連接酶介導(dǎo)的誘導(dǎo)熒光共振能量轉(zhuǎn)移法檢測基因點(diǎn)突變

孟祥賢　黃建華　譚擁軍

摘要：發(fā)展了一種基于連接酶介導(dǎo)的誘導(dǎo)熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)用于基因點(diǎn)突變的準(zhǔn)確快速檢測方法，針對特定突變位，最設(shè)計(jì)的核酸探針，當(dāng)與模板之間完全匹配時，被連接形成一條長的雙鏈，雙鏈特異性嵌入熒光染料SYBR Green Ⅰ插入新生的雙鏈區(qū)域，誘導(dǎo)熒光共振能量轉(zhuǎn)移發(fā)生，相反，核酸探針與模板之間不匹配，則不能誘導(dǎo)熒光共振能量轉(zhuǎn)移的出現(xiàn)，利用該方法，成功實(shí)現(xiàn)了口地中海貧血遺傳病兩種普遍存在的點(diǎn)突變Ivs-2-654(C→T)和CD17(A→T)的基因型檢測。

關(guān)鍵詞：連接酶；誘導(dǎo)熒光共振能量轉(zhuǎn)移；SYBR Green Ⅰ；地中海貧血遺傳病

中圖分類號：Q319.31文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A文章編號：1007－7847(2009)04－0283－05