脫毒草莓苗田間繁育技術

郭正兵，崔 香

(江蘇農林職業技術學院，江蘇 句容 212400)

草莓營養豐富，口感好，老少皆宜，市場前景廣闊，栽培面積不斷擴大。然而，草莓病毒病的危害可使草莓減產30% ～80%［1］，我國因草莓病毒病每年減產35萬t，直接經濟損失30億元［2］。世界上已知的草莓病毒有20多種，我國常見的有4種，即草莓輕型黃邊病毒 (SMYEV)、草莓斑駁病毒 (SMDV)、草莓皺縮病毒 (SCrV)、草莓鑲脈病毒 (SVBV)，我國草莓主栽區均存在上述4種病毒［3］。近年來，長江流域草莓植株嚴重退化主要是病毒引起，大面積植株感染率50%［4］。防治草莓病毒病，提高草莓產量，主要靠應用無病毒的草莓苗。目前，美國、日本等發達國家全部使用無病毒的草莓苗。要使我國草莓生產穩步發展，生產無病毒的草莓苗非常重要。

目前，雖然尚未找到根治草莓病毒病的有效藥物，但是利用組織培養技術可以實現草莓脫毒苗的快繁生產。近幾年來這一領域的研究已經有較多報道，也建立了一些重要草莓品種的生產技術體系［5］。但在脫毒苗生產及組培快繁方面，積累的技術要點更多的是屬于經驗性的，常常因為草莓品種或研究報道的不同而存在較大差異。為此，筆者主要就不同品種草莓脫毒試管苗移栽訓化的有關影響因素及田間繁殖表現進行了探討，旨在為最終建立簡易高效的草莓脫毒苗的繁育體系，為進一步開展相關研究工作奠定一定基礎，現將研究結果報道如下。

1 材料與方法

1.1 供試材料

試驗于2008－2009年在江蘇農林職業技術學院北校區草莓生產基地進行。當地屬于北亞熱帶南部季風氣候區，溫、光、水協調，四季分明。年平均氣溫15.1℃，平均年降水量1 028.6 mm，年日照時數2 098.7 h，無霜期225 d。土壤屬于寧鎮丘陵下蜀黃土母質發育的馬肝土，0～20 cm土層有機質含量 16.5 g·kg－1，全氮含量 1.2 g·kg－1，速效磷 8 mg·kg－1，速效鉀 70 mg·kg－1，土壤 pH值6.5。

供試草莓品種為江蘇寧鎮地區主栽培品種:明寶、豐香和紅頰，均為江蘇農林職業技術學院農藝系組織培養實驗室提供。

1.2 試管苗的煉苗與移栽

初步煉苗。將培養瓶上的扎口繩或皮筋松開，只去掉外層的聚丙烯膜，保留內層的白紙，不要將瓶口包扎物全部去掉，因為此時的草莓組培苗莖葉等組織器官表面還沒有長出角質層，若暴露于空氣中，極易因失水導致死亡。角質層的生長是一個循序漸進的過程，讓組培苗初步接觸空氣，可誘導植株長出角質層。2～3 d后移去瓶口包扎物，讓組培苗充分接觸空氣，再過2～3 d后，組培苗對外界環境已逐漸適應，且培養基已開始長出菌類，此時進行組培苗出瓶煉苗移栽。

小心地用鑷子，最好用竹木鑷子，或在鑷子尖部套上橡膠管，夾持組培苗，將苗從瓶中移出，用流水慢慢沖凈植株根部的培養基，注意切勿傷及根部的根毛，更不能用手搓動根部。培養基一定要用流水沖洗干凈，否則，易引起根部病菌感染，影響脫毒苗的成活率［5－8］。

移栽。將3個品種的脫毒試管苗 (生長勢良好，根系狀況相近)分別為2008年5月20日、8月1日和10月25日進行3次移栽于大棚內，每次移栽依據品種分3個小區，每個小區分別設置3種不同基質處理，園土∶泥碳∶河沙∶腐熟廄肥A 1.0∶1.0∶0.5∶0.5(常用復合配方之一)，B 0∶1.0∶0∶0.5(常用于園藝作物生產)，C 1.0∶0∶0∶0.5(常用于園藝作物生產)。3種配方基質在使用前均先采用50%多菌靈400倍液進行處理，3次重復。大棚遮蓋防蟲網，預防蚜蟲叮咬幼苗傳播病毒［9］，栽后加強管理。

1.3 脫毒二代苗的培育

2009年3月1日，對明寶、豐香、紅頰3個品種的一代苗進行選優，選取生長健壯苗 (3葉1心)作為繁育母株，按常規繁育方法進行大田繁殖，畦寬150 cm，定植于畦的中央。試驗依品種分3個小區，小區面積為667 m2，每小區內根據種苗種類進行分組，分脫毒苗和常規苗繁育組，定植株數為300株，其中脫毒苗200株，常規苗100株，株距為100 cm。對上述品種進行比較試驗。3個品種進行隔離繁殖，全程防蟲網覆蓋，各小區肥水管理水平一致。

2 結果與分析

2.1 不同移栽時期對試管苗成活率的影響

在沒有控溫設備的條件下，移栽時期是試管苗能否成活的關鍵因素之一。從表1可以看出，夏季移栽不利于試管苗成活。通過對1 800株試管苗的移栽試驗看出，剛剛移出的試管苗特別不耐25℃以上高溫。溫度在15～25℃之間移栽試管苗都可以有較高的成活率。

2.2 不同移栽基質對試管苗成活率的影響

從圖1可以看出，在基質A中3種試管苗成活率均較高，移栽成活率分別為:明寶91.0%;豐香88.1%;紅頰81.2%;基質C中試管苗成活率最低，其中紅頰品種只有38.1%。園土∶泥碳∶河沙∶腐熟廄肥1.0∶1.0∶0.5∶0.5為配方的基質不僅能透性較好，而且營養較為充分，適宜作本地區草莓試管苗的移栽基質。

表1 不同移栽期對試管苗成活率的影響

圖1 3種不同基質對試管苗成活率的影響

2.3 不同移栽基質對試管苗生長的影響

以豐香脫毒苗為例，在試管苗移栽6周后，調查不同基質對試管苗生長發育的影響。2008年6月1日調查結果 (表2)，豐香脫毒在基質A中表現最好，根系發達、葉大、色濃、植株高，葉片葉綠素含量最高，利于光合作用。在基質C中移栽苗生長發育狀況最差:葉小、色淡，葉綠素含量低，光合效率低。

表2 豐香脫毒苗在不同基質中的生長表現

2.4 同一基質不同品種試管苗生長發育的差異

以基質A為試驗基質，于第1次移栽 (4月20日)后第8周，即6月16日對每個品種隨機取樣20株，觀察、統計各品種的形態指標，比較各品種之間的差異。從表3看出3種試管苗移栽之后，植株生長表現出較大的差異:明寶表現最好，各形態指標增長率明顯高于另2個品種，紅頰表現較差，試管苗移栽后初期出現葉片發黃、枯萎的現象，后期草莓苗逐漸恢復，新長出的葉片濃綠，但影響了草莓苗的生長量，植株普遍表現弱小。

表3 不同品種試管苗的生長比較

2.5 無病毒二代苗的培育

2009年5月28日，在每個小區隨機抽樣50株，初步觀察3個品種的繁殖系數及對當地主要的病害白粉病和炭疽病的感染情況 (表4)。

表4 不同品種二代苗的田間表現

3個品種的繁殖能力存在較大差異:不論是脫毒苗還是常規苗，3個品種的繁殖系數均表現出一定的差異性:明寶和豐香品種的繁殖能力均較強，最強的是明寶品種，脫毒苗繁殖系數高達54倍，紅頰品種表現較差，常規苗的繁殖系數只有8倍。

脫毒苗和常規苗繁殖能力的差異:3個品種脫毒試管苗的繁殖系數均遠遠高于常規苗，分別是常規苗繁殖系數的2.5、2.6和3.2倍。紅頰品種在此方面的差異性表現較為明顯。

3個品種田間抗病性差異:明寶和豐香抗病性較強，尤其是脫毒苗，幾乎不感染病害，常規苗只對白粉病輕微感染，紅頰種苗在此方面差異最大，脫毒苗只對炭疽病有輕微感染，而常規苗卻嚴重感染炭疽病，中度感染白粉病。

3 小結與討論

試管苗的煉苗時間以春夏季 (5－6月)和秋季 (9－10月)最為適宜，此時外界溫度和濕度均較理想，成活率高，管理方便，煉苗后可接著繁殖一代苗，達到生長快，匍匐莖抽生多，一代苗繁殖量大，能在每2年春季提供更多的二代苗繁育母苗。

對于草莓試管苗移栽技術研究已有很多報道，但對于移栽基質的選擇，當前國內外一致認為草炭土、蛭石、珍珠巖等是蔬菜花卉理想的育苗基質［1］。本試驗為了方便技術的推廣應用，用最為常見的泥炭、泥土、河沙和腐熟廄肥配成不同的基質。結果表明，只要保證試管苗移栽的溫度和濕度，將上述4種成份按照一定的比例進行組合，均可保證試管苗移栽的成活率。泥炭富含大量營養元素，尤其含有高濃度的速效氮，由于草莓試管苗馴化比較脆弱，對基質溶液中高濃度離子反應敏感，易造成肥害，生長受到影響;而純泥土的肥力又不足，試管苗的生長差，故將園土和泥炭按1∶1的比例混合，再加0.5份的河沙 (提高通透性)和0.5份的腐熟廄肥 (提高肥力)，極大地提高了試管苗的移栽成活率，并能提高試管苗的質量。

組織脫毒苗的繁殖系數均遠遠高于常規苗，二代苗的抗病能力也顯著提高，但在供試的3個品種中，紅頰對炭疽病較為敏感，抗性較差，本試驗中對此品種沒有采取避雨繁殖育苗，故在生產過程中可針對性地采取一些保護措施，以提高其種苗的繁殖系數及抗病能力。

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