川芎嗪對PIH患者外周血Th1/Th2細胞因子和血液流變學的影響

王梅琴

（浙江省臺州市路橋區中醫院婦產科，浙江 臺州 318050）

妊娠高血壓綜合征（PIH）是一種妊娠晚期發生并嚴重威脅母嬰安全的疾病，其發病機理尚未完全闡明，臨床經典治療為硫酸鎂解痙治療，但療效不太理想。川芎嗪是從傘形科藁本屬植物川芎的根莖中提取的生物堿單體四甲基吡嗪，近年來有報道稱其可用于臨床PIH的治療[1]。筆者通過觀察川芎嗪治療前后PIH患者外周血白細胞介素 -4（IL-4）、γ -干擾素（IFN-γ）含量和血液流變學指標的改變，探討川芎嗪對PIH患者外周血Th1/Th2細胞因子的調節作用及治療PIH的作用機制，為PIH的防治及中藥的進一步開發應用提供臨床依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2007年1月至2008年12月在我院婦產科門診就診或住院治療的輕中度PIH患者40例作為治療組，另取正常妊娠婦女40例作為對照組。PIH的分類標準以全國統編教材第5版《婦產科學》為準。治療組孕婦平均年齡（28.3±4.3）歲，平均孕周（35.1±1.6）周；對照組平均年齡（27.7 ±4.8）歲，平均孕周（35.8 ±2.0）周。所有入選者均系單胎妊娠，既往無高血壓、心臟病、腎病、糖尿病等內外科合并癥，孕期無特殊用藥史，兩組孕婦平均年齡及孕周無顯著性差異（P＞0.05），具有可比性。

1.2 治療與觀察方法

治療組以廣東利民制藥廠生產的川芎嗪注射液120 mg加入5%葡萄糖注射液250 mL中靜脈滴注，1次/d，用藥10 d為1個療程。治療組治療前和治療1個療程后采血進行檢測指標的測定，對照組只測定1次檢測指標。

1.3 檢測方法

IL-4和IFN-γ檢測：取靜脈血5 mL，注入肝素抗凝無菌瓶中，再用淋巴細胞分離液從肝素抗凝血中分離單個核細胞（PBMC），調整細胞濃度至 1×109個 /mL，加入植物血凝素（PHA）100 g/L，置37℃的5%CO2培養箱中培養72 h，收集上清液。采用雙抗體夾心ELISA法檢測PBMC培養上清液中IL-4和IFN-γ含量，試劑盒購于法國Daclone公司，嚴格按試劑盒說明書進行操作，由臺州醫院檢驗科協助完成測定。

血液流變學指標檢測：取靜脈血5 mL，注入肝素抗凝無菌瓶中，采用自動清洗旋轉式黏度分析計測定全血高切黏度（200 s-1）、全血低切黏度（50 s-1）、血漿黏度、紅細胞聚集指數和紅細胞壓積。嚴格按儀器常規操作方法進行操作。

1.4 統計學方法

2 結果

與對照組比較，治療組患者治療前外周血培養上清PBMC中IL-4水平明顯降低，IFN-γ水平明顯升高，全血高切黏度、全血低切黏度、紅細胞聚集指數、紅細胞壓積和血漿黏度也明顯增加。經1個療程的川芎嗪治療后，治療組患者IL-4水平明顯上升，IFN-γ水平明顯下降，上述血液流變學指標也明顯降低，詳見表1、表2。

表1 兩組孕婦外周血培養上清PBMC中IL-4和IFN-γ水平 ± s，ng/L）

表1 兩組孕婦外周血培養上清PBMC中IL-4和IFN-γ水平 ± s，ng/L）

注：與對照組比較，*P ＜0.05；與治療前比較，△P ＜0.05（下表同）。

組別對照組（n=40）治療組 治療前（n=40）治療后（n=40）IL-4 49.82±9.25 34.47±7.62*45.58±8.13△IFN-γ 320.36±42.82 439.57±35.68*378.75±43.43△

表2 兩組孕婦血液流變學指標檢測結果±s）

表2 兩組孕婦血液流變學指標檢測結果±s）

組別對照組治療組 治療前治療后全血高切黏度（mPa·s）3.92±0.71 5.14±1.02*4.29±0.85△全血低切黏度（mPa·s）14.14±4.26 21.21±1.24*15.92±4.32△紅細胞聚集指數2.30±0.32 4.02±0.82*2.94±0.60△紅細胞壓積0.37±0.05 0.53±0.09*0.41±0.08△血漿黏度（mPa·s）1.38±0.42 1.89±0.52*1.51±0.43△

3 討論

正常情況下，體內Th1/Th2系統處于平衡狀態，Th1和Th2細胞各自分泌多種細胞因子，形成復雜的細胞因子網絡，對免疫反應進行調節。Th1細胞可產生 IL-2，IL-12，IFN-γ等細胞因子，介導細胞免疫應答；Th2細胞可產生 IL-4，IL-5，IL-6，IL-9，IL-10等細胞因子，介導體液免疫應答。Th1型和Th2型免疫應答之間存在交互的負反饋作用，維持著正常的免疫平衡。一旦此平衡被打破，表現出Th1型或Th2型反應優勢，則可引起異常的免疫應答而出現病理狀態。免疫學上一般以IFN-γ和IL-4分別作為Th1和Th2細胞的特征性細胞因子，通過檢測這兩種細胞因子可以了解Th1和Th2的功能狀態。胚胎對于母體來說是一種半同種異體移植物，妊娠的順利進行有賴于母胎間免疫平衡。近年來認為，T細胞來源的細胞因子對該平衡起核心調控作用，尤其是Th2型因子在免疫耐受的誘導和維持中起關鍵性作用[2]。Bennett等[3]發現，Th1型細胞因子（IL-1，IL-2，IFN-γ）在早孕絨毛組織中沒有表達或表達很弱，可能是由于局部Th2因子IL-10抑制了其產生。Th2細胞因子IL-6、IL-10 mRNA在所檢測絨毛中均有中到高水平表達。Wilczynski等[4]對體外子宮蛻膜淋巴細胞的培養發現，PIH患者蛻膜淋巴細胞分泌Th2型細胞因子IL-6及IL-10明顯低于正常妊娠和有瞬時高血壓的孕婦，而INF-γ分泌明顯高于正常妊娠者，表明PIH患者存在著子宮蛻膜淋巴細胞Th1/Th2分泌的細胞因子平衡功能紊亂。本研究中，與正常妊娠對照組比較，PIH患者外周血培養上清PBMC中IFN-γ水平升高，而IL-4水平下降，表明PIH患者存在Th1型細胞因子表達過度，Th2型細胞因子表達低下，這與文獻[4]的報道一致。由此推測，由于PIH患者體內Th1型免疫反應增強，引起T淋巴細胞殺傷細胞及自然殺傷細胞等對滋養層細胞的攻擊增強，導致胎盤血管病變，胎盤缺血，從而引起PIH的病理改變。本研究中PIH患者的血液流變學指標均明顯升高，表明其血液處于高凝狀態。而血黏度增高，血細胞變形能力減退，可導致全身或局部微循環障礙，直接影響胎盤血流灌注，造成胎盤缺血缺氧，甚至發生酸中毒，后者更加重了子宮-胎盤的缺血、缺氧，形成惡性循環，結果致體內釋放促凝物質，嚴重者可導致彌漫性血管內凝血（DIC）[5]。

中醫認為，PIH屬“血瘀”范疇，臨床上常采用活血化瘀的中藥進行治療。川芎嗪是從川芎根莖中提取、分離的一種生物堿單體，具有擴張血管、增加冠狀動脈和腦血管血流、增加胎盤血流、抑制血小板聚集、降低血小板活性、降低血液黏度、改善微循環及血液流變性等作用[6]。近年來研究發現，川芎嗪對PIH有肯定的治療作用，其作用機制與改善PIH患者血中超氧化歧化酶/脂質過氧化物的失衡及一氧化氮/內皮素的失衡[7]，以及抑制臍靜脈內皮細胞黏附分子的表達和抗脂質過氧化有關[8]。本研究中PIH患者經川芎嗪治療10 d后，患者外周血培養上清PBMC中IL-4水平較治療前上升，而IFN-γ水平下降，提示川芎嗪治療PIH的另一作用機制可能是通過增強Th2介導的細胞免疫，抑制Th1介導的體液免疫，從而糾正Th1/Th2細胞因子比例失衡。同時PIH患者經川芎嗪治療1個療程后，全血高切黏度、全血低切黏度、紅細胞聚集指數、紅細胞壓積和血漿黏度均明顯改善，提示川芎嗪具有明顯改善血液流變學的作用。這也與王雪峰等[9]報道的結果一致。

[1]白麗華，陳 鐸.川芎嗪對妊娠期高血壓疾病內皮細胞損傷與凝血-纖溶系統失衡的療效[J].中國婦幼保健，2008，23（18）:2 572-2 575.

[2]魏 軍，尚 濤，王德智.妊娠高血壓綜合征患者外周血單個核細胞產生Th1、Th2型細胞因子失衡的研究[J].中華圍產醫學雜志，2003，6（4）:195-198.

[3]Bennett WA，Lagoo-Deenadayalan S，Whitworth NS，et al.First-trimester human chorionic villi express both immunoregulatory and inflammatory cytokines:a role for interleukin-10 in regulating the cytokine network of pregnancy[J].Am J Reprod Immunol，1999，41（1）:70-78.

[4]Wilczynski JR，Tchorzewski H，Glowacka E，et al.Cytokine secretion by decidual lymphocytes in transient hypertension of pregnancy and preedampsia[J].Mediators Inflamm，2002，11（2）:105-111.

[5]段光美.妊娠高血壓綜合征患者血液流變學指標的變化及意義[J].山東醫藥，2004，44（24）:49.

[6]廖福龍，游 之，韓 東.川芎嗪及大蒜素對剪應力誘導內皮細胞分泌血管性血友病因子與血小板聚集的影響[J].中華醫學雜志，2001，81（8）:508.

[7]陳敦金，趙 楊，佘若菁，等.中藥丹參治療妊高征時機制探討與臨床效果的初步觀察[J].中國現代醫學雜志，2003，13（18）:114-115.

[8]楊 菁，徐望明，謝青貞.妊娠高血壓綜合征患者胎盤和臍帶血管內皮細胞損傷與腫瘤壞死因子的關系[J].中華婦產科雜志，2000，35（5）:279-281.

[9]王雪峰，趙苗青.川芎嗪及復方丹參注射液輔助治療妊娠高血壓綜合征60例臨床分析[J].第一軍醫大學學報，2003，23（9）:969-971.