Fascin蛋白及 NF-kB在宮頸鱗癌中的表達(dá)及其意義

韓耀偉,佟麗波,余繁榮

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院婦產(chǎn)科,黑龍江 佳木斯 154003)

隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展,同時(shí)存在的分子事件基因表達(dá)亦逐漸被認(rèn)識(shí),從中明確腫瘤的發(fā)生發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移是一個(gè)多步驟、多階段及多基因參與的分子生物學(xué)變化過(guò)程。fascin蛋白是一種結(jié)構(gòu)獨(dú)特、進(jìn)化保守的細(xì)胞骨架蛋白,是近年來(lái)腫瘤研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)之一。它定位于細(xì)胞質(zhì)、絲狀偽足、微棘中 ,在細(xì)胞內(nèi)與 f-肌動(dòng)蛋白結(jié)合,參與細(xì)胞與細(xì)胞之間、細(xì)胞與基質(zhì)之間的相互作用,有助于細(xì)胞的遷移和運(yùn)動(dòng)。N F-kB廣泛存在于人體組織細(xì)胞中,通常與其抑制蛋自 IkB相結(jié)合,并以非活性狀態(tài)貯存于細(xì)胞質(zhì)中。在諸如生長(zhǎng)因子、致炎細(xì)胞因子、免疫受體、病毒與病毒蛋白等刺激因子作用下激活。從而在免疫、炎癥、細(xì)胞的生存、增殖分化和凋亡等方面起到廣泛而重要的作用。本課題主要以免疫組化方法聯(lián)合檢測(cè) fascin蛋白和 N F-kB正常宮頸上皮組織、宮頸上皮內(nèi)瘤變及宮頸鱗癌上皮組織中的表達(dá),進(jìn)一步探討fascin蛋白和 NF-kB在宮頸鱗癌組織表達(dá)的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集佳木斯大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科2004～ 2009年臨床和病理資料完整的22例宮頸鱗癌根治術(shù)組織標(biāo)本,取材部位為腫瘤組織中心和10例標(biāo)本切緣正常宮頸組織,28例宮頸上皮內(nèi)瘤變病變組織。

1.2 主要試劑

鼠抗人 fascin單克隆抗體;兔抗人 NF kappa B/p50蛋白免疫組化多克隆抗體;SP免疫組化試劑盒(即用型 )。以上均為美國(guó) Maxim公司產(chǎn)品,前者購(gòu)自北京康為世紀(jì)生物有限公司,后二者購(gòu)自福建邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)公司。

1.3 方法

所有標(biāo)本均為手術(shù)切除新鮮標(biāo)本,取材后中性甲醛固定,石蠟包埋,厚 4 μm連續(xù)切片,行 HE及免疫組織化學(xué)染色。

1.4 結(jié)果判定

fascin蛋白和 NF-KB抗原陽(yáng)性物質(zhì)呈棕黃色顆粒狀,fascin蛋白主要定位于細(xì)胞漿中;N F-KB主要定位于細(xì)胞漿中。染色結(jié)果判定參照1996年全國(guó)免疫組化技術(shù)與診斷標(biāo)準(zhǔn)化專題研討會(huì)意見(jiàn):＜25%的細(xì)胞著色,陰性(-);25%～ 50%的細(xì)胞著色,弱陽(yáng)性(+ );51%～ 70%的細(xì)胞著色,中度陽(yáng)性(++);＞70%的細(xì)胞著色,強(qiáng)陽(yáng)性(+++)。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

采用 SPSS11.0軟件包統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)結(jié)果,具體應(yīng)用i2檢驗(yàn)。相關(guān)分析采用 Spearman等級(jí)相關(guān)。

2 結(jié)果

2.1 fascin蛋白和 N F-kB在宮頸鱗癌不同部位的表達(dá)

fascin蛋白、NF-kB的表達(dá)與宮頸鱗癌臨床病理因素的關(guān)系,見(jiàn)表1。

表1 fascin蛋白在三種不同宮頸上皮中的表達(dá)

2.2 fascin蛋白與 N F-KB表達(dá)的相關(guān)性

見(jiàn)表2。

表2 fascin蛋白、NF-kB在宮頸鱗癌組織表達(dá)的相關(guān)性

3 討論

本研究對(duì)標(biāo)本進(jìn)行免疫組化等實(shí)驗(yàn)分析,發(fā)現(xiàn)在不同分化程度及臨床病理分期的宮頸鱗癌以及正常組織的腫瘤標(biāo)志分子的不同表達(dá),來(lái)了解宮頸鱗癌發(fā)生、發(fā)展的可能分子機(jī)制。fascin表達(dá)增高可以引起細(xì)胞膜的突起增多,且多表達(dá)于微棘以及遷移方向的最前緣,可引起細(xì)胞間黏附連接的解聚和細(xì)胞相互黏附活性減少[1～3],上述生物學(xué)特性決定了fascin蛋白可能參與多種腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移。Fascin蛋白表達(dá)上調(diào)可作為一些癌癥判斷預(yù)后的標(biāo)志,目前關(guān)于 fascin與腫瘤預(yù)后關(guān)系的研究較多 ,如在胃癌、大腸癌、食管癌、肺癌、乳腺癌、皮膚癌等惡性腫瘤的預(yù)后研究中,fascin的高表達(dá)常提示分化程度低及預(yù)后差。1986年 Sen和 Baltimore首先發(fā)現(xiàn) NF-kB并對(duì)其進(jìn)行了描述。N F-kB是最先在成熟的 B細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn)的一種核蛋白。N F-kB通常與其抑制蛋白IkB相結(jié)合,并以非活性狀態(tài)貯存于細(xì)胞質(zhì)中。N F-KB(IkB)激活作用的刺激因子涉及范圍很廣,主要包括生長(zhǎng)因子 (如 N GF、 GM-CSF)、致炎 細(xì)胞 因子 (如 IL-1、 TN F-a)、免 疫 受體 (如 CD40、 FasL)、 神 經(jīng)毒素、細(xì)菌 及其產(chǎn) 物L(fēng)PS、病毒與病毒蛋白及某些理化因素 (如紫外線)等[4～7]。本研究還發(fā)現(xiàn),fascin蛋白與 NF-KB在宮頸鱗癌細(xì)胞的表達(dá)呈正相關(guān),即 NF-KB陽(yáng)性率越高,fascin蛋白陽(yáng)性率也高,從而可以推測(cè) fascin蛋白與 NF-KB在宮頸鱗癌的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中存在相互關(guān)聯(lián)、共同作用。這是應(yīng)該由于 fascin基因的啟動(dòng)子和第一個(gè)內(nèi)含子有22個(gè) NF-kB和24個(gè) TATA核心因子 (TATA core factor,TCF)的結(jié)合位點(diǎn),轉(zhuǎn)錄因子與fascin基因的位點(diǎn)結(jié)合后 ,促進(jìn)其轉(zhuǎn)錄,從而導(dǎo)致 fascin表達(dá)上調(diào),進(jìn)而促進(jìn)宮頸鱗癌的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移。所以聯(lián)合檢測(cè) fascin蛋白與 N F-KB在判斷腫瘤生物學(xué)行為及預(yù)后方面有更大意義。

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