半胱胺脂質體對梅花鹿增重及血液生長抑素、生長激素含量的影響*

赫俊峰，劉應竹，李海軍，仲維宇

（1.黑龍江省科學院自然與生態研究所，哈爾濱，150040；2.大興安嶺興安鹿業有限公司，加格達奇，165023）

生長抑素主要是由下丘腦釋放的肽類激素，其生理作用是抑制垂體前葉的生長激素的釋放。脂質體是近年來研究較多一種定向藥物載體，是靶向給藥物系統的一種新劑型。脂質體具有類似生物膜的結構，易于透過細胞壁而進入血液循環。而且脂質體具有靶向性及緩釋效果，沒有免疫原性［1～2］。用于藥物可以減少用量，延長藥效。半胱胺脂質體能降低動物中樞神經系統及外周組織生長抑素（SS）的免疫活性，提高生長激素（GH）分泌的基線水平，并且CS的作用呈時間可逆轉和劑量依賴性［3］。本研究根據CS抑制SS，促進GH分泌的生物學作用，用脂質體技術來制備半胱胺脂質體，在幼梅花鹿上試驗，分析不同劑量半胱胺脂質體對幼梅花鹿增重、成活率、飼料表觀消化率及血液SS，GH含量的影響，以降低幼梅花鹿血液及胃腸道SS含量，促進其生長，同時提高飼料轉化率，減少飼養成本，提高經濟效益。

1 材料與方法

1.1 實驗動物及分組設計

該研究于2008年至2009年在黑龍江省大興安嶺新林區興安鹿業有限公司進行，該公司現擁有優良梅花鹿和馬鹿5000余頭，每年梅花鹿產仔700～1000頭，完全能滿足本次實驗動物的需要。本次試驗選擇出生后體質健康的梅花鹿120頭作為試驗動物，將120 頭 60 日齡梅花鹿隨機分為 4 組（CS0、CS100、CS150、CS200），每組30頭。按照CS脂質體不同劑量依次為0、100、150、200mg/kg體重飼喂4個組。間隔一天飼喂CS脂質體1次，實驗期為120d。

1.2 試驗材料

半胱胺，膽固醇：購自sigma公司，粉粒狀大豆磷脂（PC：10%～25%）：黑龍江前進油脂廠，半胱胺脂質體：自制（按大豆磷脂：膽固醇：半胱胺=15:3:1.8（質量比），用逆向蒸發法制備半胱胺脂質體，包封率為24.6%。

1.3 基礎飼料的組成

精飼料在當地自行配制，試驗期內每天現用現配，按時、按量添加半胱胺脂質體，料型采用粉型。粗飼料冬天飼喂干羊草、豆皮和青儲飼料，夏天喂當地青草和一些青樹葉。精飼料冬夏基本不變，其配方及成分比例見表1。

表1 幼梅花鹿精飼料配方及所占百分比Table 1 The fine fodder formulation for sika deer

1.4 血液樣品采集及指標測定

試驗至180日齡時空腹稱重，并從耳朵靜脈采血，將分離的血清置-20℃冰箱保存待測。血液SS和GH含量用放免法測定，SS藥盒由上海第二軍醫大學神經生物學研究室提供，GH藥盒為本次研究人員自制的pGH藥盒，已作倍比稀釋實驗，有相關性。為排除性別、疾病及死亡鹿對結果的干擾，每組中發病及死亡梅花鹿資料不作統計，故論文中出現了實驗開始與結束時梅花鹿數量的不相等。

1.5 鈣、磷及粗蛋白測定

用凱氏定氮法測定飼料樣及糞樣中粗蛋白質含量；用KMnO4法測定飼料樣及糞中鈣的含量；用鉬藍法721分光光度計測定飼料樣及糞樣中磷的含量。

1.6 數據處理

試驗數據采用Excel和SPSS進行統計和處理，試驗結果采用方差分析方法進行統計分析及最小顯著極差法進行多重比較。

2 結果與分析

表2 半胱胺脂質體對幼梅花鹿增重的影響Table 2 The effect of liposome-cysteamine on the body weight gain of sika deer

2.1 幼梅花鹿增重的影響

通過2個生物學周期的試驗研究，半胱胺脂質體對幼梅花鹿體增重影響顯著（表2），由表2可知，CS100組凈增重比對照組提高48.3%（P＜0.05），而其它劑量組增重無明顯變化。

2.2 幼梅花鹿血液SS和GH含量的影響

表3 半胱胺脂質體對幼梅花鹿血液SS和GH含量的影響Table 3 The effect of liposome-cysteamine on the content of SS and GH in the blood of sika deer

血液SS的放免測定結果表明，與對照組相比，CS100、CS150、CS200組的 SS含量分別下降 69.6%（P＜0.05）、75.4%（P＜0.025） 和 75.8%（P＜0.01），但 GH 水平只在CS100組有明顯升高（P＜0.05），其它劑量組無明顯變化（表 3）。

2.3 半胱胺脂質體對幼梅花鹿鈣、磷、粗蛋白表觀消化率的影響

在測定時,分別記錄每個組幼梅花鹿每日平均采食量和平均排糞量,再分別計算其中各養份的含量,并折成干物質，算出具體含量，最后按下列公式算出表觀消化率，并進行統計學處理。

表觀消化率=（食入該養分的質量—糞中該養分的質量）/食入該養分的質量

表4 鈣、磷、粗蛋白的表觀消化率比較Table 4 The apparent digestibility of calcium,phosphorus and crude protein

從表4鈣、磷、粗蛋白的表觀消化率比較一覽表中可以看出，在各個組中，CS100組的效果明顯好于對照組，CS150和CS200組差別不明顯。CS100對幼梅花鹿鈣、磷、粗蛋白表觀消化率影響的方差分析結果達到了顯著的水平（P＜0.05）（與對照組相比）。

2.4 幼梅花鹿成活率的比較

試驗120d后，對4個組的梅花鹿成活率進行統計，CS0（對照）成活率為86.7%，CS100的成活率為100%，CS150和CS200的成活率分別為90%、93.3%。CS100組梅花鹿的成活率最好，達到了100%，這與飼喂半胱胺脂質后提高了梅花鹿的消化率，也提高了自身的抵抗力和免疫力有關，所以發病率低，成活率高。

3 討論

一般認為SS抑制垂體前葉GH的釋放，而GH又是促進動物生長的關鍵激素。Lassiter CA等［4］報道，大鼠紋狀體局部注射不同劑量 CS（0，7.5，15，30，50，100mg），結果以30mg劑量所致的SS含量下降最明顯。因為SS抑制垂體GH的釋放，有人又研究了CS對GH分泌的影響，Millard等［5］報道，皮下注射CS改變了大鼠GH的分泌模式，當注射CS300 mg/kg時，血漿GH水平在給CS后立即下降，以后略微回升，但分泌缺乏峰和谷；當90mg/kg時，GH分泌有明顯的峰和谷，基線水平抬高；而30mg/kg對GH分泌無明顯影響。在本次試驗中，幼梅花鹿飼喂不同劑量 CS（100、150、200mg/kg體重），SS含量比對照分別下降 69.6%、75.4%和75.8%，GH水平僅在CS100組明顯升高。這些結果與上述報道基本一致，所以CS的作用表現在劑量上具有依賴性。在超過150mg/kg體重劑量后，即使加大CS的飼喂濃度，SS含量也不呈繼續下降趨勢，并且盡管CS150和CS200組的SS含量低于CS100組，但GH水平的升高僅發生在CS100組。這些可能是由于下丘腦SS與生長激素釋放因子（GRF）之間的超短反饋或垂體GH的短環負反饋所致的GRF分泌減少所致。

SS除分布于中樞神經系統外，還廣泛存在于消化器官中，抑制其消化吸收機能［6］。CS通過降低消化道SS含量，加強營養物的消化吸收，從而提高飼料轉化率，促進幼梅花鹿生長和發育。CS能明顯降低梅花鹿消化道的SS含量，飼喂半胱胺脂質體（100mg/kg體重）能顯著提高鈣、磷和粗蛋白的表觀消化率。

總之，半胱胺脂質體拌于幼梅花鹿飼料內飼喂，間隔一天一次，使用方便，成本低。以降低水平SS水平，促進動物生長的方法，有希望發展成為通過神經內分泌途徑調控生長的一項生物技術在畜牧生產中推廣應用，將有良好的經濟效益。

［1］王艷玲，陳偉華.不同劑量半胱胺對肉用仔雞增重及血液生長抑素、生長激素含量的影響［J］.中國畜牧雜志，1997，4：11～ 13.

［2］林玲，韓正康.半脆胺對生長動物生長速度和有關激索水平的影響［C］//第十八屆中國生理學大會學術論文摘要匯編.上海:生理學通訊增刊，286～287.

［3］趙世臻.養鹿文化薈萃［M］.長春:吉林人民出版社,2001.553～586.

［4］LASSITER C A，FRIES G F，HUFFMAN C F，et a1.Effect of pepsin on the growth and health of young dairy Ca1ves fed Varies milk-replacer rations［J］.Journal ofDairyScience,1959（42）：666～670.

［5］MILLARD，S R EICH LIN，A New Feed Additive-Cysteamine&Mechanism and Its Effects on Animal［J］.Endocrinology，1981，109:2255～2257.

［6］王艷玲、韓正康.半胱胺對妊娠大鼠乳腺發育及血液生長抑素生長激素含量的影響［J］.南京農業大學學報，1993，16（增刊）:5～8.