天麻共生菌簡易培養技術

謝學強

摘要介紹了利用居室一角、蒸煮食品用壓力鍋等家用設施設備,進行天麻共生萌發菌和共生蜜環菌的簡易培養技術,以期為天麻的栽培提供參考。

關鍵詞天麻;萌發菌;蜜環菌;簡易培養技術

中圖分類號Q93-335文獻標識碼B文章編號 1007-5739(2009)21-0104-02

天麻(Gastrodia elata Bl.)人工栽培有無性繁殖和有性繁殖2種方法。無性繁殖栽培是播種米麻、白麻生產天麻的方法,有性繁殖栽培是播種天麻種子生產天麻的方法。前者需要蜜環菌(Armillariella mellea)作為共生菌為天麻提供營養,后者先要萌發菌后要蜜環菌作為共生菌為天麻提供營養。培養這2種共生菌,常需要一些能保證無雜菌感染的專用設施設備,如高壓蒸汽滅菌鍋、接種室、超凈工作臺或接種箱等。現將天麻共生菌簡易培養技術總結如下。

1袋裝或瓶裝共生菌培養

1.1培養基配制

1.1.1萌發菌培養基配制。主要配方為闊葉樹樹葉78%、麥麩20%、石膏1%、白糖1%。樹葉以殼斗科的為好,如板栗、麻櫟、青岡等。首先將樹葉用水預濕,再將石膏、白糖溶于水中,加入麥麩攪拌均勻后澆入預濕的樹葉中,充分拌勻,并調節含水量至60%~65%(用手抓一把并用力握捏,指縫有水溢出但不滴水即可)。培養基配制好以后,分裝到菌袋或罐頭瓶中。菌袋用耐高溫的聚丙烯或低壓聚乙烯塑料袋。裝料時,用大拇指稍加按壓,使培養基松緊適度,并用木錐從袋口或瓶口向里打一孔,扎緊袋口或用耐高溫薄膜封瓶口。培養基裝填不宜過少和過多,袋裝以封口后料袋長15cm為宜,瓶裝以裝至瓶頸為宜。

1.1.2蜜環菌培養基配制。枝段準備:選用闊葉樹尚未萌發的樹枝,尤其是殼斗科、樺木科植物的樹枝,如麻櫟、槲櫟、青岡、樺木等,其他如野櫻桃、樗樹等,這些植物呈灌叢樣生長的,可進行擇伐,喬木類可進行修剪,利用擇伐株或修剪枝做枝段,可做到資源的永續利用。將直徑1~2cm的樹枝,斜砍成3cm長的小段,放入0.25%硝酸銨溶液中浸泡20min后,撈出裝入罐頭瓶,裝填緊實。培養基主要配方:1號為去皮去芽眼馬鈴薯200g、白糖20g、黃豆粉5g、磷酸二氫鉀1g、瓊脂16g,加水定容至1 000mL,pH值自然;2號為玉米粉20g代替馬鈴薯,其他成分同1號。培養基配制方法:對1號而言,先將馬鈴薯切成1cm3的小塊,銻鍋中加水煮沸20min后,用雙層紗布過濾,取其濾液,加入瓊脂,加熱使瓊脂溶化后再加入其他成分,充分攪勻定容后備用。對2號而言,將瓊脂加入1 000mL水中熬煮溶化后,加入其他成分,充分攪勻后備用。將配制好的培養基趁熱分裝到枝段瓶中,使液面高出枝段1cm左右,用耐高溫薄膜封口。

1.2培養基簡易滅菌

用家庭用24cm或26cm壓力鍋來滅菌,每次可對6~7袋(瓶)培養基進行滅菌。在鍋內加入5~6cm深的水,將需要滅菌的袋(瓶)料放在鍋內蒸屜上,加蓋后加熱至出蒸汽,5~6min后蓋上壓閥,直至閥門冒出蒸汽時開始計時,再維持閥門冒出少量蒸汽的狀態達1.0~1.5h,之后將鍋搬離火爐,自然冷卻后打開鍋蓋,取出袋(瓶)裝培養基。也可用土蒸鍋來滅菌。由于鍋內溫度最高為100℃,所以需維持8h以上才能達到滅菌目的。

1.3接種培養

1.3.1簡易接種室準備。選干凈房間一隅,用粗鐵絲或木條搭成框架,四周及頂部套上塑料薄膜,注意讓膜邊相接處和膜邊與地面相接處盡量不漏氣,構成一個“密閉室”。“密閉室”長、寬、高均為2m左右。將需要接種的培養基及其他用具和材料搬入“密閉室”后,用甲醛熏蒸消毒。甲醛用量為10mL/m3,這個“密閉室”共用80mL甲醛。將甲醛倒入耐高溫的容器如搪瓷碗中,放在酒精燈上加熱熏蒸即可。

1.3.2菌種準備與接種。共生菌菌種可在市場上購買,可以購買試管母種或袋(瓶)料原種。萌發菌主要有小菇屬(Mycena)的石斛小菇(M.dendrobii)、蘭小菇(M.orchicola)、開唇蘭小菇(M.anoectochila)、紫箕小菇(M.osmundicola)等,以石斛小菇最好。蜜環菌有許多菌株,各地出售的幾乎都有差異。如果能自己分離純化或提純復壯2種共生菌更好。消毒后次日,換上干凈衣服,戴上口罩,進入“密閉室”接種。將試管母種或袋(瓶)料原種用接種鏟等工具挑起,迅速放入滅菌袋料上剛打出的孔中或放入剛揭開封口膜的瓶中,立即用透明膠封住孔口或用原封口膜封住瓶口。試管母種,1管可轉接3~5袋(瓶)料;袋(瓶)料原種,1袋(瓶)可轉接50~60袋(瓶)料。接種鏟等工具可用粗鋼絲打制而成。接種前及每隔一段時間,用75%酒精將雙手消毒,并將接種工具在酒精燈火焰上灼燒消毒。最好2個人1組互相配合進行接種,一人打孔或揭封口膜和封口,一人挑菌和接種。打孔先用75%酒精涂抹打孔處消毒。全部操作應盡量在酒精燈邊進行。

1.3.3培養。接種完畢后,將袋(瓶)料放在潔凈、干燥、光線暗淡、溫度穩定在20~25℃的房間中培養。要保持溫度,可用電爐或電熱絲通電加溫,也可在安裝了煙囪、火道及火墻的房間外燃燒炭、秸稈等燃料來加溫。萌發菌接種培養1~2個月后,菌絲即可長滿整袋(瓶)的樹葉,看上去好象是樹葉長滿了白色霉層一樣,此即菌葉。天麻有性繁殖栽培時,即用菌葉來伴播天麻種子(將粉塵樣的天麻種子均勻撒播在菌葉上),借以提高天麻種子的發芽率。天麻種子在4~8月播種,萌發菌需在2~6月接種培養。蜜環菌接種培養20~45d后,菌索即長滿菌瓶,看上去像每條枝段上長出了許多棕色或淺棕色根系一樣。瓶裝菌枝可用于無性繁殖時伴播米麻、白麻,也可用于有性繁殖時與萌發菌一起伴播天麻種子,還可用于進一步培養菌棒。為了保證米麻、白麻、天麻種子的適期播種和滿足生產上培養菌棒的需要,瓶裝菌枝應在前一年12月至當年4月接種培養。

2蜜環菌土培菌枝的培養

2.1枝段和基礎培養料制備

2.1.1枝段制備。與瓶裝菌枝的基本相同,但直徑可以大些,兩端斜砍成10cm長,并斜砍3~4個魚鱗口。

2.1.2基礎培養料制備。一是山林中的天然腐殖土,揀去粗石塊和活草根即可。二是半腐熟落葉加砂,晚秋收集闊葉樹落葉,堆放在坑中,加水濕透,蓋膜使之腐熟,翌年春天,用腐葉5份加高粱粒大小的砂子1份,拌合均勻即成。三是闊葉樹粗鋸末2份或3份加高粱粒大小的沙子1份,拌合均勻即成。調節各種基礎培養料含水量至60%~65%后備用。

2.2培養方法

2.2.1地下坑培法。挖一土坑,長、寬各60cm,深30cm,挖松坑底,整平后鋪1層闊葉樹濕樹葉(壓實后厚1.5cm即可,下同)。樹葉上擺1層枝段,各枝段相互平行靠緊。在枝段層上前后左右每隔10cm擺一枝瓶裝菌枝。接著再擺1層枝段。最后,撒上1層基礎培養料,不宜過厚,以填滿枝段縫隙并蓋住枝段為度。如此,便做完了第1層菌枝。照此法,在第1層菌枝上還可依次往上再做5~6層。最頂1層,蓋基礎培養料后再蓋砂土5~6cm厚,并鋪上1層樹葉保溫保濕。培養50d左右,蜜環菌長滿枝段,即可用于伴播米麻、白麻、天麻種子或用于培養菌棒。

2.2.2箱培法。是用紙箱、木箱或竹筐等透氣透水容器來代替土坑培養菌枝的方法。在箱底鉆若干通氣排水小孔,鋪1層小石頭,小石頭上撒砂土2~3cm厚,再按地下坑培法的樣子進行菌枝培養即可。

3蜜環菌菌棒的培養

菌棒是長有蜜環菌菌索的粗樹棒,也叫菌材。它可用于天麻有性繁殖栽培,但更主要的是用于天麻無性繁殖栽培和生產蜜環菌菇體(出菇),因此菌棒生產的意義很重要。培養菌棒,所用的樹種和基礎培養料均與土培菌枝的相同,培養方法也與之大同小異。但應注意以下幾點。

3.1場地選擇和準備

菌棒生產場地要靠近樹林或天麻栽培地,最好選在天麻栽培地的中心;場地坡度不得大于30°;高海拔地區選陽山,低海拔地區選陰山;場地土壤土層深厚,上層砂土下層黏土,土質弱酸性;不選熟地或荒地而選荒山或樹林。場地選好后,應除草、平地或改成小梯田。

3.2菌種準備

選用無雜菌感染,表面有菌索,菌索細嫩、棕紅色且有白色生長點的土培菌枝作菌種,也可用瓶裝菌枝作菌種。

3.3培養方法

與土培菌枝的基本相同,但有以下區別:生產菌棒的土坑應長些,長為90cm;所用樹棒同樣要新鮮,要砍好魚鱗口,但與枝段相比應粗些和長些,長為30cm;每層菌枝實際上包含2層枝段,每坑可培育12~13層菌枝,而每層菌棒只有1層樹棒,每坑可培育5~6層菌棒。

3.4培養時間

菌棒培養需1~2個月才成,因此當米麻、白麻、天麻種子在4~8月播種時,菌棒應在2~6月接種培養。

3.5蜜環菌更新或更換

同一菌株的蜜環菌,連續使用4~5代后就出現退化現象,引起2種栽培方式的天麻產量降低,品質變劣,因此應及時用新菌株或用老菌株提純復壯的菌株進行蜜環菌的更新或更換。要求每隔4~5年,從母種的分離純化開始,重新生產蜜環菌的各級菌種。萌發菌也有同樣的現象發生。

4參考文獻

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