薛寒青 王艦 周淑蘭
(青海省農林科學院生物所,青藏高原生物技術教育部重點實驗室,青海西寧,810016)
TDZ對誘導大蒜愈傷組織形成的影響
薛寒青 王艦 周淑蘭
(青海省農林科學院生物所,青藏高原生物技術教育部重點實驗室,青海西寧,810016)
TDZ是一種新型植物生長調節劑,具有很強的細胞分裂素活性(CTK),研究了不同濃度TDZ對大蒜愈傷組織培養和大蒜鱗莖分化的影響。試驗結果表明,15%濃度的TDZ對大蒜愈傷組織培養的促進作用最明顯,誘導率達到75%;而在MS+15%TDZ的培養基上,愈傷組織增殖最快,誘導出的黃色致密愈傷組織分化能力最強,質量最好。
TDZ大蒜愈傷組織 誘導
大蒜為百合科蔥屬植物蒜 (Allium sattvumL.)的鱗莖,味辛辣,適應性強。據資料介紹,我國大蒜種植面積約0.8萬hm2,產量達54萬t,居世界第1位[1]。我國也是大蒜出口大國,主要種植地有山東、青海等地。其中青海種植面積達0.27萬hm2,主要種植地區有樂都縣和格爾木。大蒜營養豐富,含有氨基酸、肽類、蛋白質、糖類、脂肪、無機鹽、維生素以及蒜油等多種營養物質。大蒜作為調味品已有數千年的歷史,同時也是天然的藥劑,其具有抗菌消炎、抗癌防癌、降血壓、提高機體免疫功能等作用。目前全世界將其作為天然食物和藥用保健食物,隨著藥理保健研究的深入,其食用量呈逐年上升趨勢[2]。
人工合成的苯基脲衍生物TDZ是一種新型植物生長調節劑,具有很強的細胞分裂素活性(CTK),它的CTK活性要比一般CTK高幾十倍至幾百倍,研究表明,它可以促進植物芽的再生和繁殖,打破芽的休眠,促進種子萌發,促進愈傷組織生長,延緩植物衰老等[3]。并且可以作用其他的植物激素和生理活性物質來調節植物的生長發育,是一個作用力很強的植物生長調節劑,在農業上有廣泛的應用。
近年來,它作為一種有效的形態發生調節劑在植物組織培養快繁體系中得到了廣泛的應用,其應用范圍遍及草本植物和木本植物。
1.1 試驗材料
試驗用大蒜品種為格爾木紫皮大蒜,該品種已通過青海省級品種審定。MS基本培養基可把其分成4個部分:大量元素MSⅠ(濃度為10×),微量物質MSⅡ(濃度為200×),鐵鹽MSⅢ(濃度為100×),有機物質MSⅣ(濃度為100×),置于4℃的冰箱中,按需取量。消毒劑為70%乙醇(C2H5OH)和0.1%的升汞(HgCl2)等溶液現用現配。激素為TDZ。
1.2 試驗方法
①MS培養基配制 取MSⅠ100 mL/L,MSⅡ5 mL/L,MSⅢ10 mL/L,MSⅣ10 mL/L加入蒸餾水定容到1 L,加入蔗糖30 g/L,瓊脂粉6.5 g/L調節pH值至5.8,經過高壓蒸汽121℃滅菌20 min后待用。
②植物生長調節劑的配制 取藥品TDZ配制成5%,10%和15%三種不同濃度,置于4℃的冰箱中保存待用。
③消毒劑的配制 將84消毒液配制成1∶200的溶液,配制70%乙醇(C2H5OH)和0.1%的升汞(HgCl2),配制濃度為1 mg/mL的多菌靈溶液。
④數據統計 在愈傷組織培養試驗中,3個不同TDZ濃度(5%,10%和15%)處理,均在生長20 d,27 d和34 d時分別觀察記錄愈傷組織、出愈率和增殖系數。
TDZ對誘導大蒜愈傷組織形成的影響方差分析(表2~4)結果表明,差異顯著性從F值表中查得F(3,8)= 4.07大于所計算的F統計量3.524,表明各濃度之間沒有差異,這可能由于培養時間過短,愈傷組織生長不明顯所致。

表1 不同濃度TDZ對誘導大蒜愈傷率的影響

表2 第20天時愈傷組織出愈率的方差分析
在愈傷組織形成培養的試驗中,不同濃度的TDZ對愈傷組織形成有不同程度的促進作用,而加有15% TDZ濃度的培養組合對愈傷組織培養的促進作用最明顯(表1,5)。
本試驗通過不同濃度TDZ對大蒜愈傷組織培養和大蒜鱗莖分化的影響,初步得出,在不同的觀察時間MS+15%濃度的TDZ培養基對大蒜愈傷組織培養的促進作用最明顯,誘導率達到75%;愈傷組織增殖最快,誘導出的黃色致密愈傷組織分化能力最強,質量最好。

表3 第27天時愈傷組織出愈率的方差分析

表4 第34天時愈傷組織出愈率的方差分析

表5 處理間方差分析
[1]Wang H M,Liu H M,Wang W J,et al.Effects of Thidiazuron,basal medium and light quality on adventitious shoot regeneration from in vitro cultured stem of Populus alba×P.berolinensis[J].林業研究:英文版,2008(3):257-259.
[2]黃岳.TDZ處理對蘋果梨坐果率和果實生長發育的影響[J].延邊大學農學學報,2008(3):176-180.
[3]吳麗君.TDZ和GA3對提高紅葉石楠組培快繁效率的研究[J].福建農業學報,2008(2):180-190.
Effects of TDZ on the Induction of Callus in Garlic Tissue Culture
XUE Hanqing,WANG Jian,ZHOU Shulan
(Institute of Biology,Qinghai Province Agriculture and Forestry Academy of Science,Qinghai-Tibet Plain Biological Technology Ministry of Education Key Laboratory,Xining,Qinghai 810016)
TDZ is a new plant growth regulator,it has very strong activity of kinetin(CTK).The effect of TDZ were studied on the callus formation and bulb differntiation in garlic.The results showed that:15%TDZ could significantly improve the callus induction in garlic had the most obvious promoter action to tissue culture of garlic.The percentage of callus formation reached 75%,but the callus propagated most quickly on the MS+15%TDZ culture medium,the callus were yellow and compact,the differentiation ability was the strongest,the quality was the best.
TDZ;Garlic tissue culture;Induction
10.3865/j.issn.1001-3547.2009.14.006
青海省科技廳立項重點課題
薛寒青(1965-),女,碩士,研究員,從事蔬菜、花卉組織培養和脫毒工作,電話:0971-5312581,13997070707。E-mail:hanqx77@sina.com
2009-05-04