高效液相色譜法測定飲料中檸檬黃、日落黃含量

鞏強

檸檬黃、日落黃在飲料中作為著色劑被廣泛使用，《食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定了其最高限量，本實驗在GB/T 5009.35-2003基礎(chǔ)上，對其檢驗方法進行了優(yōu)化。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

高效液相色譜儀（島津，配紫外檢測器）；0.02mol/L乙酸銨：經(jīng)0.45um濾膜過濾；甲醇：色譜純，經(jīng)0.45um濾膜過濾；檸檬黃、日落黃標(biāo)準(zhǔn)使用液 1ug/mL、2ug/mL、3ug/mL、4ug/mL，進樣前經(jīng)0.45um濾膜過濾；聚酰胺粉（200目）；乙醇-氨溶液：取2mL的氨水，加70%乙醇至100mL；200g/L檸檬酸溶液。

1.2 樣品制備

稱取10.0g飲料于燒杯中，然后用20%檸檬酸調(diào)pH至酸性，加入0.5g～1.0g聚酰胺粉吸附色素，全部轉(zhuǎn)至G3漏斗中，以pH值為4的酸性熱水洗滌多次（約200mL），洗去糖等物質(zhì)。用甲醇-甲酸溶液洗滌1次～3次，每次20mL，至洗液無色。再用70℃熱水多次洗至流出液為中性。用乙醇-氨水分次解吸，收集解吸液，于水浴除氨并蒸發(fā)至2mL，用50%乙醇定容至5mL，備測定用。

1.3 測定

色譜條件：波長：254nm；HjchromC18反相柱；流動相：0.02mol/L乙酸銨：甲醇（85：15）；流速：1mL/min；進樣體積 10ul；外標(biāo)法峰面積定量。

1.4 檸檬黃、日落黃的標(biāo)物圖譜（4ug/mL）

2 結(jié)果分析與討論

結(jié)果表明：飲料中，方法添加檸檬黃、日落黃回收率分別為99.2%、99.4%。與國家標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法（GB/T 5009.35-2003）結(jié)果比較，經(jīng)配對t檢驗（p>0.05）無顯著性差異。

本法與GB/T 5009.35-2003規(guī)定的方法不同之處在于：本法不需要梯度洗脫程序。原因是：GB/T 5009.35-2003規(guī)定的方法有8種著色劑的同時檢驗，而在實際的檢驗過程中可以根據(jù)產(chǎn)品的色澤通過感官確定其著色劑檢驗項目。當(dāng)前，市場所售的飲料中添加檸檬黃、日落黃的占多數(shù)，因而，在實際檢驗中可以運用本法進行檢驗。GB/T 5009.35-2003規(guī)定的方法需要用到配置梯度洗脫裝置的液相色譜，有些檢驗機構(gòu)尚缺乏此硬件設(shè)備，本方法的提出可以較好地解決這一問題。

[1]GB/T 5009.35-2003，食品中合成著色劑的測定[S].