納米探針芯片技術(shù)用于微量乙肝病毒DNA的檢測

摘 要 利用兩組探針修飾的微粒：（1）表面標(biāo)記有可與待測乙肝病毒（BV） DNA另一端結(jié)合的納米金探針1（信號探針）以及可與信號探針部分結(jié)合的納米金探針2（檢測探針）；（2）表面標(biāo)記有可與待測BV DNA一端結(jié)合的磁珠探針（捕捉探針1）。檢測靶BV DNA時，磁珠探針與信號探針在液相中可分別與BV DNA靶序列一端結(jié)合最終形成三明治樣結(jié)構(gòu)。再以磁場將三明治樣復(fù)合物從反應(yīng)液中分離，以D溶液將信號探針從納米金顆粒上洗脫。洗脫后的信號探針數(shù)量反映靶基因的多寡，信號探針一段與預(yù)先點(diǎn)樣的基因芯片上的捕捉探針2結(jié)合，檢測探針與信號探針另一段相結(jié)合，最后用銀染液將檢測探針顯色從而得到靶目標(biāo)DNA相對定量信息。結(jié)果表明，本檢測方法的檢測靈敏度達(dá)到10－1 mol/L水平。檢測時間少于1. h，檢測結(jié)果與BV DNA水平呈現(xiàn)較好的線性關(guān)系且無假陽性結(jié)果；本方法有望用于乙肝病人血清中BV DNA的快速篩測及其它微生物基因的檢測。