急性腦梗死患者血清基質金屬蛋白酶-9變化及醒腦靜注射液的干預作用

張蘭起,雷惠新,趙德英

在基質金屬蛋白酶中,基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)通過降解細胞外基質使血腦脊液屏障(BBB)受損,引起血管源性腦水腫。醒腦靜注射液具有醒神開竅、熄風止痙、化痰活血、清熱解毒等功效。本研究應用醒腦靜注射液進行隨機臨床對比,觀察其對MM P-9的影響,探討其治療急性腦梗死(ACI)的可能作用機制。

1 資料與方法

1.1 研究對象 急性腦梗死病例來源于2007年1月—12月福建省立醫院神經內科住院治療患者,共選取46例。隨機分為兩組,常規組(A 組)23例,男14例,女9例,年齡42歲～77歲。治療組(B組)23例(醒腦靜注射液+常規治療),男 14例,女9例,年齡52歲～80歲。兩組臨床資料具有可比性。

1.2 方法 常規組根據病情選用甘露醇、甘油果糖降顱壓,適當控制血壓,抗血小板聚集,抗凝,降纖,調節水電解質平衡及預防感染等治療。治療組在常規治療基礎上加用醒腦靜注射液(江蘇無錫山禾藥業股份有限公司生產)20 mL加入250 mL生理鹽水中靜脈輸注,每日 1次,共14 d。兩組又根據腦梗死面積大小分為大面積、中面積及小面積亞組進行對比研究(入院后3 d～5 d CT檢查:直徑＞4.0 cm為大面積;直徑1.5 cm～4.0 cm為中面積;直徑＜1.5 cm為小面積)。

1.3 血液標本 所有患者均于入院后次日、3日、8日、14日清晨07:00前空腹抽取肘靜脈血2 mL,30 min內用高速離心機離心5 min,將血清置于-50℃冰箱保存。

1.4 檢測指標 MM P-9采用酶聯免疫吸附雙抗體夾心法(ELISA)檢測,在芬蘭雷博公司產M K3-SLS010型自動酶標儀上進行。試劑盒均由 Rapid Biolab California.USA公司提供。

2 結 果

2.1 ACI患者血清MMP-9濃度變化(見表1)兩組第1天與第3天MM P-9濃度均無統計學意義(P＞0.05),第1天與第8天、第14天均有統計學意義(P＜0.01),第14天治療組降至正常水平,常規組還稍高于正常。

表1 ACI患者血清MMP-9濃度變化(±s)ng/mL

表1 ACI患者血清MMP-9濃度變化(±s)ng/mL

組別 n 第1天 第3天 第8天 第14天A 組 23 412.86±73.35 376.74±60.29 272.67±71.221) 121.71±18.581)B組 23 419.88±97.13 386.83±81.56 282.62±92.801) 80.03±16.601)與第1天比較,1)P＜0.01

2.2 不同梗死面積的ACI患者血清MMP-9濃度比較(見表2)大面積組血清M MP-9濃度明顯高于中面積亞組(P＜0.05),中面積組血清MMP-9濃度明顯高于小面積組(P＜0.05)。直線相關分析示:梗死面積大小與MMP-9濃度呈明顯正相關(r=0.67,P＜0.01)。

表2 不同梗死面積 ACI患者血清MM P-9濃度比較(±s)

表2 不同梗死面積 ACI患者血清MM P-9濃度比較(±s)

組別 n M MP-9(ng/mL)大面積組 16 479.44±77.351)2)中面積組 12 409.88±76.641)小面積組 18 356.19±51.38與小面積組比較,1)P＜0.05;與中面積組比較,2)P＜0.05

2.3 不同梗死面積ACI患者血清MMP-9濃度變化(見表3)

兩組大面積、中面積、小面積組血清M MP-9濃度治療前后差值均有統計學意義,以大面積亞組差別最明顯。

表3 ACI患者血清M MP-9濃度變化(±s)ng/mL

表3 ACI患者血清M MP-9濃度變化(±s)ng/mL

組別 n 治療前 治療后 差值A組 大面積 7 455.30±75.36 136.14±32.48 319.16±46.331)中面積 7 419.94±71.15 166.44±47.10 253.50±43.071)小面積 9 371.89±54.24 142.37±25.56 229.52±52.171)B組 大面積 9 498.69±71.32 91.54±13.80407.14±59.57中面積 5 395.80±90.19 65.80±24.19 330.00±70.77小面積 9 354.93±60.78 64.23±21.00 290.70±60.54與B組同面積亞組比較,1)P＜0.05

3 討 論

MM P-9是與ACI關系最密切的基質金屬蛋白酶,分子量92kD。當腦組織缺血時,MMP-9主要表達于缺血組織的血管內皮細胞和中性粒細胞。在腦內,毛細血管內皮細胞及其間的緊密連接是血腦屏障的主要部分,細胞外基質分子構成的基膜為它提供結構支持,因此,基膜在保持血腦屏障的完整性方面起重要作用。MMP-9作為一種炎癥相關蛋白酶,通過降解細胞外基質使血腦屏障受損、通透性增加,引起血管源性腦水腫。

Rosenberg等[1]在動物試驗中發現,急性腦梗死后3 h～4 h缺血區M MP-9表達開始增加,12 h明顯增高,24 h～48 h達到高峰,并持續5 d,到缺血后第15天表達恢復基礎水平;缺血腦組織的血管內皮細胞活性增高,表達高濃度M MP-9,后者使基膜受損,血腦屏障損傷,引起腦水腫。所以,在腦梗死急性期,預先應用M MP-9抑制劑可明顯降低血管內皮細胞及中性粒細胞的MM P-9表達,減少血腦屏障的破壞和減輕腦水腫,減輕興奮性氨基酸對神經損害,起到神經保護作用[2]。

本試驗發現,A、B兩組的MMP-9濃度從發病第1天開始即達到高峰,第8天明顯下降,第14天時治療組降至正常水平,常規組稍高于正常。兩組均未出現2 d～6 d的高峰,整個過程呈緩慢下降曲線。這與Rosenberg等[1]的動物試驗結果稍有差異,考慮與藥物干預抑制MMP-9的表達,使其高峰時濃度下降所致。

本試驗還發現,血清MMP-9濃度大面積組明顯高于中面積組,中面積組明顯高于小面積亞組。梗死面積大小與MMP-9濃度呈明顯正相關,與 Montaner等[3]的研究相符合。提示 MMP-9水平可作為腦梗死面積大小的標志,并較準確地反映病情。

醒腦靜注射液是在古方安宮牛黃丸的基礎上改制而成的水溶性靜脈注射液,該藥主要由麝香、梔子、郁金、冰片等藥組成。麝香氣味芳香,性善走竄,具有較強的開竅通閉作用,為醒神回蘇要藥;冰片辛苦微寒,通諸竅而散郁火,常與麝香相伍用于醒神開竅;梔子瀉三焦之火,清熱涼血,利濕解毒;郁金辛苦性寒,活血化瘀止痛,行氣解郁,涼血清心。四藥合用,具有醒神開竅、熄風止痙、化痰活血、清熱解毒等功效,與中風病急性期風、火、痰、瘀互結,陰陽失調,氣血逆亂病機相吻合,可用于中風病急性期治療[4]。

本研究發現治療組大面積、中面積、小面積亞組治療前后血清MMP-9濃度變化較常規組有統計學意義,但以大面積亞組差別最明顯,故醒腦靜注射液對大面積梗死組療效更明顯。

傅強等[5]進行的動物試驗研究表明,醒腦靜注射液能降低血腦屏障通透性,減輕腦水腫,清除氧自由基,防治神經細胞凋亡,減輕缺血再灌注損傷,對腦功能有重要的保護作用。本試驗顯示:醒腦靜注射液能抑制MMP-9,減輕MM P-9對血管基膜及血腦屏障的損害,從而減輕腦缺血損傷、腦水腫及再灌注傷。減輕腦神經細胞凋亡,降低中風面積、縮短昏迷時間,發揮其腦保護劑的作用。

[1]Rosenberg GA,Navratil M,Barcone F.Proteolytic cascade enzymes in focal cerebral ischemia in rats[J].Cereb Blood Flinc Metab,1996,16:360-366.

[2]Gidday JM,Gasche YG,Copin JC,et al.Leukocy te-derived matrix metalloproteinase-9 mediates blood-brain barrier breakdown and is proinflammatory after transient focal cerebral ischemia[J].Am J Phy siology,2005,289(2):558-568.

[3]Montaner J,Alvarez SJ,M olina C,et al.Matrix metalloproteinase ex pression after human cardioembolic stroke:T emporal profile and relation to neurological impairment[J].Stroke,2001,32(8):1759-1766.

[4]王金良,顧衛,譚峰,等.醒腦靜注射液對急性腦梗塞患者血清TNF-α與IL-6的影響[J].中華醫藥,2003,3(3):97-98.

[5]傅強,崔華雷,孫中吉,等.醒腦靜注射液對腦缺血-再灌注誘導的腦神經細胞凋亡防治作用的試驗研究[J].中國中西醫結合急救,2000,3(7):144-146.