性別對(duì)小鼠高脂血癥動(dòng)物模型的影響

劉 靖，陸大祥，戚仁斌，王彥平

（1.佛山科學(xué)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)院生理病生教研室，佛山 528000；2.暨南大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室，廣州 510632）

近年來(lái)糖尿病、心腦血管疾病的患病率迅速上升。大量研究表明，高脂血癥是促進(jìn)心腦血管疾病發(fā)病的主要危險(xiǎn)因素之一，還可導(dǎo)致脂肪肝、肝硬化［1，2］等，嚴(yán)重影響身體健康和生活質(zhì)量。建立高脂血癥動(dòng)物模型是篩選治療高脂血癥藥物的必要條件。

從文獻(xiàn)報(bào)道來(lái)看，多數(shù)與高脂血癥相關(guān)的實(shí)驗(yàn)研究偏好選用雄性動(dòng)物［［3，4］，也有部分研究選用雌性動(dòng)物［5］。在對(duì)人類高脂血癥相關(guān)因素的研究中，普遍認(rèn)為性別不同可造成高脂血癥的發(fā)病率差異［6，7］，但是也有部分研究認(rèn)為性別不是高脂血癥的相關(guān)因素［8］。如果實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的脂質(zhì)代謝明顯受性別因素的影響，那么在復(fù)制高脂血癥模型時(shí)，就應(yīng)該采用雌雄各半進(jìn)行研究，劉亞平等［9］在2型糖尿病造模過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，高糖高脂飼料喂養(yǎng)8周后，雄、雌性大鼠均可發(fā)生高血糖、脂質(zhì)代謝紊亂，雌性大鼠造模成功率低穩(wěn)定性差，但針對(duì)不同性別實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)高脂血癥造模效果的實(shí)驗(yàn)報(bào)道少見。故本實(shí)驗(yàn)通過(guò)連續(xù)喂養(yǎng)高脂飼料建立高脂血癥模型，觀察不同性別小鼠在高脂血癥造模中血脂四項(xiàng)的變化，比較血脂變化的差異。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

健康成年昆明種小鼠40只，雌雄各半，體重（25±5）g，由廣東省動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供［SCXK（粵）2003-0002，粵監(jiān)證字2004A019］。

1.2 藥物和試劑

膽固醇由上海伯奧生物科技有限公司提供，批號(hào)：040901。丙硫氧基嘧啶由廣州康和藥業(yè)有限公司提供，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字H44022824。

1.3 實(shí)驗(yàn)儀器

美國(guó)Beckman公司CX系列全自動(dòng)生化分析儀，德國(guó)Eppendorf公司5415D型高速離心機(jī)。

1.4 高脂血癥模型的建立

用自制高脂飼料連續(xù)喂養(yǎng)小鼠2周［10］來(lái)建立高脂血癥模型，高脂飼料［11］配方改良為10％自制豬油，1％膽固醇，0.2％丙硫氧基嘧啶，其余為基礎(chǔ)粉型飼料，由廣東省動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。

1.5 分組及處理

隨機(jī)分為4組：雄性對(duì)照組、雌性對(duì)照組、雄性高脂組、雌性高脂組，每組各10只，對(duì)照組給予正常飼料喂養(yǎng)，高脂組給予自制高脂飼料喂養(yǎng)。

1.6 測(cè)定指標(biāo)

實(shí)驗(yàn)2周末，空腹12h，眼球取血處死動(dòng)物，離心收集血清。用生化分析儀分別檢測(cè)血清總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）的含量。高脂血癥主要是指血清總膽固醇（TC）或甘油三酯（TG）水平過(guò)高和（或）血清高密度脂蛋白-膽固醇（HDL-C）水平過(guò)低。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法

2 結(jié)果

2.1 高脂飲食對(duì)小鼠血清總膽固醇的影響

雌雄高脂組小鼠血清TC均明顯高于自身對(duì)照組（P＜0.01），雌雄組之間無(wú)顯著性差異（表1）。

表1 高脂飲食對(duì)小鼠血清總膽固醇的影響（n=8）Tab.1 Effect of high-fat diet on serum TC in mice（n=8）

2.2 高脂飲食對(duì)小鼠血清甘油三酯的影響

各組小鼠血清TG間無(wú)明顯差異（表2）。

表2 高脂飲食對(duì)小鼠血清甘油三酯的影響（n=8）Tab.2 Effect of high-fat diet on serum TG in mice（n=8）

2.3 高脂飲食對(duì)小鼠血清高密度脂蛋白膽固醇的影響

雄性高脂組小鼠血清HDL-C明顯高于自身對(duì)照組（P＜0.05），雌性高脂組小鼠血清HDL-C明顯高于自身對(duì)照組（P＜0.01），雌雄組之間無(wú)明顯差異（表3）。

表3 高脂飲食對(duì)小鼠血清高密度脂蛋白膽固醇的影響（n=8）Tab.3 Effect of high-fat diet on serum HDL-C in mice（n=8）

2.4 高脂飲食對(duì)小鼠血清低密度脂蛋白的影響

雌雄高脂組小鼠血清LDL均明顯高于自身對(duì)照組（P＜0.01），雌雄組之間無(wú)明顯差異（表4）。

表4 高脂飲食對(duì)小鼠血清低密度脂蛋白的影響（n=8）Tab.4 Effect of high-fat diet on serum LDL in mice（n=8）

3 討論

目前，冠心病（CHD）、高血壓等心腦血管疾病已經(jīng)成為危害人類健康的主要病因。研究表明，高脂血癥引起的動(dòng)脈粥樣硬化（AS）是造成冠心病、高血壓和腦血管疾病的主要原因。高脂血癥主要是指血清總膽固醇（TC）或甘油三酯（TG）水平過(guò)高和（或）血清高密度脂蛋白-膽固醇（HDL-C）水平過(guò)低。

建立高脂血癥模型的方法以化學(xué)物質(zhì)誘導(dǎo)法最為常用，即經(jīng)消化道給予實(shí)驗(yàn)動(dòng)物高脂飼料或脂肪乳劑，與人類由于膳食結(jié)構(gòu)改變而形成的高血脂癥相似，對(duì)于研究高血脂癥的形成以及調(diào)脂藥物的開發(fā)具有一定價(jià)值。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物常選取血脂蛋白構(gòu)成、肝臟膽固醇與脂蛋白代謝酶的調(diào)節(jié)方面應(yīng)盡可能地與人相近的動(dòng)物品種，如家兔、大鼠、小鼠、金黃地鼠、豚鼠等［3，4，12，13］，特別是小鼠成本低廉、易于飼養(yǎng)管理、取材方便，又能較好地反映各種實(shí)驗(yàn)因素對(duì)其脂質(zhì)的吸收、分解及合成等代謝環(huán)節(jié)的影響，因而被作為高脂血癥模型動(dòng)物廣泛用于降脂藥物的研究開發(fā)。

在對(duì)高脂血癥相關(guān)因素的研究中，普遍認(rèn)為性別不同可造成高脂血癥的發(fā)病率差異，女性絕經(jīng)前高脂血癥的發(fā)病率一般低于男性，其原理可能和雌雄激素對(duì)脂質(zhì)代謝的不同作用有關(guān)［14，15］。

本實(shí)驗(yàn)連續(xù)2周給予小鼠高脂飲食，實(shí)驗(yàn)?zāi)┐菩詫?duì)照組血脂四項(xiàng)與雄性對(duì)照組之間無(wú)顯著性差異，可見雌雄小鼠正常飲食時(shí)血脂指標(biāo)接近，雌雄高脂組小鼠血清TC、LDL含量均明顯高于自身對(duì)照組，證實(shí)用高脂飼料喂養(yǎng)2周無(wú)論選用成年雄性小鼠或是雌性小鼠均可成功誘發(fā)高脂血癥，兩組間TC及LDL升高程度一致雌雄小鼠血中TG含量無(wú)明顯變化及HDL-C含量升高可能和高脂飼料喂養(yǎng)時(shí)間有關(guān)，如果延長(zhǎng)造模周期，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的血脂紊亂可能更為明顯。

綜上，建立高脂飼料誘導(dǎo)形成的高脂血癥模型時(shí)，喂養(yǎng)2周后的雌雄小鼠血脂變化基本一致，性別差異沒(méi)有影響到高脂血癥模型的效果。

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