李延強
急、慢性活動性肝炎患者的血液中含有肝炎病毒,如果不徹底清除手機上被污染的肝炎病毒,手機就可能成為肝炎的傳染源。
為了解由此引起的乙型肝炎病毒(HBV)感染的可能性,我們進行了相關調查及實驗,現將結果報道如下。
1.1.1 2006至2008年在同一城市中隨機抽取具有口腔門診的三級醫院、二級醫院、一級醫院各5所,現場調查記錄口腔門診中目前采用 的手機消毒與滅菌方式。每所醫院隨機抽取1個診室內用于修復、牙周治療、牙體及牙髓治療后污染的手機。隨機抽取診室內消毒與滅菌后、在有效期內、使用前的手機。
1.1.2 含鴨乙型肝炎病毒(DHBV)的上海麻鴨血清,核酸雜交DHBV DNA陽性(+++),-70℃保存,由中國醫學科學院醫藥生物技術研究所病毒室提供。梅里斯區種鴨場動物飼養場1日齡鴨,DHBV DNA檢測均為陰性。安徽廬江鴨DHBVLJ76株全基因克隆質粒(DHBV DNA探針)由中國醫學科學院醫藥生物技術研究所提供。HBsAg ELISA檢測試劑盒為北京四環生物工程有限公司產品。酶標儀:BIO-RAD 450型、DG3022型。
1.2.1 手機HBV污染情況檢測
用BIO-RAD 450型酶標儀ELISA方法檢測每支手機洗脫液中HBsAg抗原性。檢測結果:S/N≥2.1判斷為陽性。通過HBsAg抗原性存在與否間接判斷HBV污染情況。
1.2.2 手機DHBV污染情況
用DHBV DNA強陽性鴨血清201滴染手機頂端,將手機37℃恒溫干燥30min。將手機頂端浸沒于2mL無菌PBS液中,振蕩洗脫40s。將1/2份洗脫液直接進行DHBV DNA水平檢測,剩余1/2洗脫液分為3等份,每份經脛靜脈注射傳染鴨,雛鴨體溫為(39±0.5)℃。本研究中共用DHBV DNA檢測陰性的7支手機洗脫液接種7組鴨,每組3只雛鴨。轉染后10d取血清檢測DHBV DNA水平。將樣本點膜,用32P標記DHBV DNA探針進行直接斑點雜交,放射自顯影膜片斑點,用DG3022型酶標儀測定吸光度(A值,λ:490nm),以雜交斑點A值作為DHBV DNA測定水平。取每組3只雛鴨血清DHBV DNA的平均A值作為該組結果。陽性對照組為DHBV DNA強陽性鴨血清。無菌PBS為陰性對照。
為了解近年來手機消毒與滅菌方式的變化情況,2006至2008年,對口腔醫療機構手機消毒與滅菌方式進行了3次調查,結果顯示,采用滅菌方式處理使用后手機的比例顯著上升,尤其是采用壓力蒸汽滅菌的比例上升明顯(P<0.01),采用擦拭消毒法的比例顯著下降(P<0.01),結果見表1。

表1 手機消毒與滅菌處理方式的變化情況
隨機抽取使用后未經過任何處理的手機121支,檢測其洗脫液中HBsAg抗原性,S/N≥2.1的僅有2件。抽取的手機(使用后),無論是用于修復,還是用于牙周、牙體及牙髓治療,均存在嚴重的血液污染現象。檢測結果顯示,使用后的手機存在HBsAg污染,但是污染率遠遠低于文獻報道的結果。
檢測經壓力蒸汽滅菌、消毒劑浸泡、表面擦拭消毒等方式處理后的784支手機洗脫液中HBsAg的抗原性,結果顯示,S/N均<2.1,見表2。

表2 不同消毒滅菌方法處理后手機洗脫液中HBsAg的抗原性
HBsAg陽性對照平均S/N值范圍為208.0~244.1,HBsAg陰性對照平均A值范圍為0.003~0.020,試劑盒靈敏度:1g/L
經DHBV DNA強陽性鴨血清污染的手機,37℃恒溫干燥處理30min后,置無菌PBS液中振蕩洗脫40s。對每支手機的1/2洗脫液直接進行DHBV DNA斑點雜交檢測,結果均為陰性;將剩余的1/2洗脫液再3等份后分別轉染3只鴨,在轉染后10d取血清進行DHBV DNA斑點雜交檢測,結果均為陽性,3組鴨血清平均A值超過陽性對照組A值,說明經過鴨體內復制后,病毒含量增加,結果見表3。

表3 污染手機洗脫液中DHBVDNA檢測結果
HBV以血液傳播為主。在臨床上,HBV主要通過被體液污染的診療器械傳播??谇豢破餍刁w液污染機會較多、程度較嚴重,且由于手機的結構特殊,滅菌難度相對較大,因此,口腔科屬于醫源性感染危險性較高的科室之一[1]。保證口腔器械臨床使用的安全性,預防HBV感染是口腔臨床醫學工作的重點之一。
我們對不同規模的口腔醫療機構目前設備配備情況進行了相關調查。結果顯示,口腔專科醫院的器械數量能夠滿足消毒與滅菌時器械周轉的基本需要;綜合醫院口腔門診、口腔科及口腔診所,治療臺及手機的數量隨口腔診室規模的大小,在配備數量上相差較大。
手機的消毒與滅菌是控制醫源性感染的關鍵因素之一。目前,歐美發達國家中90%~95%使用壓力蒸汽滅菌法對手機進行滅菌。為此,我們于2006年開始對某市所有口腔醫療機構開展醫院感染專業知識、消毒與滅菌技術培訓,并對培訓前后口腔醫療機構手機消毒與滅菌方式進行調查。結果表明,采用壓力蒸汽滅菌法的比例顯著上升,從2008年的27.06%上升至2008年的84.51%,接近歐美發達國家水平;采取擦拭消毒的比例從2006年的60%以上,下降到2008年的10%左右。這一結果說明,專業技術培訓在預防控制醫院感染工作中具有非常重要的作用。
采用ELISA方法對手機是否存在HBsAg進行檢測,結果表明,手機上唾液、血液等體液污染極為嚴重,但對121支污染的手機檢測結果中,僅有2支HBsAg陽性。即使是采用表面擦拭法處理后、手機腔隙內并未得到有效處理的手機,其機頭洗脫液HBsAg檢測仍為陰性。這些檢測數據也正是目前一些口腔醫療機構采用表面擦拭方法處理污染手機的理由及依據。
采用DHBV進行實驗,用DHBV人工污染手機后,用其洗脫液轉染鴨。結果顯示,將DHBV DNA檢測陰性的手機洗脫液接種1日齡鴨,7組中有6組A值超過陰性對照,其中3組A值超過轉染前血清的A值。結果表明,在污染劑量低于目前檢測方法可檢出的最低劑量下限值的情況下,即常規檢測結果陰性的情況下,并不能排除感染的可能性。污染劑量盡管很低,但感染機會仍然存在[2-4]。
壓力蒸汽滅菌可殺滅一切活的微生物,包括抗性最強的細菌芽孢;能夠完全滅活各類病毒,包括HBV。因此,預防控制醫源性HBV感染的有效手段是對所有接觸破損黏膜或進入無菌組織的口腔器械進行滅菌處理,目前在我國首選的滅菌方式是壓力蒸汽滅菌。
[1]陳蘭羽,章曉鷹,陳建杰.HLA復合體與乙型肝炎病毒感染預后及治療關系的研究進展[J].國外醫學流行病學傳染病學分冊,2004,31:37-39.
[2]鄧小虹,孫正,蘇靜.牙科手機消毒與滅菌現狀調查[J].中華預防醫學雜志,2004,38:365-368.
[3]陳智.乙型肝炎病毒cccDNA研究現狀[J].中華傳染病學雜志,2003,21:8-10.
[4]鄧小虹,武迎宏,羅薇,等.口腔器械滅菌方法探討[J].中華醫院感染學雜志,2003,13:34-37.