紫槐燒傷乳膏劑的制備及質(zhì)量控制

熊維政，李 磊，石 磊，姜家書，左 杰

（河南羚銳制藥股份有限公司，河南 新縣 465550）

紫槐燒傷乳膏劑由紫草、虎杖、槐枝等組方，系民間老中醫(yī)驗(yàn)方，具有清熱涼血、收斂生肌、止痛功效，多年臨床使用證明其對(duì)Ⅰ度和Ⅱ度燒燙傷具有良好效果。原處方以豚脂榨取藥材、提取有效成分后制成油膏使用，制劑水平較低且使用不方便，制劑的質(zhì)量控制比較困難。為更好地滿足臨床需要，筆者研制了紫槐燒傷乳膏劑，現(xiàn)將其制備工藝與質(zhì)量控制方法報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

島津LC－2010AHT高效液相色譜（HPLC）儀，SPD－20A紫外檢測(cè)器（日本島津公司）；79－1型磁力加熱攪拌器（金壇市醫(yī)療儀器廠）。紫草對(duì)照藥材（批號(hào)為200802）、左旋紫草素對(duì)照品（批號(hào)為110769－200405）、冰片對(duì)照品（批號(hào)為110743－200504）、大黃素對(duì)照品（批號(hào)為110756－200110）均由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供；紫槐燒傷乳膏劑（河南羚銳制藥股份有限公司，批號(hào)為090913）；紫草、虎杖、（張仲景大藥房）；冰片（云南省思茅市林緣香料有限公司）；槐枝采自新縣；自制純化水；所用試劑均為分析純；輔料均符合藥用標(biāo)準(zhǔn)。

2 方法與結(jié)果

2.1 處方與制備

處方：紫草，虎杖，槐枝，冰片，硬脂酸，單硬脂酸甘油酯，液體石蠟，甘油，三乙醇胺，平平加O、羥苯乙酯，純化水。

制備[1]：取虎杖、黃柏，粉碎成細(xì)粉，混勻，照2005年版《中國(guó)藥典（一部）》附錄ⅠO（流浸膏劑與浸膏劑）項(xiàng)下方法，以90％乙醇為溶劑，浸漬36h后緩緩滲漉，收集滲漉液600mL，濾過，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.00的清膏，備用；取硬脂酸、單硬脂酸甘油醋、液狀石蠟加熱至80℃，溶解，攪勻，待溫度降至50℃左右時(shí)加入上述醇提浸膏，攪拌均勻，作為油相，備用；另取甘油、三乙醇胺、平平加O、羥苯乙酯加熱至80℃，充分熔化，攪勻后緩緩加入油相，沿一個(gè)方向攪勻（約100 r/min），待冷至40℃，加入冰片（乙醇適量溶解），用水調(diào)節(jié)至1 000 g，攪勻，分裝即得。規(guī)格為每支15 g。

2.2 一般質(zhì)量控制

性狀：本品為均勻細(xì)膩的紫紅色乳膏。

pH：取本品10 g，80℃加熱熔化，加純化水50mL稀釋，溶液pH應(yīng)為6.0～7.0。

其他：應(yīng)符合2005年版《中國(guó)藥典（一部）》軟膏劑[1]項(xiàng)下有關(guān)規(guī)定。

2.3 鑒別

紫草[2]：稱取供試品3.0 g、紫草對(duì)照藥材粉末2.0 g、不含紫草的陰性對(duì)照品3.0 g，分別加氯仿30 mL，超聲處理30 min后置分液漏斗中，將分液漏斗在10℃以下靜置2h，分取氯仿液，作為供試品溶液、紫草對(duì)照藥材溶液及陰性對(duì)照品溶液。取左旋紫草素對(duì)照品，加乙醇制成每1mL含1.0mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法[1]試驗(yàn)，吸取上述4種溶液各10μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，先以飽和15min的二氯甲烷－甲苯（5∶11）為展開劑上行展開，展距約為8.5 cm，取出，晾干，然后再以飽和15min的甲苯－乙酸乙酯－甲酸（5∶1∶0.1）為展開劑上行展開，展距約為3.5 cm，取出，晾干。供試品溶液色譜中，在與對(duì)照藥材溶液和對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)位置上顯相同的紅褐色斑點(diǎn)，再噴以10％氫氧化鉀甲醇溶液，斑點(diǎn)顏色變?yōu)樗{(lán)色，陰性對(duì)照品溶液色譜中則無此斑點(diǎn)（圖1 A）。

虎杖[3]：在2.4含量測(cè)定項(xiàng)高效液相下色譜圖中，供試品溶液主峰的保留時(shí)間應(yīng)與對(duì)照品溶液主峰的保留時(shí)間一致。

槐枝[4]：取供試品5.0 g、不含槐枝的陰性對(duì)照品5.0 g，分別加甲醇20mL，超聲處理10min，濾過，濾液揮干，殘?jiān)蛹状?mL使溶解，作為供試品溶液、陰性對(duì)照品溶液。取蘆丁對(duì)照品用甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法[1]試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各10μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以飽和15min乙酸乙酯－甲酸－水（8∶1∶1）為展開劑上行展開，展距約為10 cm，取出，晾干，噴以三氯化鋁乙醇溶液，于105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品溶液色譜中，在與對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)位置上顯相同的淺綠色斑點(diǎn)，陰性對(duì)照品溶液色譜中則無此斑點(diǎn)（圖1 B）。

圖1 薄層色譜圖

冰片[3，5]：取本品2 g，加乙醇5mL攪拌溶解，加1％香草醛硫酸液2滴，即顯紫色。

2.4 含量測(cè)定（虎杖）[3，6－7]

2.4.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

色譜柱：Agilent－C18柱（250mm×4.6mm，5μm）；流動(dòng)相：甲醇－0.1％磷酸溶液（80∶20）；檢測(cè)波長(zhǎng)：254 nm；柱溫：40℃；流速：1mL/min；進(jìn)樣量10μL。在該色譜條件下，對(duì)照品溶液及供試品溶液色譜峰分離良好，出峰時(shí)間合適（7.5min），陰性對(duì)照品溶液對(duì)測(cè)定無干擾（圖2）。

圖2 高效液相色譜圖

2.4.2 溶液制備

稱取供試品約3.0 g，精密稱定，加入甲醇30mL及2.5mol/L硫酸溶液20 mL，加熱回流60 min，用氯仿提取3次，每次10 mL，收集氯仿液，蒸干，殘?jiān)眉状既芙猓D(zhuǎn)移至25mL量瓶中，甲醇定容至刻度，即得供試品溶液。另按處方制備不含虎杖的乳膏劑對(duì)照品，同法制備陰性對(duì)照品溶液。精密稱取大黃素對(duì)照品6.4mg，置50 mL量瓶中，用甲醇充分溶解，定容至刻度，得貯備液備用，然后精密吸取貯備液1mL，置10mL量瓶中，用甲醇定容至刻度，得每1mL含大黃素12.8μg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

2.4.3 方法學(xué)考察

線性關(guān)系考察：精密吸取對(duì)照品溶液2，4，6，8，10，12μL，注入色譜儀，以峰面積（A）對(duì)溶液質(zhì)量濃度（C）進(jìn)行線性回歸，得回歸方程 A=13 175X+129 604，R2=0.999 9（n=6）。結(jié)果表明，大黃素進(jìn)樣量在0.025 6～0.153 6μg范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

精密度試驗(yàn)：精密吸取質(zhì)量濃度為12.8μg/mL的大黃素對(duì)照品溶液10μL，注入液相色譜儀，重復(fù)進(jìn)樣5次。結(jié)果大黃素峰面積的 RSD為0.65％（n=5）。

穩(wěn)定性試驗(yàn)：精密吸取供試品溶液10μL，分別于0，2，4，6，8，12，24h時(shí)進(jìn)樣測(cè)定。結(jié)果大黃素含量的 RSD為0.22％（n=7），表明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。

表1 大黃素加樣回收試驗(yàn)結(jié)果（n=6）

加樣回收試驗(yàn)：精密量取已知大黃素含量的樣品6份（0.203 1 mg/g），加入一定量的大黃素對(duì)照品（按80％，100％，120％加入對(duì)照品，各加平行兩份），按樣品含量測(cè)定方法測(cè)定。結(jié)果見表1。

2.4.4 樣品含量測(cè)定

取不同批號(hào)的樣品3批，按供試品溶液制備方法制備溶液。分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10μL，按上述色譜條件平行測(cè)定5次，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算供試品中大黃素含量。結(jié)果批號(hào)為090913，090917，090919的樣品中大黃素含量分別為0.201 2，0.211 7，0.193 4mg/g。因此，暫訂每1 g本品含虎杖以大黃素計(jì)不得少于0.19mg/g。

2.5 穩(wěn)定性考察

留樣觀察法：取本品3批，裝入鋁箔管內(nèi)，密閉、避光、在恒溫[（25±2）℃]、相對(duì)濕度（60±10）％的條件下儲(chǔ)存6個(gè)月。結(jié)果樣品外觀、均勻度、稠度均無明顯變化；每月測(cè)定的大黃素含量均符合規(guī)定，說明6個(gè)月內(nèi)含量穩(wěn)定。

離心法：取樣品3批，各10 g，分別置離心管中，以3 000 r/min的轉(zhuǎn)速離心處理。結(jié)果樣品無分層現(xiàn)象。

3 討論

本乳膏劑是在原油膏劑的基礎(chǔ)上，通過科學(xué)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，采用乙醇滲漉法提得藥物浸膏后，選擇適宜的賦形劑制成的乳膏劑，與原來的油膏劑相比，藥物有效成分的提取更完全，充分保證了臨床療效，制劑的外觀性狀也得到了改善，且使用方便，易于清洗，滿足了臨床患者的需要。

該制劑制備工藝簡(jiǎn)單，含量測(cè)定準(zhǔn)確，制劑質(zhì)量穩(wěn)定，使用安全、方便，較油膏劑具有明顯的優(yōu)勢(shì)。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（一部）[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：附錄IO，附錄IR，附錄VIB，附錄VID.

[2]張?jiān)銮桑?霖，吳延暉，等.復(fù)方紫歸軟膏的制備及質(zhì)量控制[J].中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，2000，20（1）：47.

[3]洪求兵，梁曉霞，張孟佑，等.復(fù)方虎杖凝膠劑的制備及質(zhì)量控制[J].中國(guó)藥業(yè)，2008，17（15）：54－55.

[4]王春桃，唐于平，周 玲.槐枝皮中黃酮類成分的研究[J].江蘇中醫(yī)藥，2008，40（7）：65－66.

[5]鐘春元，黃英柱，方奕曦.復(fù)方大黃燒傷藥膜的制備與應(yīng)用[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2002，21（4）：241.

[6]付艷敏，李伯軍，白 巖.等.HPLC法測(cè)定肺結(jié)核丸中大黃素的含量[J].中國(guó)藥師，2006，9（1）：20－21.

[7]陳世虎，陳瑞龍，呼延玲.HPLC測(cè)定皮膚病血毒丸中大黃素與大黃酚含量[J].中國(guó)藥師，2006，9（1）：47－48.