半枝蓮多糖對(duì)環(huán)磷酰胺增效減毒作用的實(shí)驗(yàn)研究

宋高臣，王桂云，劉洪鳳，王喜軍

(1.牡丹江醫(yī)學(xué)院，黑龍江 牡丹江 157011;2.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150040)

半枝蓮別名并頭草、狹葉韓信草、牙刷草，為唇形科植物半枝蓮［Scutellaria barbata D.Don］的干燥全草［1］。其全草入藥，性辛、苦、寒，入肺、肝、腎，具有清熱解毒、活血化瘀之功效，還有抗毒蛇咬傷的作用［2］。半枝蓮多糖(Scutellaria barbata polysaccharides，SBPS)是從中藥半枝蓮中提取的有效組分［3，4］，前期研究中發(fā)現(xiàn)有明顯的抑瘤作用。本實(shí)驗(yàn)研究SBPS對(duì)化療藥物環(huán)磷酰胺(CTX)的增效減毒作用，為其早日研發(fā)為新型抗癌輔助藥奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與瘤株 昆明種小白鼠，體重(20±2)g，雌雄各半，由牡丹江醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供;肝癌H22瘤株，由黑龍江省腫瘤研究所引進(jìn)。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥物 SBPS(牡丹江醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室制備);CTX(江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司產(chǎn)品，批號(hào):004539)。

1.3 方法

1.3.1 增效實(shí)驗(yàn) 常規(guī)接種腫瘤于小鼠右側(cè)腋窩下。將接種后的小鼠隨機(jī)分為陰性對(duì)照組、SBPS組(×3)、CTX組、SBPS+CTX組(×3)，每組10只。接種后6h各組肌注給藥0.1mL·只－1，每天1次，連用10d。陰性對(duì)照組給予等量生理鹽水。停藥次日動(dòng)物稱(chēng)體重，處死后剝離瘤塊，稱(chēng)瘤重。每組實(shí)驗(yàn)均重復(fù)進(jìn)行3次。計(jì)算腫瘤生長(zhǎng)抑制率:抑瘤率(IR)=(1－實(shí)驗(yàn)組平均瘤重/對(duì)照組平均瘤重)×100%。

兩藥合用后是否增效，按下式計(jì)算q值:q=EAB/［EA+(1－EA)EB］。式中EA為A藥抑瘤率，EB為B藥抑瘤率，EAB為兩藥合用的抑瘤率，q=0.85～1.15為兩藥作用相加，q>1.25為兩藥作用增強(qiáng)(或協(xié)同)，q<0.85為兩藥拮抗。

1.3.2 減毒實(shí)驗(yàn) 常規(guī)接種腫瘤于小鼠右側(cè)腋窩下。將接種后的小鼠隨機(jī)分為陰性對(duì)照組、CTX常規(guī)劑量組、SBPS+CTX低劑量組、SBPS+CTX中劑量組、SBPS+CTX高劑量組，每組10只。給藥方法同上。停藥次日取尾尖血，常規(guī)方法進(jìn)行WBC計(jì)數(shù)，然后稱(chēng)重處死動(dòng)物，剝離瘤塊、胸腺和脾臟，并分別稱(chēng)重，計(jì)算抑瘤率和臟器指數(shù)。

2 結(jié)果

2.1 SBPS對(duì)CTX抗小鼠肝癌的增效作用 見(jiàn)表1。

從表1中可以看出，三個(gè)劑量的SBPS都有明顯的抑瘤效果，以中劑量作用尤為顯著，抑瘤率為39.24%;三個(gè)劑量SBPS分別與CTX合用時(shí)(低、中、高)劑量組的抑瘤率比單用CTX組有所提高，以CTX高+SBPS高組更為明顯，與CTX高劑量組相比有顯著性差異(P<0.05)，抑瘤率為75.39%;CTX高劑量與SBPS高、中、低劑量組聯(lián)合用藥組q>0.85但小于1.25，表明在CTX高劑量時(shí)兩藥合用時(shí)有相加作用，提示SBPS能提高CTX的抑瘤效果。

2.2 SBPS對(duì)CTX抗小鼠肝癌的減毒作用 見(jiàn)表2。

表1 SBPS對(duì)CTX抗小鼠肝癌的增效作用

表2 SBPS對(duì)CTX抗小鼠肝癌的減毒作用

從表2可見(jiàn)，SBPS與低于常規(guī)劑量的CTX各組合用時(shí)抑瘤率升高，以SBPS+CTX高劑量組最為明顯，抑瘤率達(dá)75.39%。CTX常規(guī)劑量組治療后毒副作用較大，外周血WBC數(shù)、胸腺指數(shù)和脾指數(shù)與陰性對(duì)照組比較均顯著降低，統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)有意義(P<0.01)。SBPS與 CTX各劑量合用后，可使外周血WBC、胸腺指數(shù)和脾指數(shù)升高，與CTX常規(guī)劑量組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與陰性對(duì)照組相比，WBC和胸腺指數(shù)仍比較低，有顯著性差異(P<0.01)，而脾指數(shù)與陰性對(duì)照組相比無(wú)顯著性差異(P>0.05)。

3 討論

自1968年Karnofaky正式提出腫瘤內(nèi)科學(xué)這一名稱(chēng)以來(lái)，腫瘤化療學(xué)已經(jīng)形成了一個(gè)新的抗腫瘤學(xué)科，然而化療藥物的毒性反應(yīng)以及患者對(duì)化療藥物的耐受性仍是其存在的主要問(wèn)題。因此，研究既能提高其療效，又可減輕毒副作用的藥物顯得十分重要。而在這一方面，中醫(yī)藥尤其是多糖具有不可替代的、獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)［5，6］。

本實(shí)驗(yàn)表明，SBPS能顯著增強(qiáng)CTX對(duì)小鼠H22抑瘤活性，與單用CTX相比有顯著差異，而且q>0.85，說(shuō)明SBPS對(duì)CTX抗癌有明顯的增效作用，尤其在與CTX低于常規(guī)量合用時(shí)，仍能有較高的抑瘤率，更能說(shuō)明它的增效作用非常明顯。同時(shí)對(duì)CTX所致的外周血WBC減少、免疫器官萎縮等毒性反應(yīng)，雖然不能使其完全恢復(fù)到正常水平，但均有明顯保護(hù)作用，提示該SBPS是一種有效的化療藥物的減毒增效劑，有良好的應(yīng)用前景和研究?jī)r(jià)值。

［1］國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典［M］.北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2005:77－78.

［2］中國(guó)中草藥匯編編寫(xiě)組.全國(guó)中草藥匯編［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，1990:223－224.

［3］何福根，章紅燕，沈斌.半枝蓮抗腫瘤作用及其機(jī)制研究進(jìn)展［J］.中國(guó)腫瘤，2008，17(2):108－112.

［4］陶偉.中藥半枝蓮的藥理及臨床應(yīng)用研究進(jìn)展［J］.海軍醫(yī)學(xué)雜志，2008，29(2):181－184.

［5］代志軍，王西京，紀(jì)宗正，等.半枝蓮提取物對(duì)H22肝癌荷瘤小鼠化療的增效減毒作用［J］.中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報(bào)，2008，6(7):720－724.

［6］陳震，王鵬，黃雯霞，等.生脈注射液對(duì)5－FU增效減毒作用的實(shí)驗(yàn)研究［J］.中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報(bào)，2005，3(6):476－479.