環丙沙星氯化鈉注射液細菌內毒素檢查法的研究

帖青松

（江蘇省建湖縣人民醫院，江蘇建湖 224700）

環丙沙星氯化鈉注射液細菌內毒素檢查法的研究

帖青松

（江蘇省建湖縣人民醫院，江蘇建湖 224700）

目的：探討環丙沙星氯化鈉注射液應用于細菌內毒素檢查法的可行性。方法：制定實驗，不同靈敏度的鱟試劑對環丙沙星氯化鈉注射液進行干擾試驗，將細菌內毒素檢查法和熱原檢查法結果進行比較。結果：環丙沙星氯化鈉注射液液稀釋2倍后,對細菌內毒素檢查無干擾作用，細菌內毒素檢查法和熱原檢查法經比較完全相符。結論：通過系列實驗，說明環丙沙星氯化鈉注射液細菌內毒素檢查法可替代熱原檢查法。

環丙沙星氯化鈉注射液；細菌內毒素檢查法

在制藥工業中，為進一步擴大細菌內毒素檢查法應用范圍，筆者探討了環丙沙星氯化鈉注射液應用細菌內毒素檢查法的可能性。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

細菌內毒素工作標準品（規格60 Eu/支，批號061101），中國藥品生物制品檢定所，鱟試劑（靈敏度0.25 Eu/ml，0.1 ml/支，批號 051009），鱟試劑（靈敏度 0.125 Eu/ml，0.1 ml/支，批號060303），細菌內毒素檢查用水（BET 用水）（規格 10 ml，批號060202）均為廈門鱟試劑廠產品。環丙沙星氯化鈉注射液（按環 丙 沙 星 計 100 ml∶0.2 g， 批 號 060702、060713、060908、060921、061125、061130、061208、061216、070124、070228） 均為長江藥業生產。電熱恒溫水浴鍋，型號H.H.S（上海醫療器械三廠），旋渦混合器,型號XW-80（上海醫科大學儀器廠），電熱恒干燥箱，型號HX.GZ-550B（連云港醫療器械設備廠），試管架，注射器，試管等。實驗前玻璃器皿均經250干烤90min。

1.2 實驗方法

1.2.1 細菌內毒素限值 細菌內毒素限值（L）的確定根據公式L=K/M[1]。其中K為按規定的給藥途經，人用每公斤體重每小時最大可接受的內毒素劑量，以EU/（kg·h）表示，M 為人用每公斤體重每小時接受環丙沙星氯化鈉注射液的最大劑量，以 ml/（kg·h）表示。 注射劑 K=5 EU/（kg·h）。 參考本品臨床的用法用量可知M=400 ml/60（kg·h）。因此L=K/M=5×60/400=0.75 EU/ml。其值為理論值，考慮到本品為大輸液（100 ml/瓶）臨床多為聯合配伍用藥且經過實驗驗證，將L值定為小于0.5 EU/ml有一定的安全系數。

1.2.2 最小不干擾稀釋倍數的測定 取鱟試劑靈敏度0.125 EU/ml和細菌內毒素國家工作標準品用BET水稀釋至0.25 EU/ml取樣品（批號 060702）用0.125 EU/ml靈敏度的鱟試劑進行試驗，原液、1∶2及1∶4稀釋液均無干擾，即本品最小不干擾稀釋倍數為1。

1.2.3 鱟試劑靈敏度 鱟試劑靈敏度的復核將細菌內毒素國家工作標準品用 BET用水稀釋成2.00、1.00、0.50、0.25λ系列濃度，按細菌內毒素檢查法[1]操作，結果見干擾試驗。

1.2.4 干擾試驗 取廈門鱟試劑廠的鱟試劑和細菌內毒素國家工作標準品，分別用BET水、2倍稀釋液稀釋細菌內毒素至 2.00、1.00、0.50 和 0.25λ 依法操作，樣品 A（Es內毒素標準溶液）、樣品B（Et060702稀釋的內毒素標準溶液）、樣品C（Et060908稀釋的內毒素標準溶液）、樣品D（Et060921稀釋的內毒素標準溶液），按下面的公式計算[1]:Es或Et=antilg[（X1+X2+X3+X4）/4]，X1、 X2、 X3 、X4 為反應終點濃度的對數值 （lg）， 結果 Es=0.25 EU/ml，Es 在 0.125～0.500 EU/ml之間，表明該鱟試劑靈敏度符合規定。 Et（060702）=0.354 EU/ml，Et（060908）=0.297 EU/ml， Et （060921）=0.354 EU/ml 均在0.5～2.0 Es 之間，即 0.125～0.500 EU/ml之間，說明供試品在稀釋倍數為2倍時，環丙沙星氯化鈉注射液對細菌內毒素檢查無干擾作用。

2 結果

環丙沙星氯化鈉注射液液稀釋2倍后，對細菌內毒素檢查無干擾作用，細菌內毒素檢查法和熱原檢查法經比較完全相符。樣品原液、1∶2及1∶4稀釋液均無干擾，臨床可以有效控制質量和保證用藥安全。

3 討論

一種藥品能否應用細菌內毒素檢查法，首先通過干擾試驗，排除該藥品本身對細菌內毒素檢查的干擾作用[2-3]。其次確定出既克服干擾因素，又符合該藥品細菌內毒素限值的有效濃度范圍。為確證供試品在某一濃度對內毒素和鱟試劑的凝膠反應不存在干擾，本試驗分別對3個批號的供試品進行相同濃度的重復試驗。結果在本試驗條件下，樣品原液、1∶2及1∶4稀釋液均無干擾，表明本試驗可以有效控制其質量和保證臨床用藥安全有效。干擾試驗進一步證明樣品在1∶2稀釋液時，對細菌內毒素檢查無干擾[4-6]。本試驗對10批熱原檢查符合規定的環丙沙星氯化鈉注射液進行細菌內毒素檢查，細菌內毒素檢查法和熱原檢查法檢查相符率為100%，說明環丙沙星氯化鈉注射液細菌內毒素檢查法可替代熱原檢查法。由于細菌內毒素檢查法具有快捷、簡便、靈敏的特點，大大地節約了資源、時間，產生了良好的社會效益和經濟效益。

[1]國家藥典委員會編.中國藥典[S].二部附錄XIE.北京:化學工業出版社,2005:85-87.

[2]禹海英,孫麗娜.乳酸環丙沙星氯化鈉注射液細菌內毒素鱟試劑檢查法[J].中國醫藥導報,2006,3(26):154.

[3]曾曉紅,鄧慧英.注射用鹽酸環丙沙星細菌內毒素檢查法建立及方法學研究[J].海峽藥學,2009,21(12):85-86.

[4]范能全,彭蘭.細菌內毒素的檢查及干擾因素的排除[J].中國藥師,2007,10(9):915-916.

[5]林郁,焦志鐵,沈素琴.細菌內毒素檢查方法綜述[J].時珍國醫國藥,2006,17(8):1575-1576.

[6]馮正錄,陳慧玲,呂文柏.細菌內毒素檢查異常結果分析及處理方法[J].中國藥師,2006,9(6):568-569.

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1674-4721（2010）10（a）-182-01

2010-07-05）