血細胞計數低值參數的標本處理比較

李云 郭書俠

很多血球計數儀在計數到參數值很低時，參數值低于血球計數儀檢測范圍，往往顯示的數值重復性差，結果不可靠，甚至儀器不顯示數值。這樣檢驗醫師對發出的報告沒有把握，給臨床醫生對患者的病情診斷和治療帶來一定的難度。這種血球計數儀以三分類多見，偶爾有的五分類也出現。我們在檢測到參數值較低的標本時，就利用參數值正常的標本與它按比例混合進行檢測，并且在Ac．T5diff AL、XS-800i和 mircos-60這3臺血球計數儀進行比較，結果令人滿意，報告如下。

1 資料與方法

1．1 一般資料 標本均為河北省遷安市人民醫院2008年1月至2010年4月住院患者，共320例，其中肝硬化大出血38例，外傷失血21例，缺鐵性貧血96例，再生障礙性貧血34例，巨幼細胞性貧血55例，特發性血小板減少性紫癜18例，單純血小板減少33例，粒細胞減少25例。將其分4組:A組為72例低值白細胞，B組為251例低值紅細胞，C組251例低值血紅蛋白，D組為108例低值血小板。

1．2 材料

1．2．1 抗A、抗B血型定型試劑(長春博德生物技術有限責任公司)，RhD(IgM)血型定型試劑(上海血液生物醫藥有限責任公司)，篩檢細胞和不完全抗體檢測卡(長春博訊生物技術有限責任公司)，凝聚胺(臺灣貝索公司)。

1．2．2 BECKMAN COULTER 公司的 Ac．T5diff AL 、Sysmex 公司的XS-800i和ABX公司的mircos-60三臺血球計數儀及原裝配套試劑、質控品。

1．3 方法 采取參數值很低的患者靜脈血2．0 ml兩管(EDTA．2Na抗凝)。將其中一管低值參數的標本先做血型(ABO和Rh)鑒定和不規則抗體篩查。把不規則抗體陰性的低值參數標本與血型相同和不規則抗體陰性的參數值正常的標本進行交叉配血，交叉配血相合后，再將另一管低值參數標本按3∶2和2∶3比例與參數值正常的標本(與低值參數標本交叉配血相合的標本)混合，分別在Ac．T5diff AL(五分類)、XS-800i(五分類)和ABX mircos-60(三分類)3臺血球計數儀進行檢測。實測值為儀器直接檢測的參數值，計算值為低值參數的標本實測值和參數值正常的標本實測值按上述比例混合的計算得到的參數值。3∶2比例混合公式為:計算值=(低值參數標本實測值×3+正常參數值標本實測值×2)/5;2∶3比例混合公式為:計算值=(低值參數標本實測值×2+正常參數值標本實測值×3)/5。

1．4 統計學分析計量資料以ˉx±s表示，采用t檢驗，P＜0．05為差異有統計學意義。

2 結果

白細胞、紅細胞、血紅蛋白、血小板等參數混合后的標本檢測值(實測值)與通過理論計算值比較差異無統計學意義(P＞0．05)，這3臺血球計數儀對于混合后的標本檢測同樣可以使用。見表1～4。

表1 72例低值白細胞按比例混合檢測比較±s

表1 72例低值白細胞按比例混合檢測比較±s

類別 低值標本實測值(×109)正常標本實測值(×109)3∶2實測值(×109)計算值(×109)2∶3實測值(×109)計算值(×109)Ac．T5diff AL 1．5 ±0．6 6．6 ±0．6 3．53 ±0．21 3．55 ±0．24 4．54 ±0．23 4．57 ±0．25 XS-800i 1．5 ±0．6 6．6 ±0．6 3．51 ±0．19 3．54 ±0．22 4．52 ±0．26 4．55 ±0．22 mircos-60 1．6 ±0．6 6．5 ±0．6 3．55 ±0．24 3．59 ±0．74 4．50 ±0．27 4．52 ±0．25

表2 251例低值紅細胞按比例混合檢測比較±s

表2 251例低值紅細胞按比例混合檢測比較±s

類別 低值標本實測值(×1012)正常標本實測值(×1012)3∶2實測值(×1012)計算值(×1012)2∶3實測值(×1012)計算值(×1012)Ac．T5diff AL 1．58 ±0．55 4．41 ±0．22 2．77 ±0．40 2．80 ±0．44 3．32 ±0．23 3．27 ±0．25 XS-800i 1．61 ±0．59 4．42 ±0．24 2．81 ±0．48 2．78 ±0．35 3．30 ±0．25 3．29 ±0．26 mircos-60 1．63 ±0．61 4．50 ±0．25 2．86 ±0．51 2．83 ±0．74 3．33 ±0．27 3．31 ±0．25

表3 251例低值血紅蛋白按比例混合檢測比較±s

表3 251例低值血紅蛋白按比例混合檢測比較±s

類別 低值標本實測值(g/L)正常標本實測值(g/L)3∶2實測值(g/L) 計算值(g/L)2∶3實測值(g/L) 計算值(g/L)Ac．T5diff AL 27±5 132±4 69±3 69±3 90±4 90±3 XS-800i 27±5 133±5 69±3 69±4 90±4 90±3 mircos-60 28±6 133±5 70±4 70±4 90±4 91±4

表4 98例低值血小板按比例混合檢測比較±s

表4 98例低值血小板按比例混合檢測比較±s

類別 低值標本實測值(×1012)正常標本實測值(×1012)3∶2實測值(×1012)計算值(×1012)2∶3實測值(×1012)計算值(×1012)Ac．T5diff AL 24±5 199±33 93±13 95±14 130±19 131±16 XS-800i 24±5 201±35 95±13 97±14 130±21 133±18 mircos-60 25±6 200±36 94±14 97±15 132±22 134±19

3 討論

在日常檢驗工作中，我們經常對高值標本進行稀釋重做，對低值標本往往缺乏處理方法，尤其是血球計數，出現低值參數無法下手，我們經過認真思考和探索。兩份抗凝全血混和后對血紅蛋白的檢測影響較小，因為它是利用的比色法，只需溶血完全就可以。而對于有形成分白細胞、紅細胞和血小板來說，它們會出現凝集和溶血反應，影響血球計數，這時首先考慮到交叉配血，只要主次側不發生凝集和溶血反應，就可以將兩份血液混合。這里除注意ABO血型和Rh血型還應進行不規則抗體的篩查。

在全血標本中白細胞、紅細胞、血紅蛋白和血小板等參數值較低時，通過按比例混合檢測得到的參數值與計算得到的參數值差異無統計學意義(P＞0．05)。這三臺血球計數儀對這種方法都適用。有時全血標本白細胞、紅細胞、血紅蛋白和血小板等參數值特別低，ABX mircos-60血球計數儀常常就不顯示檢測參數值，XS-800i偶爾也會出現不顯示檢測參數值。我們想通過按比例混合檢測，通過計算得到低值標本的白細胞、紅細胞、血紅蛋白和血小板等參數值。這給不顯示檢測數據，無法發報告的難題帶來解決思路。我們通過對320例標本的檢測比較，發現此法可行，且本法簡單、易懂，很適合基層醫院推廣。