編碼大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)換酶短發(fā)夾環(huán)ＲＮＡ質(zhì)粒的構(gòu)建與鑒定

摘要：目的 構(gòu)建編碼大鼠ACEmRNA的shRNA真核表達(dá)載體質(zhì)粒，為利用基因沉默技術(shù)從轉(zhuǎn)錄后水平進(jìn)行高血壓治療的研究做準(zhǔn)備。方法 根據(jù)大鼠ACEmRNA序列設(shè)計(jì)并合成shRNA寡核苷酸片段，退火形成雙鏈并克隆進(jìn)入載體pGenesil－1，并進(jìn)行酶切鑒定和測(cè)序。結(jié)果 酶切證明構(gòu)建的shRNA已插入栽體，經(jīng)測(cè)序證明與設(shè)計(jì)的相同，獲得大鼠ACE的shRNA表達(dá)栽體質(zhì)粒。結(jié)論 構(gòu)建的編碼大鼠ACE mRNA的shRNA真核表達(dá)載體可進(jìn)入哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)表達(dá)短發(fā)夾RNA，經(jīng)Dicer酶裂解成siRNA并降解靶基因mRNA，而達(dá)到基因干擾的作用。為利用其進(jìn)行自發(fā)性高血壓大鼠的降壓治療研究奠定了基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：基因干擾；高血壓；血管緊張素轉(zhuǎn)換酶；短發(fā)夾RNA；載體

中圖分類號(hào)：R392.5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1672－1349(2008)12－1433－03