葫蘆科作物３種主要病毒的多重ＲＴ－ＰＣＲ方法的建立
2008-01-01 00:00:00趙麗古勤生陳紅運史團省田延平胡京昂
果樹學報 2008年5期
摘要：小西葫蘆黃花葉病毒(Zucchini yellow mosaic virus，ZYMV)、西瓜花葉病毒(Watermelon mosaic virus，WMV)和黃瓜花葉病毒(Cucum6er mosaic virus，CMV)是危害葫蘆科作物最嚴重、最廣泛的3種病毒。研究建立了以18SrRNA為內標檢測ZYMV、CMV和WMV侵染葫蘆科作物3種主要病毒的多重RT-PCR方法，并對影響多重RT-PCR擴增的退火溫度、Taq聚合酶濃度、dNTPs濃度和鎂離子濃度4種主要因素進行優化；對多重RT-PCR的靈敏性進行了測定，并與單重RT-PCR靈敏性進行比較。結果表明：最佳的退火溫度、Taq聚合酶量、dNTPS濃度和Mg2+濃度分別為60.7℃、1.0 U、0.8 mmol／L和2.5 mmol／L。多重RT-PCR各病毒的靈敏度與單重RT-PCR相同。
關鍵詞：西葫蘆(Cucurbita moschata Duch)；病毒病；多重RT-PCR
中圖分類號：S642．6 文獻標識碼：A 文章編號：1009-9980(2008)05-703-05
