淺談尿沉渣檢查

賈凌筱

伴隨著檢驗醫學的迅速發展，檢驗技術的日異更新，各種各樣的尿液分析儀越來越受到各醫院的普遍應用。現綜述如下。

1 尿液檢查方法

隨著尿液檢查方法的規范化、標準化，尿有形成分定量法測定已被推廣，目前最常用的方法主要有兩種，一種是以顯微鏡為基礎的形態學檢驗法，另一種是以流式細胞術為原理的流式細胞計數法。DiaSys尿沉渣分析儀按照經典的顯微鏡鏡檢方法的流程來設計，工作時通過低倍鏡以多于人工鏡檢檢查量進行采樣，然后以低倍鏡抓取目標定位后轉高倍鏡進行計數，計算機對其結果進行處理和換算。

2 尿沉渣手工制片鏡檢

2.1 直接鏡檢法 將尿液充分混勻，取其中1滴尿直接涂于載玻片上，依據各種有形成分的形態特點，用顯微鏡觀察作出報告。

2.2 玻片畫框法 用標定好的滴管加混勻尿2滴涂滿蠟筆畫好的25.2 mm×25.2 mm框內，靜止3 min后累計20個高倍視野細胞數，結果以每微升細胞數報告。細胞數/μl=T×1/20×A/B×1/V。式中T=細胞累計數，20=所觀察的視野數，A=標本分布面積，B=高倍視野面積=(高倍視野直徑/2)2.π，V=標本用量(μl)，高倍視野直徑=目鏡中光欄直徑/目鏡放大倍數，光欄直徑可用千分尺測出。

2.3 自然沉降法 將尿液在室溫下放置一定時間(15～30 min)后，移去上層的尿液，保留底層大約0.2 ml左右，然后混勻，取其中1滴沉淀于載玻片上，鏡檢同直接鏡檢法。

2.4 離心沉淀法 尿液10 ml離心5 min，相對離心力(RCF)為400，棄上清留沉渣尿量0.2 ml混勻，吸取20 μl，滴在玻片上用18 mm×18 mm蓋片覆蓋，先用10×10低倍鏡觀察全片，再用10×40高倍鏡仔細觀察，檢查細胞至少10個視野，檢查管型至少20個低倍視野，報告以高倍視野所見最低至最高數字表示。建議國內逐步以每微升細胞數報告。

2.5 染色法 包括濕潤染色法及特定成分染色法。

2.6 特殊顯微鏡檢查

2.6.1 相差顯微鏡法 相差顯微鏡又稱相襯顯微鏡，是以光的衍射和干涉現象照射標本，產生明暗不同的反差識別，有助于增強透明與半透明的有形成分的輪廓，尤其是透明管型、不典型紅細胞、血小板的辨別。

2.6.2 干涉顯微鏡法 在不同位相時，當兩種相同顏色的光波相遇時，其亮度發生增強或減弱的變化，從而提高物體的清晰度，可觀察到細胞或管型的三維空間結構。

2.6.3 偏振光顯微鏡法 利用光的偏振特性對光有雙折射性的物體進行鑒別，可觀察活細胞的內含物、神經纖維、植物纖維的結構細節和動物肌肉纖維等。可分析變性過程，觀察到細胞的死活:正常細胞對光偏振呈左旋，腫瘤細胞多數呈右旋，可顯示鹽類結晶在自然光下見不到的精細結構。

2.6.4 透射電鏡法 利用電子束作為“照明波源”可明顯提高分辨率，將尿沉渣標本切成超薄片在電子顯微鏡下觀察，可準確分辨出細菌管型、白色念珠菌管型、血小板管型、粗顆粒管型和細顆粒管型等。

3 尿沉渣定量計數板法

取一定量(10 ml)尿液置特制的離心管內，在規定離心時間和轉速的條件下離心沉淀，移去上清尿液，保留一定量的尿沉淀物，取1滴滴入計數板內，在顯微鏡下計數，然后換算成一定體積(1/μl)內尿有形成分的含量。

3.1 Li-Ucc型尿沉渣計數板 計算室為正方形邊長9 mm，池深0.125 mm，混勻尿滴入池內計數規定區結果除以5，細胞少時計數全室結果除以10，即為每微升細胞數。

3.2 牛鮑計數板法 將混勻尿充池，計數9大格細胞數×10÷9，即為每微升細胞數。

3.3 FR定量板法 混勻尿10 ml于Biostd離心管內，經1 500 r/min離心5 min，傾去上清余0.25 ml沉渣即留在管底縮小區內，將沉渣混勻滴入FR板內，計數10大格即得每微升細胞數。每板10人份一次性使用，保濕，細胞形態及分布穩定。

4 干化學法

將試劑包含在纖維素中作為反應部分黏附在塑料支持片上干燥而成試紙帶，以鏡檢為標準半定量檢測尿中成分。1996年的推薦方法中確定，干化學檢驗只有符合下列四項要求才可以不作鏡檢:尿白細胞結果為陰性;紅細胞結果陰性;尿蛋白為陰性;亞硝酸鹽為陰性。來源于腎科標本不適合干化學篩選，應一律顯微鏡檢查。

5 尿沉渣自動化分析

尿沉渣分析自動化的研究由來己久，但難度較大。直到1986年才由美國國際遙控攝像系統有限公司研制生產了世界上第一臺高速攝像機式的尿沉渣自動分析儀。目前，尿沉渣分析儀主要有兩大類:基于尿沉渣鏡檢影像分析原理;基于尿沉渣流式細胞術和電阻抗檢測原理。影像式尿沉渣(或稱“工作站”)其檢測原理與人工顯微鏡檢查原理基本相似，都是直觀地觀察有形成分的形態，但須經過嚴格的定時、定速離心，而后留取定量的尿沉渣，由配套動力裝置將其轉移至顯微鏡載物臺上刻有標尺的流動樣品池內，通過頻閃光源燈、相聚光鏡、彩色攝像機等，在電腦顯示屏上得到清晰的尿沉渣畫面，再由操作者在屏幕上統計出各種有形成分的數目，由計算機自動換算成每微升單位的數據。同普通光學顯微鏡方法相比，其分析標準定量、視野清晰、速度快捷、準確度高。在全自動尿沉渣分析檢測分析中，應用流式細胞和電阻抗分析的原理:尿液中細胞等經熒光色素染色后，在鞘流液的作用下，形成單個、縱列細胞流，通過氬激光檢測區，儀器檢測熒光、散射光和電阻抗的變化;當儀器在捕獲了熒光強度Fl、前向熒光脈沖寬度Flw、前向散射光強度Fsc、前向散射光脈沖寬度Fscw、電阻抗信號后，綜合識別和計算得到了相應細胞的大小、長度、體積和染色質長度等資料，并做出紅細胞、白細胞、細菌、管型等的散射圖及定量報告。

［1］叢玉隆．血液學體液學檢驗與臨床釋疑．北京:人民軍醫出版社，2004，58:66-68．

［2］溫潔新，顧可梁，陳巧林，等．尿液有形成分三種檢測方法的對比分析．江西醫學檢驗，2005，23(2):125-126．