復方七芍降壓片對自發性高血壓大鼠血壓及8-異前列腺素F2α的影響1

雍蘇南,譚元生

高血壓病是當前最常見的心血管疾病之一,其病因復雜、病程長,是絕大多數心腦血管及腎臟疾病的主要致病原因,是危害人類健康的主要疾病。所以有效的防治高血壓病,已成為一個十分迫切的問題。復方七芍降壓片具有良好的降低血壓、改善血液高凝狀態、保護靶器官的作用[1,2]。本研究觀察了其對自發性高血壓大鼠(SHR)血壓及 8-異前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)的影響。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 動物 8周齡SHR 48只,體重240 g～280 g,雄性,清潔級,批號:SCXK(滬2007-0005)。由上海斯萊克實驗動物有限責任公司提供。8周齡Wistar-kyoto(WKY)大鼠12只,體重230 g～ 280 g,雄性,清潔級,批號:SCXK(滬 2007-0005),由上海斯萊克實驗動物有限責任公司提供。

1.1.2 藥物與試劑 復方七芍降壓片組方:三七9 g,白芍18 g,天麻15 g,桑寄生 15 g,杜仲15 g,地龍15 g,羅布麻18 g,夏枯草18 g,車前子 18 g,甘草6 g。湖南中醫藥大學第一附屬醫院藥劑科制備,批號:20070816?？ㄍ衅绽科?5 mg,上海普原藥業有限公司生產,批號:20070911。8-iso-PGF2αELISA試劑盒,美國Cayman Chemical Company公司。

1.1.3 儀器 BP-2006A型智能無創血壓計,北京軟隆科技有限責任公司;MK3酶標儀,芬蘭雷勃公司。

1.2 方法

1.2.1 分組及灌胃 適應性喂養1周后,將48只SHR隨機分為4組,每組12只,即模型組、卡托普利組、復方七芍降壓片低劑量治療組、復方七芍降壓片高劑量治療組。12只WKY大鼠為正常組。復方七芍降壓片(壓片前)成人每日用量為49 g,低劑量治療組以成人等效量[大鼠體表面積/成人平均體表面積×成人每日用量]灌胃;高劑量治療組以成人等效量4倍灌胃;卡托普利組以成人等效量灌胃。模型組及正常組以等量蒸餾水同時開始灌胃,給藥體積為10 mL/kg。各組每日灌胃1次,連續4

2 結 果

2.1 SHR尾動脈壓的測定結果 模型組隨時間逐漸增高,治療組及卡托普利組血壓均有不同程度下降;與模型組比較,卡托普利組在治療1周后血壓明顯降低(P＜0.01),高低劑量治療組在治療2周后血壓開始降低(P＜0.01);與卡托普利組比較,整個療程中,高、低劑量治療組血壓均高于卡托普利組(P＜0.01)。復方七芍降壓片治療有效,降壓效果高劑量組優于低劑量組。詳見表1。周,灌胃期間每周測量 1次血壓。每周測 1次體重,根據體重隨時調整給藥量。

1.2.2 SHR尾動脈壓的測定 應用智能無創血壓計,采用尾動脈測壓法測量給藥前后大鼠血壓。測量時間分別在實驗開始前、1周后、2周后、3周后和4周后,在每周第7天14:00～17:00測各組大鼠的血壓平均值,為該鼠所在周的血壓值。

1.2.3 8-iso-PGF2α的測定 灌胃4周后,將大鼠處死,測定 8-iso-PGF2α時,將低溫保存的心肌組織標本于4℃冰箱中解凍,加10倍體積的 HEPES緩沖液,勻漿后以12 000 r/min離心20 min,上清液保存于-4℃待測。使用抗原競爭ELISA法檢測血漿和心肌組織中8-iso-PGF2α含量。

表1 各組大鼠治療前后血壓變化比較(±s)mmHg

表1 各組大鼠治療前后血壓變化比較(±s)mmHg

組別 n 治療前 治療后1周 治療后2周 治療后3周 治療后4周正常組 12 115±8 120±9 115±8 118±8 121±9模型組 12 185±91) 187±81) 195±81) 200±81) 206±101)卡托普利組 12 184±101) 138±121)2)5) 138±111)2)5) 137±91)2)5) 134±101)2)5)低劑量治療組 12 185±71) 182±81)3) 180±91)2)3) 175±91)2)3) 171±81)2)3)高劑量治療組 12 186±81) 181±91)3) 174±81)2)3) 165±71)2)3)4) 158±71)2)3)4)與正常組比較,1)P＜0.01;與模型組比較,2)P＜0.01;與卡托普利組比較,3)P＜0.01;與低劑量治療組比較,4)P＜0.05;與本組治療前比較,5)P＜0.01

2.2 復方七芍降壓片對SHR血漿和心肌組織中8-iso-PGF2α的影響 與正常組比較,各組血漿和心肌組織8-iso-PGF2α水平均明顯升高(P＜0.05或 P＜0.01);與模型組比較,卡托普利組 8-iso-PGF2α水平無明顯差異,高、低劑量組血漿和心肌組織的 8-iso-PGF2α的含量均明顯降低(P＜0.01)。高劑量治療組與低劑量治療組比較,差異有統計學意義(P＜0.05)。復方七芍降壓片能降低血漿和心肌組織的8-iso-PGF2α的含量,高劑量組的效果更優于低劑量組。詳見表2。

表2 各組大鼠血漿和心肌組織8-iso-PGF2α含量比較(±s)

表2 各組大鼠血漿和心肌組織8-iso-PGF2α含量比較(±s)

組別 n 血漿(ng/mL)心肌(ng/g)正常組 12 60.2±12.8 86.4±15.2模型組 12 182.3±42.62) 251.6±45.11)卡托普利組 12 189.2±37.42) 265.8±50.22)低劑量治療組 12 97.8±15.22)3) 135.6±23.42)3)高劑量治療組 12 85.6±14.21)3)4) 104.4±26.71)3)4)與正常組比較,1)P＜0.05,2)P＜0.01;與模型組比較,3)P＜0.01;與低劑量組比較,4)P＜0.05

3 討 論

高血壓病往往缺乏特征性臨床表現,早期或輕型高血壓可無癥狀,病變發展時可表現為頭暈、目眩、頭痛,甚則視物旋轉等癥狀,因而中醫將其歸納為眩暈、頭痛的范疇。風眩的病因病機為變動在肝,根源在腎,肝腎陰虛是風眩的發病基礎,瘀血阻絡為風眩的標實之證,治療上以滋補肝腎、活血化瘀為大法。復方七芍降壓片主要由三七、白芍、地龍、天麻、羅布麻葉、車前子、桑寄生、杜仲、夏枯草、甘草等 10味中藥組成。據現代藥理研究證實,三七為化瘀之要藥,能抑制血小板聚集,促進纖溶,使全血黏度下降,從而抑制血栓形成和動脈粥樣硬化;還有降血壓、擴張血管,抑制血管平滑肌細胞的增殖、及保護血管內皮細胞作用。白芍所含芍藥甙有較好的解除平滑肌痙攣的作用,有一定的降壓、擴血管的功效;天麻有降低外周血管和冠脈阻力,降壓,減慢心率及鎮痛作用;同時還可改善微循環障礙,減少微循環灌注的阻力,并可緩解血液流變異常致微循環灌注障礙而引起中樞神經系統損害的癥狀。這些都為復方七芍降壓片平穩降壓、保護靶器官以及延緩高血壓并發癥等作用提供藥理學依據。

8-iso-PGF2α是一種較強的血管收縮因子。在高血壓患者中血漿8-iso-PGF2α的水平顯著升高,提示氧化應激及其產物可促進高血壓的發生發展。最近研究發現,血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)可通過還原型輔酶Ⅱ(NAD-PH)氧化酶的介導作用誘導血管壁細胞產生氧自由基,一方面滅活一氧化氮(NO),影響血管壁的舒張功能,另一方面可誘導血管平滑肌細胞遷移增殖,從而導致血管壁增厚和血管壁順應性下降,導致血壓升高。本研究所采取的模型SHR從許多方面來講,如發病機制、高血壓病心血管并發癥、外周血管阻力變化、對鹽的敏感性等都與人類高血壓病患者相似,是目前國際公認的最接近人類高血壓病的動物模型[3]。SHR與血壓正常的WKY大鼠比較,其主動脈、心臟的氧化應激標志物 8-iso-PGF2α增高[4]。Romero等[5]研究發現,8-iso-PGF2α有強的血管收縮和抗尿鈉排泄的作用,即使在AngⅡ正常的情況下,也參與了高血壓的形成。此外8-iso-PGF2α在體液內含量非常穩定,被認為是判斷活體內自由基氧化強度和臨床上作為評價氧化劑療效的最理想生化指標[6,7]。

本實驗表明,復方七芍降壓片在降壓基礎上能降低SHR血漿及心肌組織中的8-iso-PGF2α含量,說明其可降低體內氧化反應,改善患者的內皮功能,延緩動脈粥樣硬化的發展,即通過改善高血壓患者的預后,延長其生存時間和生存質量。

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[2]譚元生,宋雪云,譚勝真.復方七芍降壓片治療高血壓病的臨床研究[J].中成藥,2005,27(7):795-798.

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[5]Romero JC,Reckelhoff JF.Role of angiolension and oxidative stress in essential hypertension[J].Hypertension,1999,34(4 pt 2):943-949.

[6]Pratico D.F2-isoprostanes:Sensitive and specific non-invasive indices of lipid peroxidation in vivo[J].A theroslerosis,1999,147(1):1-10.

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