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編碼大鼠PRMTI基因shRNA質粒的構建和鑒定

2008-01-01 00:00:00方雅琴肖傳實焦延景張圣雪
中西醫結合心腦血管病雜志 2008年3期

摘要:目的:研究蛋白精氨酸甲基轉移酶1(PRMT1)基因表達的改變與血管內皮功能及動脈粥樣硬化的關系。方法:構建PRMT1短發夾RNA(shRNA)質粒。在GenBank中查到大鼠PRMT1基因mRNA序列并輸入siRNA網上設計軟件OptiRNA中,選取兩條靶序列,設計并合成編碼shRNA序列的DNA單鏈,經退火連接后,與雙酶切線性化處理回收的pGenesil-1質粒載體連接,用含卡那霉素抗性的LB平板篩選陽性克隆,小提質粒后行酶切鑒定并測序。結果:構建的大鼠PRMT1-shRNA質粒經酶切鑒定及測序與預期相符。結論:本研究結果為進一步研究基因干擾PRMT1基因對血漿同型半胱氨酸(Hcy)、非對稱性二甲基精氨酸(ADMA)水平及血管內皮功能的影響奠定了基礎。

關鍵詞:蛋白精氨酸甲基轉移酶1;短發夾RNA;基因干擾;同型半胱氨酸;非對稱性二甲基精氨酸;動脈粥樣硬化

中圖分類號:R349 文獻標識碼:A 文章編號:1672-1349(2008)03-0299-04

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