重度子癇前期患者胎盤組織中微血管密度與血管內皮生長因子的相關研究

胡群英 崔艷雙

妊娠期高血壓疾病是妊娠期特有的疾病，我國發病率9.4%，國外報道為7%～12%[1]，是孕產婦和圍生兒病率及死亡率的主要原因。近年來實驗表明妊娠期高血壓疾病主要病理表現為滋養細胞侵入子宮內膜過淺；同時子宮螺旋小動脈重塑數量明顯減少，發生生理性重塑障礙[2]，導致胎盤組織缺血、缺氧。本實驗通過檢測正常產婦和重度子癇前期患者胎盤組織中VEGF蛋白的表達并記數微血管密度，以探討妊娠高血壓疾病患者胎盤組織血管病變的機制，為進一步認識妊娠期高血壓疾病的病因以及對其預防和診治開辟新途徑。

1 材料與方法

1.1 研究對象 選取2007年1月～2008年1月在深圳市南山醫院剖宮產分娩者40例，其中重度子癇前期20例，平均年齡(27±3.28)歲，平均孕周(37±1.84)周，分類和診斷標準[1]參照全國統編教材《婦產科學》第7版，相應妊娠周數的正常妊娠孕婦20例與其對照，平均年齡(26±2.06)歲，平均孕周(38±2.03)周，兩組孕婦的年齡、孕周、產次差異無統計學意義。兩組孕婦均排除其他妊娠合并癥及并發癥。兩組病例均經剖宮產結束分娩，術前均未進入產程。

1.2 方法

1.2.1 標本采集 胎盤娩出后，立即切去全層胎盤組織大小約1.0cm3，無菌生理鹽水沖洗后置入中性甲醛中固定，石蠟包埋。

1.2.2 實驗方法 采用SABC法測定胎盤組織中VEGF蛋白的表達，CD34多克隆抗體標記微血管并計數MVD。

1.2.3 結果判定 判斷標準參照Birner[2]法，根據陽性細胞顯色的比例及染色強度，做半定量判定。按陽性細胞率評分:陽性細胞數占11%～50%為2分；陽性率51%～80%為3分；＞80%為4分，按顯色程度評分:染色弱為1分；中等染色為2分；強染色為3分。然后將兩種評分結合起來分為4級:無論染色強度如何，細胞陽性率＜10%為陰性；評2～3分的為弱陽性(+)；4～5分為中度陽性(++)；6～7分為強陽性(+++)。微血管密度定量方法:以CD34標記血管內皮細胞，參照Weidner[3]報道的方法:先在40倍光鏡下掃描整個切片，選擇5個血管密度最高的血管區，然后在400倍視野下計數5個不重復視野中被CD34染成棕黃色的血管數目，取其平均值作為微血管密度(MVD)。

2 結果

2.1 VEGF在兩組胎盤組織中的表達強度的比較 見表1。

2.2 兩組孕婦胎盤組織中MVD的比較 見表2。

2.3 重度子癇前期患者胎盤組織中VEGF、MVD的相互關系經spearman’s檢驗rs=0.896(P＜0.05)，VEGF與MVD呈正性相關。

表1 胎盤組織中VEGF的表達(例)

表2 胎盤組織中MVD值

3 討論

VEGF是作用于血管內皮細胞的多功能細胞因子，具有促進微靜脈、小靜脈通透性增加、血管內皮細胞分裂、增殖、細胞質鈣聚集以及誘導血管生成等作用。在血管生成過程中，往往有多種血管生成因子的協同作用，但只有VEGF是特異性地直接作用于血管內皮細胞，是生理性血管生成的主要調節劑[4-5]。VEGF可在很多正常成人和動物組織中表達，在成年機體生理狀態下，VEGF僅起維持原有血管密度及維持血管對運輸營養物質所需通透性的作用。在腫瘤、心肌缺血、視網膜病變、傷口愈合和風濕性關節炎等病理情況下，VEGF表達異常增高。檢測VEGF表達水平有助于了解病情發展。

本實驗采用免疫組化法檢測了重度子癇前期患者胎盤組織中VEGF蛋白的表達情況，結果顯示，VEGF在重度子癇前期患者胎盤組織中表達下降，這與Lyall等[6]研究結果是一致的，說明VEGF表達減少可能引起滋養細胞對母體蛻膜侵入過淺，影響了子宮血管的重鑄，造成胎盤灌注不足，產生全身小血管痙攣等一系列病理生理變化。因此我們推測，胎盤組織VEGF合成和釋放減少，影響滋養細胞的分化、浸潤及血管的形成，可能是子癇前期、子癇發病機制中的相關因素之一。本研究中所測定的子癇前期、子癇患者胎盤組織中VEGF有異常表達，并與MVD有相關性，充分說明VEGF的促血管生成的作用，VEGF的減少影響胎盤血管的生成，造成胎盤血流減少，進一步損傷血管內皮細胞的功能，這可能是導致妊娠早期胎盤淺著床及胎盤血管重鑄障的重要環節之一，但VEGF在子癇前期、子癇發病過程中的血管病變機制仍有待于進一步深入研究。

[1]樂杰.婦產科學[M].第7版.北京:人民衛生出版社,2007:97-98.

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