摘要:以內蒙古阿爾巴斯絨山羊為材料,通過石蠟包埋技術制作皮膚組織切片,利用Sacpic染色法分析內蒙古阿爾巴斯絨山羊3月、5月和10月的毛囊結構,得到了3個時期較為清晰和具有明顯時期特征的形態學圖片。為闡明絨山羊絨毛生長發育提供了組織學基礎。
關鍵詞:阿爾巴斯絨山羊;毛囊:組織切片;Sacpic染色
中圖分類號:S827.8+2.9+1;Q954.539 文獻標識碼:A 文章編號:0439-8114(2009)02-0397-02
毛囊是一個形態和結構較為復雜的皮膚附屬器官,它控制著毛發的生長,其最為顯著的特性就是再生。毛囊大約包含20余種細胞,這些細胞在體內經過復雜的相互作用,共同參與毛囊生長、發育、分化與周期性調節。不同部位的毛囊在形狀、形態上有一定的差別,但其基本結構是相同的。絨山羊的皮膚中有兩種毛囊,即初級毛囊和次級毛囊,初級毛囊產粗毛,次級毛囊產絨毛。山羊絨就是山羊被毛中由次級毛囊生長的一種無髓絨毛纖維。絨山羊皮膚和毛囊結構特征不僅是其生物學特征的重要內容,而且對絨毛產量和品質有直接的影響。絨毛由次級毛囊產生,特別是次級毛囊的大小直接決定了絨毛的細度,因此揭示皮膚和毛囊的發育規律對絨山羊生產指導具有重要的意義。我們通過制作和觀察皮膚組織石蠟切片,分析了絨山羊毛囊結構,為下一步闡明絨山羊絨毛生長發育提供了組織學基礎。
1 材料與方法
1.1 材料取樣
內蒙古阿爾巴斯絨山羊來源于內蒙古農業大學動物園,在體側靠肩胛部取1cm2的皮樣。
1.2 方法
參考文獻[3]制作石蠟切片,采用Sacpic染色法,在顯微鏡下觀察初級毛囊和次級毛囊的形態,并進行比較分析。
1.2.1 石蠟切片的制作 將固定皮樣用1×PBS緩沖液沖洗,不同梯度濃度的酒精逐級脫水,二甲苯透明,將皮樣放入二甲苯:石蠟(1:1)中38℃過夜,56℃左右浸蠟4~5h后將皮樣放置于融化的石蠟中包埋,待蠟凝固后,用刀將蠟修成梯形,焊接于木塊上,切片機切片厚度為8μm。展片后將切片置于載玻片上,37℃烘箱干燥。
1.2.2 Sacpic染色程序 天青石藍溶液8min:Weigert’s蘇木素5min;2%沙黃溶液12min:苦味酸/無水乙醇3min;苦味酸/靛藍洋紅1min。染色之后透明、封片即可進行觀察。
2 結果與分析
2.1 鏡下觀察毛囊結構的總體特點
絨山羊皮膚切片經Sacpic法染色后,在染料作用下,色素顆粒呈黑藍色,角蛋白為黃色,膠原蛋白為藍色,內根鞘為亮紅色,刷狀末端為橙色,外根鞘為灰綠色,平滑肌和紅細胞為綠色,初級毛囊髓質層呈現為綠色。毛囊在皮膚內是很有規律的呈群狀分布,為長圓形,周圍由較寬的致密結締組織環繞形成毛囊群,每個毛囊群中初級毛囊有規律地在毛囊群的一側排列,次級毛囊在另一側。
2.2 3月份毛囊結構特征
3月份,毛囊群中大部分初級毛囊外根鞘較薄,無紅色內根鞘,毛干無髓質,有的毛干脫落,留下有外根鞘的空腔:而次級毛囊大部分濃縮成黑色的細胞團,有的甚至消失,所以毛囊群結構松散,不完整(圖1)。

2.3 5月份毛囊結構特征
5月份為絨山羊毛囊生長旺盛的時期,毛囊群內初級、次級毛囊個數明顯增加,毛囊群也較為清晰、完整。初級毛囊的連結組織鞘和外根鞘較厚,結構也很致密,部分初級毛囊已長出毛干,次級毛囊也出現了內外根鞘(圖2)。
2.4 10月份毛囊結構特征
10月份初級、次級毛囊的個數開始減少,毛囊群又變得不太完整,邊界較模糊,不易分辯。部分初級毛囊已無髓質,有的毛干也開始脫落:有的次級毛囊已萎縮變小,甚至變成黑色的細胞團。初級、次級毛囊毛乳頭萎縮變小,毛干開始變細,紅色內根鞘向上移動變短,外根鞘變薄(圖3)。

3 討論
絨毛的生長呈現周期性變化規律,在一個年周期內,其毛囊活動通常經歷興盛期、退行期、休止期。絨山羊因品種的不同,各時期起動、持續的時間也不同。次級毛囊的活動一般長達10~11個月,初級毛囊可能更長。毛囊的性狀決定了絨毛的產量和品質,毛囊的周期性變化引起了絨山羊絨毛的脫落,因此了解絨毛毛囊的性狀及其周期性變化規律是提高羊絨產量和品質的基礎,很多學者認為絨山羊毛囊的興盛期為4~9月,退行期為10~11月,休止期為12月至次年3月,分別持續6、2、4個月:但各個時期持續的時間不同,興盛期經歷的時間最長,退行期最短。但在毛囊的退行期,因為大多數毛囊的活性還很高,因此在退行期絨毛仍在生長,特別是在前期。還是絨毛的快速生長期。同時我們發現,在毛囊處于休止期的時候已經孕育著毛囊的再生,說明休止期的手囊也不是一成不變的。
(責任編輯 王 珞)