草莓紅中柱根腐病病原菌的鑒定

劉紫英　康艷萍　袁　斌

摘要：近年來在江西省宜春地區(qū)發(fā)現(xiàn)一種嚴重危害草莓的土傳病害，經(jīng)顯微鏡直接觀察、病原菌分離培養(yǎng)觀察、致病性測定及田間病害調(diào)查，鑒定該病害為草莓紅中柱根腐病，病原菌為疫霉菌(Phytophthora fragariae C.J.Hickman)，屬于卵菌綱霜霉目腐霉科疫霉屬，該病發(fā)生是由于疫霉菌侵染所致。通過對宜春地區(qū)草莓種植園調(diào)查發(fā)現(xiàn)，該病發(fā)病率為20％～40％，嚴重時達50％，平均每667 m²減產(chǎn)30％～50％。

關(guān)鍵詞：草莓；紅中柱根腐病；疫霉菌；鑒定

中圖分類號：S 436．63

草莓以其果實柔軟多汁，味道鮮美，營養(yǎng)豐富等而備受歡迎，素有“水果皇后”之美譽。草莓具有易于栽培，當年結(jié)果，產(chǎn)量高，經(jīng)濟效益好等優(yōu)點，在國際市場上具有重要經(jīng)濟地位。隨著草莓生產(chǎn)規(guī)模的發(fā)展，種植面積擴大，受耕地限制，栽種草莓不能規(guī)范輪作，只能連作，再加之有機肥料施用不足，缺乏抗病品種等原因，致使各種病害逐年加重。草莓紅中柱根腐病是草莓主要病害之一，主要由土傳病原真菌引起；該病是土壤潮濕地區(qū)草莓的主要病害，水旱輪作田和老產(chǎn)區(qū)如我國河北、遼寧等地發(fā)病偏重，是當前草莓生產(chǎn)園區(qū)毀滅性病害，病勢來得兇猛，嚴重時造成整個草莓生產(chǎn)園區(qū)毀滅。筆者對江西省宜春市袁州區(qū)西村鎮(zhèn)、下浦鄉(xiāng)等草莓種植地的調(diào)查，草莓豐香品種抗病性較差，發(fā)病率達20％～40％，嚴重時達50％，平均每667m²減產(chǎn)30％～50％。雖然國內(nèi)外對草莓根腐病已有報道，但對草莓紅中柱根腐病的系統(tǒng)研究報道較少，在江西省關(guān)于該病的研究報道尚未發(fā)現(xiàn)，加之宜春地區(qū)草莓紅中柱根腐病對草莓生產(chǎn)的嚴重影響，本文對草莓紅中柱根腐病病原菌進行了分離鑒定，然后提出對該病害的防治措施，為草莓紅中柱根腐病研究提供一定參考。

1材料和方法

1.1材料來源

江西省宜春市鳳凰街道岐山村的大棚草莓種植地。

1.2癥狀觀察及病原菌的分離鑒定

1.2.1草莓紅中柱根腐病的癥狀觀察

于2006年11月下旬至2007年3月上旬，在宜春市鳳凰街道岐山村的大棚草莓種植地對自然發(fā)病植株所致癥狀進行觀察，觀察草莓紅中柱根腐病危害部位、癥狀特點及病因。

1.2.2病原菌的分離鑒定及培養(yǎng)性狀

草莓紅中柱根腐病標本采于宜春市鳳凰街道岐山村大棚草莓種植地，利用組織分離法分離根部組織、莖(5 mm×5 mm)、葉(5 mm×5 mm)病原，在25℃于PDA平板上培養(yǎng)純化。每個處理設(shè)5個重復(fù)，對其進行觀察。

對病原菌在培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)，生長狀況，顏色，孢子囊性狀，大小，產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)等進行觀察描述并根據(jù)《真菌鑒定手冊》進行鑒定。

1.2.3致病性測定

在超菌工作臺下，將分離純化的病原菌用接種環(huán)涂抹接種到健康草莓植株的根、莖、葉，接種后的植株保濕置于室溫條件下培養(yǎng)，以健康草莓植株為對照，設(shè)置3個重復(fù)，對其進行觀察。再對接種后生成的病原菌進行鑒定。

2結(jié)論

2.1草莓紅中柱根腐病癥狀特點及危害部位

草莓紅中柱根腐病導致草莓根系先從幼根尖端或中部變成褐色或黑褐色而腐爛，后中柱變紅褐腐朽，嚴重時病根木質(zhì)部及髓部壞死褐變，整條根干枯。地上部呈矮化萎縮狀，葉片變黃或萎蔫，最后全株枯死。該病在定植后或初冬均可發(fā)生，被感染的植株呈矮化萎縮狀，下部老葉邊緣變紫紅色或紫褐色，逐漸向上擴展。

2.2病原菌的分離鑒定及培養(yǎng)性狀

利用組織分離法在發(fā)病的植株根及莖上分離到病原菌并在PDA平板出菌落，而在葉片上沒有分離培養(yǎng)出菌落，分離所得的菌落突起，絮狀，高2～4 mm，白色質(zhì)密。

顯微鑒定得孢子囊卵形或倒洋梨形，無乳頭狀突起，常層出形成，(32～90)μm×(22～52)μm，產(chǎn)生游動孢子；孢子囊有明顯的孢子梗，與菌絲無顯著的區(qū)別，孢子梗單一或假軸式分支；藏卵器28～46 μm，平滑，有紋飾；卵孢子22～44 μm。根據(jù)上述特征結(jié)合《真菌鑒定手冊》進行鑒定，可確定該病菌為草莓紅中柱根腐病菌疫霉菌(Phytoph-thora fragariae C.J. Hickman)。

該病由卵菌綱中侵害草莓的疫莓菌侵染引起。病菌以卵孢子在土壤中生活，由病土和病苗傳播。土壤中的卵孢子在晚秋或初冬產(chǎn)生孢子囊，釋放出游動孢子，侵入根部后根部出現(xiàn)菌斑，后又在病部產(chǎn)生孢子囊，借澆灌水和雨水傳播蔓延，游動孢子侵入主根或側(cè)根尖端的表皮，菌絲沿著中柱生長，后中柱變紅色，腐爛。卵孢子在土壤中可存活數(shù)年，條件適宜時可產(chǎn)生分生孢子進行初侵染和再侵染。

2.3致病性測定結(jié)果

通過對致病性測定觀察可見，在健康草莓根部產(chǎn)生了明顯的病原菌菌絲，而在莖和葉上則無菌斑產(chǎn)生，并且取根部產(chǎn)生的病原菌于顯微鏡下觀察，發(fā)現(xiàn)病原菌與原分離培養(yǎng)的疫霉菌(P.frgariae)菌落、孢子囊、孢子梗相同，根據(jù)柯氏法則，確定了該病原菌對草莓的致病性，并且說明該病菌能直接侵染草莓根部，而對莖、葉無直接侵染。

3討論與分析

本文利用組織分離法對草莓紅中柱根腐病菌進行了分離鑒定，通過顯微鏡直接觀察、致病性測定分離接種等試驗確定了草莓紅中柱根腐病，病原菌為疫霉菌(Phytophthora fragariae C.J.Hickman)，屬于卵菌綱霜霉目腐霉科疫霉屬，該病的發(fā)生是由于疫霉菌直接侵染草莓根而對其他組織無直接侵染能力。

溫度和濕度是草莓紅中柱根腐病發(fā)病的關(guān)鍵條件。在溫度低濕度大的情況下易發(fā)病，溫度6～10℃是發(fā)病適溫。調(diào)查發(fā)現(xiàn)，雨水多、排水不良的田塊發(fā)病較重，這與江西省宜春市的氣候特點有關(guān)；低溫陰雨時，草莓紅中柱根腐病病原的孢子囊釋放的游動孢子侵入草莓植株的根部，與草莓疫霉菌的生長習性是一致的；為草莓紅中柱根腐病的防治提供了理論依據(jù)。溫度高于25℃即使?jié)穸仍俅笠膊话l(fā)病。鑒于草莓紅中柱根腐病的發(fā)病特點，農(nóng)業(yè)防治成了草莓種植者常用的防治措施，即進行高溫消毒。在草莓采收后將地里的植株全部挖干凈，施入大量有機肥，深翻土壤灌足水后，在炎熱高溫季節(jié)，使用透明塑料薄膜覆蓋20～30 d，利用太陽能使地面溫度升高到50℃左右滅菌。