湖南瓦鄉人紅細胞血型研究

皮建輝, 周建波, 熊海霞, 廖芳芳

(懷化學院生命科學系,湖南懷化 418008)

自從1901年奧地利蘭茨泰納發現和確定人類第一個血型系統ABO血型系統后,人們對于血型的認識逐漸加深,目前已發現人類存在20余種血型系統.血型是一種十分穩定的遺傳性狀,成為人類的一種重要遺傳標記,不同人種或同一人種的不同民族,以及同一民族的不同群體間紅細胞血型基因頻率分布都有所不同,這對研究人類起源、進化和種族間的差異有一定意義.目前我國的56個民族紅細胞血型都有相關的研究報道,但是湖南瓦鄉人這一在族群認同上至今還存在爭議的獨特群體,僅有語言文化、宗教信仰等民族學方面的研究,生物學方面的研究很少[1].為此,我們于2008年對湖南瓦鄉人的血型分布情況進行了調查分析,增補了湖南瓦鄉人生物學研究的內容,同時也為瓦鄉人的族源研究提供了參考資料.

1 材料與方法

1.1 血樣采集

2008年5月,在湖南沅陵縣隨機調查了230名父母均系瓦鄉人而彼此間無血緣關系的瓦鄉人學生.用臨床用一次性采血管 (事先已涂抹有抗凝劑)在肘正中靜脈處分別采集靜脈血5～8 ml,加上標簽后于保鮮盒中保存備用.

1.2 血型鑒定方法

采用平板法鑒定ABO血型;采用室溫試管法鑒定MN血型;采用抗人球蛋白法鑒定Rhesus血型;采用室溫鹽水試管法鑒定P血型;S抗原用室溫鹽水試管法、s抗原用間接抗人球蛋白方法.抗A,抗B標準血清來自長春生物研究所博德公司,效價1∶256;其他標準血清均為上海紅十字血液中心產品.

1.3 基因頻率的計算方法

Rhesus血型系統的基因頻率計算依據趙氏法 (趙桐茂,1987)[2],其余的血型系統的基因頻率計算依據Mourant等人著書所用推算公式 (Mourant et al.1976)[3].

1.4 遺傳距離計算與聚類分析

遺傳距離 (D)根據

(其中 x和y分別為兩個民族間相同性狀各自所占的百分比,m則是所取性狀的個數)計算所得,系統樹的構成則是根據Sneath和Sokal氏的不加權聚類原則繪制(Sneath and Sokal,1963)[4].

2 結 果

瓦鄉人的四種血型系統分型結果如表1～4.其中P血型系統采用單一抗血清檢查,不足以作Hardy-Weinberg吻合度測驗,對其余的ABO、MNSs、Rhesus三種血型均進行了Hardy-Weinberg吻合度測驗,X2檢測表明其期望值和觀察值的吻合度良好 (p>0.05).

2.1 ABO血型系統

瓦鄉人的ABO血型分布接近湖南南部漢族的分布(r=0.6287、p=0.2302、q=0.1411)[5],與廣西壯族ABO血型的分布略有差異 (r=0.6722、q=0.1791、p=0.1487)[6].根據報道,中國人ABO血型分布的主要特點是基因q的頻率與地域有密切關系,以長江流域為界劃分為南北群體,北方人的q值高,在0.2～0.3之間,南方人的q值低,在0.2以下[7].湖南瓦鄉人ABO血型的基因頻率q值為0.1461,符合這一規律.

表1 湖南瓦鄉人ABO血型系統的分布

2.2 MNSs血型系統

國內已有的關于MNSs血型系統在漢族中的分布報道表明,基因頻率m在南方和西南地區漢族比較高,其次是東北地區,最低是上海[8].湖南瓦鄉人的基因頻率m(0.5196)略大于基因頻率n(0.4804),與南方民族的分布特征 (m>n)相符合[8].中國人的基因頻率S均小于0.1,湖南瓦鄉人的基因頻率S值也很低,僅為0.0152,符合這個分布規律.中國絕大多數人群與世界上大部分其他人群一樣,N與S的連鎖率小于M和S的連鎖率,湖南瓦鄉人NS頻率 (0.0228)比MS頻率 (0.0272)小,符合這一基本規律.但與NS的連鎖率為0的結果[9-10]存在明顯差異.

表2 湖南瓦鄉人MNSs血型系統的分布

2.3 Rhesus血型系統

230例瓦鄉人中僅發現一例D陰性 (為ccdee),基因頻率d僅為0.0659,CDe的頻率很高,達0.7588.C基因在我國南方人群中的頻率均超過0.7,北方民族一般超過0.6但不足0.7,僅西北的維吾爾族與哈薩克族在0.5～0.6之間.烏茲別克、柯爾克孜和塔塔爾這些中亞細亞民族都不到0.4,E基因在我國北方民族和西北的維吾爾族中,其頻率往往超過0.25,具中亞細亞血統的西北少數民族中則在0.20左右,而在我國南方民族中僅在0.20以下[11].本次調查瓦鄉人的七種表現中以CCDee的出現頻率最高,其中基因C和E的頻率分別為0.7674和0.1791,符合南方民族的整體分布規律.

表3 湖南瓦鄉人Rhesus血型系統

2.4 P血型系統

在調查的230瓦鄉人中發現P1(-)型166人占72.17%,P1(+)型64人占27.83%.P1基因頻率在中國人群的最高值為新疆維吾爾族 (0.4174)[12],最低值為廣東客家人 (0.0917)[13],而且分布似乎呈現由南向北的增高趨勢.P1基因頻率在南方民族的分布普遍低于0.2[2],湖南瓦鄉人的P1基因頻率為0.1391,符合這個規律.

表4 湖南瓦鄉人P血型系統

3 討 論

3.1 血型在不同民族間的表型差異分析

我們比較了湖南瓦鄉人與云貴高原周邊的其他8個民族 (貴州的苗族、侗族、布依族、仡佬族、水族[14-15]和湖南的土家族、漢族[16-17]以及廣西的壯族[18-19])的四種血型系統中各血型出現率的差異,其求得的 u值如表5所示,可知瓦鄉人與苗族、侗族、壯族、漢族的差異比較顯著,而與土家族、水族的差異比較小.

表5 瓦鄉人與其他8個民族各種血型出現率的差異比較 (u值)

3.2 瓦鄉人與南方部分民族的聚類分析

遺傳距離是各種遺傳標記的基因頻率平均值的函數,它與種族、地理位置、語言、宗教文化等因素有關,民族間的遺傳距離反映它們之間的族源或血緣關系.根據ABO血型系統的表現型頻率計算瓦鄉人與云貴高原周邊的其他8個民族[14-19]兩兩間的遺傳距離(表6)并作聚類分析 (圖1),表明瓦鄉人與湖南土家族的遺傳距離 (0.2481)最近,與貴州水族 (0.3509)的遺傳距離次之,而與貴州仡佬族的 (0.7479)最遠.說明湖南瓦鄉人在紅細胞ABO血型的分布與湖南土家族及貴州水族比較接近.

表6 瓦鄉人與其他8個民族兩兩之間的遺傳距離

在聚類圖上,土家族、漢族、瓦鄉人首先聚類,而布依族和侗族則先聚類后再與之聚為第Ⅰ類;而苗族和水族則先聚類后再與壯族聚為第Ⅱ類;仡佬族作為一個單一的群體成為第Ⅲ類.有資料表明,近代侗族、壯族、水族、布依族等民族均發源于唐宋時期的“僚”,于北宋初年前后分離出來[20].但是族源作為一個歷史范疇,不是一成不變的,在當今民族中,由于長期以來的通婚、混居導致各民族間的基因交流,因此近代民族的來源往往都不是單一的,通常是多個群體的集合體.

圖1 9個民族與群體ABO血型基因頻率系統樹

“瓦鄉人”是指聚居在長江南岸湘、鄂、川、黔交界的武陵山脈,自貴州苗嶺分支,行烏江、沅江間,蔓延于湘西北的澄水、酉水、武水一帶,迄洞庭湖西境平山上的古五溪蠻地的群體.瓦鄉人這一名稱,首先是由其自稱而來.瓦鄉人自稱“果熊”,“果”與“講”、“瓦”在當地方言中諧音,“熊”即“鄉”,“果熊”就是“講鄉話”、“講鄉話的人”,即瓦鄉人[21-22].關于“瓦鄉人”的族群認同經過了30年之久,1956年國家民委根據其語言特征將其確定為漢族;但自1982年開始,“瓦鄉人”認為自身的語言、服飾、宗教與苗族同源,申請要求國家民委認同其為苗族成分;至20世紀80年代以后,隨著黨的民族政策的加強,“瓦鄉人”的民族意識空前高漲,要求更改民族的愿望更強烈,最后主要根據地域分布、婚姻狀況和自己的愿望紛紛更改為苗族、土家族.從遺傳距離與系統聚類圖來看,湖南瓦鄉人似乎與土家族有著較深的淵源.有研究表明,秦滅巴后,巴人流入五溪[23](五溪即為瓦鄉人的發源地古五溪),成為土家族祖先.然而,楚國大夫屈原放逐沅湘時,曾造訪瓦鄉,并在其《楚辭》中作了瓦鄉人以捕魚為業,其語不通的描述.因此,在巴人流入五溪以前,實際上瓦鄉人就已經存在.也就是說,瓦鄉人來自于土家族或早期的巴人有悖于歷史時期.本文關于瓦鄉人紅細胞血型的研究結果只能為探討瓦鄉人的族源提供相關的參考資料,對于瓦鄉人的來源,還有待生物學和民族學的進一步的研究.

[1]皮建輝,李林,周建波,等.湖南瓦鄉人舌運動類型的遺傳學研究 [J].懷化學院學報,2009,28(5):51-54.

[2]趙桐茂.人類血型遺傳學 [M].北京:科學出版社,1987,231-234.

[3]Mourant A E,et al.The Distribution of the Human Blood Groups and Other Polymorphisms,2ed[M].Oxford:Oxford University Press,1976:49-56.

[4]Sneath P H A and Sokal R R.Numerical Taxonomy,Freeman,San Francisco,1973:201-213.

[5]呂靖南.湖南邵陽地區6028人ABO血型調查 [J].輸血及血液學,1979,3(3):19.

[6]韋業華,黃立英.貴州省仡佬族、水族、廣西壯族ABO血型調查研究 [J].人類學學報,1995,14(1):52-53.

[7]金峰,杜若甫,趙紅.湘西土家族、苗族紅細胞血型分布 [J].遺傳,1993,15(4):1-5.

[8]血型調查組.我國十六個民族的血型調查報告Ⅱ:MN及P血型調查結果 [J].中華血液學雜志,1980,1(6):352-356.

[9]肖春杰,郝露萍,張衛紅,等.納西族和普米族的紅細胞血型分布 [J].遺傳學報,1995,22(4):252-257.

[10]肖春杰,郝露萍,張衛紅,等.云南阿昌族的紅細胞血型分布 [J].人類學學報,1994,13(4):140-143.

[11]血型調查組.我國十六個民族的血型調查報告——Rh血型調查結果 [J].中華血液學雜志,1981,2(3):209-211.

[12]袁達義.新疆維吾爾族的紅細胞血型系統的研究 [J].中華血液學雜志,1984,5(5):305-309.

[13]郝露萍,杜若甫.客家人的紅細胞血型分布 [J].人類學學報,1993,12(3):255-258.

[14]萬昌發,鄭周英,許玉英,等.貴州5個少數民族的血型分布調查 [J].中國輸血雜志,2001,14(3):178-180.

[15]覃筱燕,張淑萍,楊林,等.貴州三都地區水族人群ABO血型分布 [J].人類學學報,2004,23(2):169-170.

[16]劉 陽,田儒林,向 輝,等.湘西自治州土家族、苗族、漢族ABO及RhD血型抗原分布調查 [J].臨床輸血與檢驗,2003,5(3):199-200.

[17]皮建輝,佘朝文,舒孝順.湖南侗族、漢族ABO血型的調查與分析 [J].湘潭師范學院學報 (自然科學版),2002,24(2):78-80.

[18]朱芳武,覃成號,林光琪,等.廣西壯族三個組群ABO的及MN血型的人類學研究 [J].廣西民族研究,1994,(3):62-65.

[19]杜詩庫,蘭艷,韋葉生,等.百色地區壯族血型基因頻率調查 [J].右江民族醫學院學報,2003,25(6):840.

[20]尤中.唐宋時期的僚 [J].民族研究,1983,4:12-21.

[21]張永家,侯倉佳.關于“瓦鄉人”的調查報告 [J].吉首大學學報 (社會科學版),1984,5(1):109-112.

[22]明躍玲.民族識別與族群認同——以湘西紅土溪村的民族識別過程為個案 [J].云南社會科學,2008,(2):42-45.

[23]顏勇.土家族族源論析 [J].貴州民族研究,1993,(4):133-135.