灰色。菌絲絨毛狀，緊密與疏松菌絲常不均勻的相問，明顯的輪狀生長排列。菌落背面顏色成灰白色，亦有明顯的輪紋和顏色深淺不一的斑塊狀。分牛孢子盤埋生于培養基中。菌落中央有土黃色至品紅色的分生孢子團溢出，如刮去氣生菌絲，48 h后便可見到大量的分生孢子團幾近布滿培養基表面。在28℃下，從傷口接種的果實上于接種后的第3—4天便顯癥，第5天在病斑上便有粉紅色的粘性孢子團溢出。果實上分生孢子盤突破表皮外露，破裂的表皮清晰可見。分生孢子梗短小，柱狀或棒狀、單胞，剛毛淡褐色，較少見，間牛于分生孢子梗之中。分生孢子單胞。單個孢子淡綠色，集聚成孢子團時呈品紅至紅色；長桿狀，一端鈍圓，另一端稍尖，或兩端均鈍圓，或稍向一側彎曲，或直桿狀，近中央處略縊縮，大小為(21．29士2．67)μm×(6，04±1.05)μm；中央有油球1個、大小為(3．38 i0．67)μm，分生孢子盤直徑291～360tzm。

該菌的菌絲體生長和分生孢子形成的溫度范圍分別為10～34℃與16～3l℃，最適溫度分別為25～28℃與28℃；菌絲體生長和分生孢子形成的pt-t范圍分別為2～12與3～11，最適pH分別為5～6與4；在不同的光環境中，只有熒光處理區既利于菌絲體生長又促進產孢；黑暗處理區雖對產孢的促進作用最明顯，但光照時數對菌絲體生長沒有明顯影響。對維生素的要求不嚴格，但分生孢子形成對維牛素敏感，以V_E對產孢的促進作用最大。病菌以分牛孢子盤和分生孢子越冬，樹上棗吊是病菌的主要越冬場所。可以通過風作媒介四處傳播。可從氣孔和傷口等處輕易地進入寄主。本病的發生和發展與溫、濕度的變化密切相關，一般以溫度為23亡，相對濕度為82％時開始發病。溫度為25—28℃，相對濕度為80％～89％時為發病盛期。隨著貯藏時間的延長，貯藏室內通風不良，發病逐漸加重。

在過去的炭疽病研究中，主要以病原生物學、侵染來源、傳播方法、潛伏侵染及寄主等方面的研究，而分子方面的研究尚無報道。根據對毛葉棗炭疽菌不同地點的廣泛調查和病原采樣收集，已發現分離到的毛葉棗炭疽菌存在形態差異。在國外，已通過分子方法、生化方法和免疫學方法去鑒定炭疽菌每個發育階段相關的基因和蛋白，用以研究炭疽菌的致病性及與植物之間的關系。Kelemu等(1997)利用9個Operon公司生產的10堿基隨機引物對45個來自于南美的圭亞那柱花草膠孢炭疽菌菌株的DNA基因組進行了RAPD遺傳多樣性分析，擴增結果表明供試炭疽菌具有顯著多態性。從錦葵屬植物棉花卜分離的炭疽菌表明，有些菌株相似，但一些菌株之間有差異，因此在寄主專化性研究的基礎上，采用分子方法進行研究是比較適宜的。曾大興利用RAPD與ITS-RFLP相結合的方法技術，分析了香蕉炭疽菌的3S個彎孢類炭疽菌株，揭示了該菌具有豐富的種內遺傳多樣性和系統發育關系。因此，應用RAPD和ITS-RFLP兩種分子生物學方法對炭疽菌屬幾個重要種的種問和種內親緣關系進行研究，提供了有用的分子依據。不僅在不同來源的炭疽菌間發現遺傳差異，即使同為毛葉棗炭疽菌也存在非常大的差異，王蘭等(結果末發表)用炭疽菌屬特異引物Pn3：5CCGTTGGTGAAC－CAGCGGAGGGATC3和Ph8：5－GCTGCAT－TCCCAAGCAACCCG-ACTC-3擴增后，再用不同的內切酶進行消化，結果發現毛葉棗炭疽菌也有異質性，供試9個菌株中8個菌株的PCR片段有BarnHI酶切點，而1個菌株則沒有，該菌株的培養性狀也與其他菌株不同。

2白粉病

白粉病在干熱河谷地區幾乎整個生育期均發生，是生長期間影響產量和品質的第一大病害。病害以5月至10月為多，以9月至10月間為發病高峰。主要危害果實和葉片，但也危害幼果及嫩梢。葉片受害，先從中下部葉片開始，逐漸向上部葉片蔓延。發病初期在葉背出現白色菌絲，形成白色茵絲塊，隨后白色菌絲和白色粉狀物(病菌的分生孢子梗及分生孢子)可市滿葉背，葉片正面出現褪綠色或淡黃褐色不規則病斑。受害葉片后期呈深黃褐色，易脫落。發病嚴重時，白色菌絲和白色粉狀物布滿整個枝條，嫩葉呈黃褐色皺縮，枯死。果實受害以膨大期果實為主，幼果次之。被害果實上先山現白色菌絲，隨后擴展，嚴重時白色菌絲和白色粉狀物可布滿全果。果實受害后，果肉木栓化，果皮出現麻斑，皺縮，呈褐色或黃褐色，易脫落或枯死。花器亦受害，也以覆蓋白色菌絲和白色粉末狀物為物征，但其發病較葉和果實少見。

病原茵為Oidium zizyphi(Yen&Wang)U.Braun，是一種外生菌。病葉上常見一層白色的粉狀物，即菌絲體和分生孢子。菌絲體表生，分生孢子梗稀少，分生孢子圓柱形或桶形，五色，單胞，大小為(27～30)μm×(15～16)μm，田間未見到有性階段。分生孢子經氣流傳播。

3疫病

疫病主要危害果實。在重病田塊遠離田埂的果樹幾近無收。果實受害后，果面產牛褐色斑點，邊緣不甚明顯，條件適宜時，病斑迅速擴大到全果。由于病菌侵入需要水滴，果實花蒂一端滯水時間較其他部位長，故病斑首先從果實的下部始發。擴大后，病斑不規則，早深淺不均勻的暗紅褐色，邊緣似有水漬狀，有時病斑部分與果肉分離。病果果肉腐爛，并可沿導管延伸到果柄，均變為褐色。病變組織空隙處有白色綿狀菌絲體。病斑擴及全果時，果實不變形，病果呈皮球狀，具有彈性，最后失水干縮。天氣潮濕時，病果下部常覆蓋一層白蠟狀霉狀物<菌絲體、孢囊梗和孢囊孢子)。一般樹冠下部靠近地面的果實先發病，外側果枝上的果實較內側的發病輕，朝陽的一側較背陽側發病輕。病果易脫落，極少數懸掛樹上形成僵果。

病原為Phytophthorapalmivora Buffer，真菌，無性階段產生孢子囊。孢囊無色，單孢，橢圓形，頂端有乳狀突起，大小為(51～57)μm×(34～37)／μm，長寬比1．5，每個孢子囊都有一個短柄。孢囊可直接產生芽管，或形成游動孢子。在營養豐富的培養基上，孢子囊可直接萌發形成芽管，后者形成菌絲體。有水時，萌發的孢子囊釋放出大量的游動孢子。有連續光照和在V8培養基上，該菌可產生大量的孢子囊。但在病果上沒有光照也可形成孢子囊。該菌有性階段為異宗結合形成卵孢子，有At和3．2兩種交配型。但這兩種交配型菌株在給予相反交配型菌株的性激素時，也能自交形成卵孢子。光可刺激卵孢子萌發，但抑制卵孢子形成。以0．25％KMnO₄處理20 min，置于光照下能誘導成熟的卵孢子萌發。卵孢子有厚而光滑的外壁，球形，卵形有乳頭狀突起，無色或帶褐色，大小為27～30μm。卵孢子能存活很長時間，但在病害循環中的作用不大，主要原因是有性生殖需要另一相反交配型存在，但自然界這種可能性很低。在菌絲中部可以產生厚垣孢子，其存活能力很強。在有營養條件下，厚垣孢子萌發形成菌絲體。在有水時，厚垣孢子形成短的芽管，在芽管頂端形成一個孢子囊。生長最適溫度為30℃，最高溫度為36℃，最低生長溫度為12℃。在25℃時，產生孢子囊最多，但當溫度高于35℃或低于15℃時則不產生孢子囊。風雨是影響該病流行與否的主要因子。飛濺的雨水是孢子囊釋放和傳播所必需的條件。在雨季，土壤中的厚垣孢子在水中萌發產生孢子囊和釋放出游動孢子。雨水可把游動孢子濺到空中，小水滴中的游動孢子借風力而擴散，成為接種體，從而引起流行。疫病以厚垣孢子、卵孢子或菌絲體隨病組織在土壤中越冬。其中落果中形成的厚垣孢子在土壤中存活，起主要初侵染源作用。每次較大降雨或灌水后，都出現一個侵染和發病高峰，毛葉棗整個生長季均能被疫病侵害，但在云南省以7月至9月的雨季發生為多。雨水較多的年份發病重，雨后高溫也是疫病發生的重要條件。疫病主要危害樹冠下部果實，一般接近地面的果實先發病，果實距地面1～1．5m仍可發病，但以距地面60cm以下為多。樹冠下垂枝較多，四周雜草叢生，果園局部小氣候濕度大，疫病發生重。受浸染的果實+即使來顯癥，但在貯藏期易腐爛。

4黑斑病

黑斑病在云南省的野生毛葉棗上可能早就有發生，但首次引起關注是在1985年3月，云南省農科院熱帶經濟作物研究所(保山潞江壩)果園中，毛葉棗和野生酸棗(Zyziphussptnosus Hu．)上發生較普遍。至1987年4月調查，病害已遍及整個果園。病害主要只在葉片上發牛。最初在葉片背面產生零星黑色小點，以后病斑逐漸擴大，成圓形或不規則的黑色病斑，直徑0.4～0．6mn，嚴重時病斑町合并成片，在葉背面覆蓋較大的面積，而造成果實變小，果味變差，品質降低。不僅影響了葉片的光合作用，而且腋芽抽發，使果實養分供應不足而發生落果，對產量影響較大，嚴重的顆粒無收。第二季果實的成熟期是翌年2—3月份，此時正是水果淡季，毛葉棗果售價較高，由于黑斑病的影響，使果農的經濟收入受到嚴重損失，在很大程度上動搖了種植者的栽培積極性。2004年2月上旬，到云南省西雙版納自治州景洪市景洪鎮采集毛葉棗病害標本，發現帶有黑斑病的葉片正面覆有一層黑膜，類似煙煤病，葉片背面的黑斑密集成片。云南農業大學劉云龍教授稱之為“煙煤狀黑斑病”。受害嚴重的葉片成卷曲、扭曲狀，易脫落，一碰即掉。該病一經發生，蔓延很快，易使毛葉棗大面積受害。

該病的病菌為Isariopsis indica var．zizyphiGupta&Madaan。分生孢子梗暗褐色，直立，大小(67．0～148．0)μm×(5．4～8．1)pm。分生袍子梗集合成束狀，暗褐色，大小平均為160×450pm。分生孢子頂生或側生，圓柱形、倒棍棒形和梨形，暗褐色，大小(24．3～40．5)μm×(8．6～10．3)μm，0～3個隔膜。

毛葉棗黑斑病的發生與雨季有很大關系，隨雨季來臨的早晚，發病時間也提前或推遲。多數年份在6月的雨季來臨后，該病開始發生。若雨季推遲到7月份，該病也推遲到7月份才發生，這與濕度和風吹雨濺有關。8月上旬至10月上旬雨季期間是該病發生的高峰期，所有果園都不同程度地受害。10月中旬雨季結束后，該病的蔓延有所減弱，但由于前期病原菌積累較多，危害仍十分嚴重，使大量棗葉變黃并脫落，1—5月是該病的停滯期。在云南省元江縣調查發現，在種有茉莉花田中種植毛葉棗，因通風不良，出間濕度大，黑斑病發生普遍而嚴重。田間施用氮肥過多，植株生長過于旺盛，株間密度小，相互搭附，發病較重，隴田凹洼地比山坡地發病重，地塊中間較四周發病重。田間管理粗放，發病亦很嚴重。病菌初侵染源不詳。

5煤污病

主要危害葉片和枝條，嚴重時花果也無一幸免。2004年2月上旬，自云南省思茅地區出發至西雙版納州，沿途作毛葉棗病害種類調查，發現煤污病極其嚴重，部分果園里所有片葉，果實的止而，甚至樹干全被黑色霉層覆蓋。病葉片和果實上首先出現小黑色霉點，漸擴大覆蓋整個綠色部分，形成一層黑色霉層鞘，用手一剝即脫落。果實變小，品質變差，部分果實畸型，已失去商品價值。

該病的病原物種類較多，主要是一些次生病原物引起。如Ciadosporium zizyphi，Alternaria sp,等。病害發生主要與治蟲不力，管理粗放有關。當果園灌溉不及時，植株受旱嚴重，誘發蚜蟲、紅蜘蛛、介殼蟲滋生，且不及時用殺螨、殺蟲劑防治。由于害蟲的分泌物增多，次生病原菌、腐生真菌附著植株表面，覆蓋綠色部分，光合作用面積減少，病害加重。