改進的18O同位素標記法標記蛋白質多肽
2010-04-12 00:00:00趙焱盧莊賈偉應萬濤錢小紅
分析化學 2010年1期
摘 要 針對18Ｏ同位素標記反應兩個重要影響因素——肽段分散度和胰酶滅活方法，進行了標記條件的改進和滅活方法的優化。在H218Ｏ中加入RapigestTM SF助溶劑并微波輔助加熱，使α-酪蛋白胰酶酶切肽段的標記效率得到明顯改進（18Ｏ/16Ｏ 峰面積比值>99%）。標記后，對胰酶進行還原烷基化化學修飾徹底滅活，使標記后的肽段穩定性顯著提高，放置6 d不發生回交反應。對標準蛋白質甲狀腺球蛋白酶切肽段混合物標記后的質譜實驗結果表明：優化的標記方法能快速穩定地標記蛋白質酶切多肽。
關鍵詞 18Ｏ同位素標記；多肽；蛋白質組
