人Ｎｄｆｉｐ１和Ｎｅｄｄ４的原核表達，純化和抗體制備
2008-01-01 00:00:00黃守均等
生命科學研究 2008年1期
摘要：為了進一步從蛋白水平上檢測Ndfip1(Nedd4 family interacting protein 1)和Nedd4(Neuronal precursorcell-expressed developmentally down-regulated 4)在肢帶型肌營養不良(Limb-girdle muscular dystrophy，LGMD)患者的肌肉組織中的表達及功能，以正常人的腦和腎臟組織的總RNA為模板，RT-PCR擴增Ndfip1和Nedd4部分編碼序列，構建原核表達重組質粒pET28b-hNdfip1和pET28b-hNedd4，轉化大腸桿菌BL21后，加IPTG誘導蛋白表達，Ni-NTA層析柱純化蛋白，免疫BALB/c小鼠制備抗體，Western blot檢測顯示抗體能識別人和小鼠的Ndfip1和Nedd4，小鼠各組織中Ndfip1的蛋白表達譜與文獻報道的Ndfip1 mRNA表達譜不一致，暗示Ndfip1具有轉錄和翻譯水平的調控。
關鍵詞：Ndfip1；Nedd4；肢帶型肌營養不良；抗體
中圖分類號：Q78；R392
文獻標識碼：A
文章編號：1007-07847(2008)01-0040-05
Expression，Purification of hNdfip1 and hNedd4，and the Specific Antibody Preparation
注：本文中所涉及到的圖表、注解、公式等內容請以PDF格式閱讀原文
