傅俊范, 石建華, 周如軍, 嚴雪瑞, 史會巖, 蘇 丹
(沈陽農業大學植物保護學院,沈陽 110161)
輪葉黨參[Codonopsis lanceolata(Sieb.et Zucc.)Jrautv.]別名羊乳、四葉參、山胡蘿卜等,為桔梗科黨參屬多年生纏繞草本藥食兩用植物。其根可入藥,有補虛潤肺、通乳排膿、解毒療瘡之功效[1]。除含有藥用成分外,尚含有多種對人體有益的營養成分,如淀粉、糖、纖維素、胡蘿卜素、17種人體必需的氨基酸及豐富的Ca、P、Fe礦物質等[2]。近年來隨著出口量加大,野生資源減少,輪葉黨參在遼寧東部山區人工栽培面積日益增大,在此過程中病害問題日益嚴重。輪葉黨參斑枯病是遼寧省近年來普遍發生的一種毀滅性的新病害,在生產上造成了嚴重的經濟損失,影響了輪葉黨參種植業的發展。經查閱相關文獻,迄今尚未見對該病的系統研究報道。現將輪葉黨參斑枯病初步調查結果和病原鑒定報道如下。
2008年對遼寧新賓、清原,沈陽農業大學百草園、藥材園內的輪葉黨參斑枯病進行了系統調查。采取隨機取樣法,即隨機抽取一定面積、一定數量的植株,調查發病數量、每株發病葉數,統計分析發病率和病情指數。根據輪葉黨參斑枯病田間發病特點,綜合其他藥用植物葉斑病分級標準,制定出輪葉黨參斑枯病分級標準(表1)。

表1 輪葉黨參斑枯病分級標準
采集具有典型癥狀的病葉,用塑料袋裝好,帶回實驗室進行分離。分離前,先將病葉用清水沖洗干凈,采用常規組織分離法和孢子懸液分離法分離[3]。
采用離體葉片接種法,取輪葉黨參健葉,用無菌水反復沖洗。用制備好的孢子懸液進行懸滴和針刺接種,無菌水為對照,接種后進行保濕培養,共進行葉背面接種、葉正面接種、葉背面刺傷接種和葉正面刺傷接種4個處理,每處理6個葉片,每個葉片3個懸滴點,逐日觀察記錄發病狀況[3]。根據柯赫氏法則,對發病葉片進行再分離,顯微鏡下觀察分離得到的病菌是否與原接種菌株相同[3]。
2008年對遼寧新賓、清原和沈陽農業大學地區的輪葉黨參斑枯病進行系統調查,病田率為100%,病株率為34%~81%,病情指數為15.2~52.6。病害始發期為6月下旬,發病高峰期集中在7月中旬到8月中旬。
田間調查發現,輪葉黨參斑枯病主要危害葉片,從底層葉片開始發病,病斑近圓形或不規則形,褐色,邊緣紫色,直徑1~5 mm,后期幾個病斑可連在一起(見圖1),病斑上產生小黑點(分生孢子器),發病嚴重時,葉片枯黃或提早落葉,有的病斑有穿孔(見圖2)。
該菌生長緩慢,在輪葉黨參葉片煎汁加PDA培養基上25℃光照培養30 d,菌落直徑28~34 mm(如圖3)。菌落質密,隆起,呈灰黑色或墨綠色。分生孢子針形,無色,基部鈍圓,頂端較尖,有些兩端均略尖,1~4個隔膜,正直或微彎,大小為(18~42)μ m×(1~2)μ m(如圖4)。分生孢子器埋生于葉兩面,散生或聚生(如圖 5),初埋生,后突破表皮,球形或近球形,直徑 65 ~115 μ m,高 50~ 115 μ m 。 器壁膜質,褐色 ,由 2~ 3 層細胞組成,壁厚 5~ 7.5 μ m,胞壁暗褐色。

根據該菌的形態特征和培養特征,參照相關文獻[4-6]鑒定輪葉黨參斑枯病致病菌為黨參殼針孢(Septoria codonopsidis Ziling)。
試驗結果(表2)表明,4種處理方式均能使輪葉黨參發病,并從接種的葉片上重新分離到黨參殼針孢菌(Septoria codonopsidis Ziling),證明該菌為輪葉黨參斑枯病致病菌。不同處理的發病率和發病時間均不相同,且對照沒有產生病斑。

表2 黨參殼針孢菌對輪葉黨參致病性測定結果
枯死病葉中帶有大量病菌分生孢子器,是翌年主要侵染來源。秋季應徹底清潔田園,將病殘體集中燒毀。栽培密度要適宜,不要過密栽培。雨后及時排水,降低田間濕度,適時除草[7-8]。
發病初期及時用藥劑防治,可噴灑50%代森錳鋅500~600倍液,或70%甲基硫菌靈600~800倍液,或50%多菌靈600倍液,或75%百菌清500~600倍液。每隔 7~10 d噴 1次,雨季5~7 d噴1次,視病情發展連續噴2~3次。
本文經柯赫氏法則接種證病試驗,確認輪葉黨參斑枯病菌為黨參殼針孢(S.codonopsidis Ziling)。該病6月下旬出現,7月中旬到8月中旬為發病盛期,雨水和傷口有利于其發生,這與已報道的由殼針孢引起的藥用植物病害結果基本一致[8-9]。殼針孢屬(Septoria)真菌可以引致多種植物斑枯病[10],僅在藥用植物就已報道白芷斑枯病、柴胡斑枯病、丹參葉枯病、地黃斑枯病、黃連斑枯病、白術斑枯病和桔梗斑枯病等[11]。目前,國內外尚未見有關輪葉黨參斑枯病的系統研究報道。其病原學、流行發病規律等均不詳,近年隨著輪葉黨參人工種植面積擴大,輪葉黨參病害開始發生并呈上升趨勢。為了保障輪葉黨參產業的健康發展,為病害防治提供科學依據,有關該病病原學、流行規律及防治技術有待于進一步研究。
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