摘要:研制經(jīng)濟(jì)方便的新型乙肝植物口服疫苗是全球控制乙型肝炎的現(xiàn)實(shí)要求。研制乙肝植物口服疫苗遇到的一個主要的困難是HBsAg基因在受體植物中的表達(dá)量低。香蕉是植物口服疫苗理想的受體。因此,以香蕉為受體,進(jìn)一步提高HBsAg基因表達(dá)量的研究非常必要。從pBIL2載體上克隆了香蕉果實(shí)特異表達(dá)的BanLec啟動子,并引入了Gubd Ⅲ、BamH Ⅰ酶切位點(diǎn);利用EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ雙酶切YEPFLAG-HBS獲得了HBsAg基因;通過BamHⅠ酶切位點(diǎn),利用T4DNA連接酶連接了BanLec啟動子和HBsAg基因,形成BanLec-HBsAg連接片段;再把該片段通過EcoR Ⅰ、HindⅢ酶切位點(diǎn)插入pCAMBIA2300植物表達(dá)載體,成功構(gòu)建香蕉果實(shí)特異表達(dá)啟動子驅(qū)動下的乙肝表面抗原基因表達(dá)載體。
關(guān)鍵詞:香蕉;果實(shí)特異表達(dá)啟動子;乙肝表面抗原;表達(dá)載體;構(gòu)建
中圖分類號:S668.4 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A 文章編號:1009-9980(2008)05-691-04