核桃ＳＳＲ反應體系的優化
2007-01-01 00:00:00劉曉麗何天明張美勇張立杰慈志娟張春雨陳學森
果樹學報 2007年2期
摘 要：以清香、香鈴、愛米格為試材，利用CTAB法提取基因組DNA，將PCR體系的主要成分設定5個梯度，根據每個成分的變化引起的PCR—SSR的效果差異，探討了核桃SSR技術中PCR體系的主要成分對擴增結果的影響，并對引物WCA321的適宜退火溫度進行優化。最終確定了引物WGA321的最適退火溫度為48～52℃，PCR反應體系的最佳條件為：15μL體系中，Mg2+1.0mmol/L，dNTPs濃度0.40mmol/L，TaqE用量為0.5U，DNA模板1.0ng／μL，引物濃度為0.4μmol/L。利用此反應體系對部分核桃品種進行PCR擴增并電泳檢測，擴增結果清晰且有較高的多態性，表明該體系適合核桃的親緣關系分析。
關鍵詞：核桃；SSR；優化
中圖分類號：S664.1
文獻標識碼：A
文章編號：1009—9980(2007)02—140—06
