Ｓｕｒｖｉｖｉｎ和Ｌｉｖｉｎ在人骨肉瘤組織中的表達及臨床意義

[摘要] 目的 研究Survivin和Livin在骨肉瘤中的表達及其臨床意義。方法 對38例骨肉瘤及20例骨軟骨瘤患者的臨床病理資料進行回顧性分析，應用免疫組織化學染色結果進行統計學分析。結果 Survivin和Livin在38例標本中陽性率分別為44.7%(17/38)和55.3%(21/38)，Survivin和Livin的表達與患者年齡、性別、骨肉瘤亞型無明顯關系，但與Enneking外科分期有關，Ⅰ～ⅡA期與ⅡB～Ⅲ期之間腫瘤表達率差異明顯(P<0.05)。結論 Survivin和Livin在骨肉瘤組織中有較高比例的表達，可作為預測骨肉瘤預后的重要指標。

[關鍵詞] 骨肉瘤;Survivin;Livin

[中圖分類號] R738[中圖分類號] A[文章編號] 1673-9701(2009)24-26-02

Expression of Survivin and Livin in Human Osteosarcoma and Its Significance

YANG BaojunWANG Guizhi

Medical Group General Hospital of Pingdingshan Coal Leveling Industry，Henan 467000，China

[Abstract] Objective To investigate the expression of survivin and livin in human osteosarcoma. Methods The clinical pathological data of 38 cases of osteosarcoma and 20 cases of osteochondroma were studied retrospectively and the statistical analysis was made of the results obtained by use of immunohistochemistry. Results The expression rates of survivin and livin in osteosarcoma was 44.7%(17/38) and 55.3%(21/38)，respectively. The expression of survivin and livin was correlated with Enneking surgical staging. Its expression rate in Enneking surgical staging Ⅰ-ⅡA was significiantly lower than that in staging ⅡB-Ⅲ(P<0.05). The expression of survivin and livin was not correlated with age and sex and pathological subtypes of osteosarcoma. Conclusion A high expression of survivin and livin is found in the osteosarcoma tissue，which can be used as an important index for predicting prognostic condition of human osteosarcoma.

[Key Words] Osteosarcoma;Survivin;Livin

隨著腫瘤分子遺傳學與分子生物學的發展，凋亡作為一種程序性細胞死亡，廣泛參與細胞的各種生理、病理過程，不僅對細胞發生、分化和維持機體穩態都有很重要的作用，而且還可以通過清除變異的細胞和改變基因表達阻止細胞發生轉化。因此，如果凋亡被抑制，基因發生突變的細胞就會得以繼續生存，從而通過突變導致腫瘤的發生和發展。本文采用免疫組化方法研究凋亡抑制蛋白Survivin和Livin在人骨肉瘤組織中的表達及其臨床意義。

1材料與方法

1.1材料

收集河南省平頂山市平煤醫療集團總醫院病理科1998～2007年診斷骨肉瘤病例38例，術前均未進行放療和化療，其中男性23例，女性15例，年齡7～43歲，平均年齡21歲，所有患者均手術治療，診斷明確，另選取20例骨軟骨瘤標本作為對照組。兔抗人Survivin多克隆抗體購于Labvision生物公司(Rb-6)，兔抗人Livin多克隆抗體購于武漢博士德生物公司(BA1743);免疫組化SP試劑盒及DAB顯色試劑盒均購自福州邁新生物技術公司。

1.2方法

免疫組化染色采用SP法，4μm厚切片，EDTA抗原修復液進行抗原修復。所用抗Survivin抗體濃度為1∶100，抗Livin抗體濃度為1∶50。染色步驟按說明書進行，DAB顯色，蘇木素復染，透明封固，骨軟骨瘤對照組與骨肉瘤組在相同條件下同時處理。

1.3陽性結果判斷

以胞核和(或)胞質出現黃色或黃棕色染色為陽性細胞。隨機觀察10個高倍鏡(400×)視野，每個視野計數100個細胞，共計數1000個細胞，陽性表達細胞數<5%為0分，5%～24%為1分，25%～49%為2分，>50%為3分(如封三圖4和圖5);陽性強度黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。將細胞陽性率與染色強度積分相乘:0分為表達陰性，1~3分為表達弱陽性，4~9分為表達強陽性。

1.4統計學處理

應用SPSS10.0軟件進行統計學分析，進行x²檢驗。

2結果

骨肉瘤中Survivin和Livin的表達:Survivin和Livin均表達于骨肉瘤細胞漿內，Survivin和Livin在38例標本中陽性率分別為44.70%(17/38)和55.30%(21/38)，Survivin和Livin的表達與患者年齡、性別、骨肉瘤亞型無明顯關系，但與Enneking外科分期有關，Ⅰ～ⅡA期與ⅡB～Ⅲ期腫瘤表達率差異明顯(P<0.05)，見表1，與對照組骨軟骨瘤陽性率有顯著性差異(P<0.05)。

3討論

骨肉瘤是原發于骨組織的最常見的惡性腫瘤，發病年齡多位于11～20歲，其次為21～30歲。此類腫瘤惡性程度高，常危及患者生命。隨著20世紀90年代基因治療的興起，開辟了腫瘤治療的新途徑。凋亡抑制基因，是一類對腫瘤細胞起抑制作用的基因。細胞的過度增殖和/或細胞凋亡受到抑制在腫瘤的發生與演進過程中發揮了重要的作用。IAPs是一組caspase抑制蛋白，在人類中包括8個成員:c-IAPl，c-lAP2，NAIP，XIAP，Ts-IAP，Apollon，Survivin和Livin，通過BIR結構與caspase結合并抑制caspase活性，發揮抗細胞凋亡的作用[1]。其中Survivin和Livin是IAP家族中新發現的兩種蛋白，兩者都可以直接或間接抑制caspase凋亡信號轉導過程中的起始分子caspase-9的活化、活性以及效應分子caspase-3/-7的活性而阻斷凋亡的發生過程[2，3]。另外，Survivin在有絲分裂期與紡錘體上的微管蛋白作用而調節細胞分裂，在G2/M期高表達，而在G1和S期迅速降解[4]。Survivin和Livin的表達具有特異性，在絕大多數分化成熟的組織(除胎盤等)不表達或低表達，而在胚胎組織以及大多數實體瘤組織中高表達[5，6]。

本研究中，Survivin和Livin均表達于骨肉瘤細胞漿，少量可見細胞核表達，同時有人發現Survivin胞核表達在部分腫瘤中臨床意義高于細胞漿[7]。Survivin和Livin在38例標本中陽性率分別為44.7%(17/38)和55.3%(21/38)。Survivin和Livin的表達與患者年齡、性別、骨肉瘤亞型無明顯關系，但與Enneking外科分期有關，Ⅰ～ⅡA期與ⅡB～Ⅲ期之間腫瘤表達率差異明顯(P<0.05)。眾所周知，Enneking外科分期越高，患者預后越差，生存期越短。根據上述研究提示，Survivin和Livin可作為判斷患者預后的指標，為進一步針對Survivin和Livin的基因治療的研究提供了直接的可行性證據。

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(收稿日期:2009-02-17)