白玉果蔗組培脫毒苗快繁技術研究

林加根 林一心 張樹河

摘要以白玉果蔗脫毒后長出的莖類組織作為外殖體進行離體培養,篩選出各階段適宜的培養基:不定芽誘導培養基為MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA;芽的繼代增殖培養基為MS+5.0mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA;壯苗培養基為MS+0.2mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA;生根培養基為1/2 MS+1.0mg/L NAA+1.0mg/L IBA+2.0mg/L多效唑,在繼代增殖及壯苗培養階段用液體淺層培養。在培養期間,苗勢較好,苗體粗壯,生長均勻,充分證明組培脫毒的可行性。

關鍵詞白玉果蔗;脫毒;組培;快繁技術

中圖分類號S566.1文獻標識碼A文章編號 1007-5739(2009)14-0080-01

白玉果蔗是廣西貴港市特有的地方品種,是繼黑皮、 白蔗、 黃皮蔗之后的又一當家種,因蔗皮乳黃如玉,故稱為“白玉果蔗”。其蔗莖粗壯,節間長、皮薄、汁多、清甜、爽脆、可口,似密汁濃香,又似冰水般清涼,是果蔗中的珍品。但由于連年種植,與其他果蔗品種一樣,其種性有退化和感染病毒的情況。果蔗中花葉病和宿根矮化病目前尚無有效藥物防治,患病植株矮小,節間短,病斑多,產量大幅下降,嚴重影響果蔗的可食性和外觀。組培脫毒技術是克服這一難題的較佳方法,試驗結果表明,經脫毒的果蔗種苗生長快,植株高大,節間長,產量比未脫毒的增產20%~30%左右。因此,組培脫毒是保持果蔗種性、提高產量的有效途徑。

1材料與方法

1.1材料

白玉果蔗植株由福建省農科院甘蔗研究所甘蔗資源圃提供。

1.2脫毒材料的獲取及預培養

從田間取回果蔗植株中尾梢的莖段,將莖段砍成雙芽苗,然后將砍好的莖段放在52℃的恒溫水槽中浸泡30min,再于38℃ 恒溫條件下培植10~15d,待蔗芽萌發1~2片葉時,把蔗芽切下,剝去外部葉鞘,用自來水沖洗干凈后,先用75% 酒精進行表面消毒,再用2% 次氯酸鈉溶液消毒10~15 min或0.1% 升汞消毒8min,然后用無菌水沖洗4~ 5次。移至無菌條件下,用接種針和解剖刀小心剝離莖尖生長點以外的組織,直至露出生長點為止(最好在解剖顯微鏡下進行)。切下約l~2mm 的莖尖組織(1個生長點帶1~2個葉原基),然后接種到培養基上進行誘導培養。

1.3培養條件與方法

以MS為基本培養基,附加不同濃度的激素(6-BA)、生長素(NAA、IBA),添加蔗糖3%、活性炭0.05%、瓊脂0.65%,pH值5.8,培養溫度26~28℃,光照強度1 500~2 000Lx,光照時間10~12h/d。

2結果與分析

2.1初代培養

接種后的莖尖10d后開始膨大萌動,20d后即可將萌動生長的外殖體轉接到繼代增殖培養基MS+4.0~5.0mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA上繼代培養,經幾次轉接逐漸形成叢生芽。

2.2不同濃度6-BA對繼代增殖的影響

將已分化的植株接入不同濃度激素組合的增殖分化培養基中進行培養,結果見表1。可以看出,在NAA濃度相同的情況下,低濃度激素組合的增殖率差,但苗的生長較均勻,不產生叢芽苗。隨著激素濃度的提高,增殖率也隨著提高,在2.0mg/L 6-BA時開始有叢芽苗產生。從快速增殖方面考慮,MS+4.0~5.0mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA是較好的增殖配方。

2.3壯苗及液體培養

由于組培苗在繼代擴繁階段主要是以叢生芽的方式增殖,芽苗大部分呈叢簇團狀生長,轉生根時因苗太小,大部分達不到苗高1cm以上有2~3片葉的要求,因此壯苗培養是生根前的關鍵步驟,同時壯苗培養可采用液體培養方式進行。結果表明(表2),液體培養比固體培養節省成本,且苗生長均勻、健壯,生長速度較快。經15~20d培養即有95%的植株可誘導生根。

2.4根的誘導

將無根的幼苗3~5株為1叢轉入生根培養基。結果表明(表3),不同的植物生長素對誘導生根都有較強的效果,其中1/2 MS+1.0mg/L NAA+1.0mg/L IBA+多效唑2.0mg/L的配方根苗粗壯、生長快,為較佳的生根培養基。

2.5組培苗的假植

將已有完整根系、8~12cm高的瓶苗移出培養室,在自然光照下煉苗5d,然后洗去培養基,叢植于營養土中。種植后噴灑70%甲基托布津800倍液殺菌防病,保持相對濕度在80%左右,當苗長到20cm以上即可定植大田。

3小結與討論

(1)白玉果蔗脫毒苗在繼代增殖及壯苗階段,主要采取液體培養的方法,效果顯著。與固體培養基相比,它不僅降低了生產成本,且苗長勢好,苗粗壯、均勻,生長快速,可在大規模工廠化生產中推廣應用,但其配套技術有待進一步研究完善。

(2)生根前壯苗培養,對提高生根率尤為重要。由于在繼代擴繁階段,芽苗是叢生狀繁殖,苗生長參差不齊,只有通過壯苗培養,降低激素濃度(0.2~0.5mg/L 6-BA),提高生長素的比例,才能有利于芽苗生根,使植株生長較整齊一致。

4參考文獻

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