摘要:分離、培養大鼠胚胎后腎間充質細胞(MMCS),取孕13d大鼠胚胎,分離胚胎腎臟,去除輸尿管芽,消化后置37℃、5%CO2、飽和濕度的培養箱中培養,倒置相差顯微鏡下觀察培養細胞,并行HE染色、電鏡觀察、生長曲線測定:ABC免疫酶染色法檢測波形蛋白、角蛋白、nestin、CD133、CD34;直接免疫熒光法檢測雙花扁豆凝集素(Dolichos Bmoms,DB),并流式細胞術定量檢測,MMCS形態為成纖維細胞樣,貼壁生長,48~72h達生長高峰:波形蛋白、nestin、CD133表達陽性;角蛋白、CD34、DB表達陰性;MMCS以DB標記后流式細胞檢測為單峰,結果表明:培養細胞為后腎間充質細胞,純度較高并符合干細胞特征。
關鍵詞:后腎;間充質細胞;原代培養;大鼠
中圖分類號:R-332
文獻標識碼:A
文章編號:1007-7847(2008)01-0066-07
Isolation,Cultivation and Identification of Metanephric Mesenchymal Cells Derived from Embryonic Rats
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