摘要:采用磁性納米顆粒與酶蛋白共沉淀后經戊二醛交聯的方法,制備了磁性交聯核酸酶P1聚集體,并且對比分析了游離酶和固定化酶的部分酶學性質。優化的最佳制備條件為:硫酸銨質量濃度為0.8g/mL,沉淀時間為0.5h,戊二醛體積分數為0.6%,交聯時間為2h,所制得的固定化酶活性回收率為32.4%。酶學性質研究表明,固定化酶的Km值(30.7mmol/L)明顯高于游離酶的(7.27mmol/L),二者最適反應溫度分別為90℃和75℃,最適pH值均為5.2,固定化核酸酶P1對熱和酸堿的耐受性明顯增強,連續反應6次后酶活力仍保留70%,良好的操作穩定性和磁響應性有利于核酸酶P1的工業化應用。
關鍵詞:核酸酶P1;交聯酶聚集體;磁性納米顆粒;酶學性質
中圖分類號:Q814.2 文獻標志碼:A 文章編號:0253—987X(2008)08—1035—05