慢性肝炎肝竇毛細(xì)血管化的臨床病理研究

邵穎 宋光平

(黑龍江省大慶市第二醫(yī)院肝一科,*病理科,黑龍江大慶 163461)

在病理狀態(tài)下,肝竇內(nèi)皮細(xì)胞的窗孔閉塞、減少或消失,內(nèi)皮下形成基底膜,形似連續(xù)毛細(xì)血管,稱為肝竇毛細(xì)血管化。肝竇毛細(xì)血管化是肝纖維化過程中一個(gè)重要的病理改變[1]。研究肝竇毛細(xì)血管化的形成機(jī)理以及和肝纖維化、肝硬化發(fā)生的關(guān)系已經(jīng)成為肝病研究領(lǐng)域的一個(gè)熱點(diǎn)。目前國內(nèi)關(guān)于肝竇毛細(xì)血管化的研究多集中在動物實(shí)驗(yàn)方面,本研究觀察慢性肝炎患者的肝竇毛細(xì)血管化與慢性肝炎患者的肝臟組織學(xué)、血清學(xué)指標(biāo)及肝纖維化指標(biāo)的相關(guān)性,探索肝竇毛細(xì)血管化在疾病診療中的意義。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選擇2006年7月—2009年9月來我院就診的慢性肝炎患者68例,年齡27～53歲,平均39.7歲,其中男性51例,女性17例,無并發(fā)癥及其他器官系統(tǒng)疾病。行肝穿刺活組織病理檢查,其肝活檢標(biāo)本長度超過1.5 cm,至少含有4個(gè)完整的匯管區(qū);并于當(dāng)日晨采血檢測肝功能、透明質(zhì)酸(HA)、層粘連蛋白(LN)、Ⅳ型膠原(CⅣ)、Ⅲ型前膠原(PCⅢ)。病理診斷為慢性乙型肝炎36例、慢性丙型肝炎3例、慢性藥物性肝炎4例、自身免疫性肝炎3例、原發(fā)性膽汁性肝硬化(Ⅰ～Ⅲ期)6例、乙醇性肝炎9例、血吸蟲病2例、膽汁性肝纖維化5例。以6例正常肝組織(尸檢標(biāo)本)作為陰性對照。

1.2 血清學(xué)檢測方法 日本日立公司7170S型全自動生化分析儀檢測患者血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總膽紅素(TBIL)、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)。應(yīng)用放射免疫分析方法檢測血清HA、LN 、PCⅢ,應(yīng)用 ELISA 法檢測CⅣ,試劑盒購自上海海研醫(yī)學(xué)生物技術(shù)有限公司。

1.3 肝活檢標(biāo)本處理 行一秒鐘快速肝穿刺活檢,活檢槍為美國產(chǎn)Bard型,活檢針亦為Bard型,規(guī)格16～18G,所獲標(biāo)本用10%中性甲醛溶液固定,常規(guī)石蠟包埋,作3μm厚度連續(xù)切片,行HE(蘇木素-伊紅)染色、網(wǎng)織染色及Masson染色,以免疫組化法行CD34染色。鼠抗人單克隆CD34抗體、即用型快捷免疫組化MaxVision試劑盒及陽性對照片等均購自福州邁新生物技術(shù)有限公司,嚴(yán)格按說明書操作。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用Spearman Correlation進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,P＜0.05(雙側(cè))為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 肝竇毛細(xì)血管化程度與肝功能指標(biāo)的關(guān)系 肝竇毛細(xì)血管化程度與血清肝功能指標(biāo)中GGT明顯相關(guān),與ALT、AST、TBIL等無明顯相關(guān),見表1。

2.2 肝竇毛細(xì)血管化程度與血清肝纖維化指標(biāo)的關(guān)系 肝竇毛細(xì)血管化程度與血清肝纖維化指標(biāo)中的HA顯著相關(guān),與 LN、CⅣ、PCⅢ等無明顯相關(guān)性,見表2。

2.3 肝竇毛細(xì)血管化程度與肝病變分級、分期的關(guān)系 肝竇毛細(xì)血管化程度與肝組織炎癥分級、纖維化分期呈正相關(guān),與分期相關(guān)性更強(qiáng),見表3。

表1 肝竇毛細(xì)血管化程度與肝功能指標(biāo)的關(guān)系

表2 肝竇毛細(xì)血管化程度與血清肝纖維化指標(biāo)的關(guān)系

表3 肝竇毛細(xì)血管化程度與肝組織分級、分期的關(guān)系(例)

3 討 論

肝竇是肝臟微循環(huán)的重要組成部分。肝竇毛細(xì)血管化可增強(qiáng)某些損傷介質(zhì)(如自由基)的肝損傷作用,使肝細(xì)胞功能減退甚至衰竭,加快肝纖維化的進(jìn)程,并可促使門脈壓力升高,直接影響肝臟功能。本研究顯示,肝竇毛細(xì)血管化程度與血清肝功能指標(biāo)中的GGT具有相關(guān)性,而臨床常用的ALT、AST、TBIL等指標(biāo)對肝纖維化的早期階段-肝竇毛細(xì)血管化很不敏感。正常人血清中的GGT主要來自肝臟,并由輸膽管道排出,如果肝臟發(fā)生病變,肝細(xì)胞合成、釋放GGT增強(qiáng),導(dǎo)致血清中GGT增高。本組有7例(占10.3%)其他肝功能檢測指標(biāo)均正常,唯GGT升高。單獨(dú)GGT異常預(yù)示存在著“悄悄”進(jìn)展的肝損傷,GGT與肝竇毛細(xì)血管化的相關(guān)性則提示肝臟長期存在的輕度炎癥刺激是肝纖維化的元兇。肝竇毛細(xì)血管化是肝纖維化的初始階段,當(dāng)反映肝臟功能變化的轉(zhuǎn)氨酶等主要血清學(xué)指標(biāo)正常時(shí),如何判斷與治療“悄悄進(jìn)展的肝損傷”值得不斷探索。

血管形成是任何器官發(fā)生發(fā)育、創(chuàng)傷愈合、功能恢復(fù)的先決條件[2],但是肝臟這樣一個(gè)承擔(dān)著眾多極其復(fù)雜功能的器官,對于各種損傷因素的修復(fù)反應(yīng)是有限的。損傷早期肝星型細(xì)胞(HSC)被激活,之后在HSC的自分泌作用促使其進(jìn)入持續(xù)激活狀態(tài),不斷分裂增殖并合成與分泌細(xì)胞外基質(zhì),導(dǎo)致肝竇毛細(xì)血管化,毛細(xì)血管閉鎖而發(fā)生纖維化[3]。本研究顯示,肝竇毛細(xì)血管化程度與肝組織纖維化分期顯著相關(guān),并與血清肝纖維化指標(biāo)中的HA顯著相關(guān),提示HA是判斷肝竇毛細(xì)血管化與肝纖維化的一個(gè)靈敏的指標(biāo)。

本研究顯示肝竇毛細(xì)血管化改變與肝組織炎癥分級明顯相關(guān),提示肝竇毛細(xì)血管化可能在某種意義上加劇了肝組織炎癥的進(jìn)展。然而,肝竇內(nèi)皮細(xì)胞不僅僅只在損害因素作用下發(fā)生病理學(xué)改變,而且也“主動”參與了肝竇毛細(xì)血管化的進(jìn)一步發(fā)展。在慢性肝炎時(shí)肝組織復(fù)雜的微觀環(huán)境中,兩者之間的相互影響尚需進(jìn)一步研究。

1 陸雄,劉平.肝纖維化過程中一個(gè)重要的病理改變-肝竇毛細(xì)血管化[J].中華肝臟病雜志,2001,9:53-54.

2 Matsumoto S,Yamamoto K,Nagano T,et al.Immunon is tochemical study on phenotypical changes of hepatocy tes in liver diseases with reference to ex tracellular matrix composition[J].Liver,1999,19(1):32-38.

3 張愛龍,楊鎮(zhèn),尚亮,等.結(jié)締組織生長因子在血吸蟲病肝纖維化肝竇毛細(xì)血管化形成中的作用[J].中華實(shí)驗(yàn)外科雜志,2007,24(3):282-284.