前S1抗原與丙氨酸氨基轉移酶聯合檢測診斷乙型肝炎病毒復制

賈 莉，部小霞，李建華，林貴高，鄢盛愷

（中日友好醫院 檢驗科，北京 100029）

前S1抗原與丙氨酸氨基轉移酶聯合檢測診斷乙型肝炎病毒復制

賈 莉，部小霞，李建華，林貴高，鄢盛愷

（中日友好醫院 檢驗科，北京 100029）

目的：探討前S1抗原與丙氨酸氨基轉移酶（ALT）在診斷乙型肝炎病毒復制中的臨床價值。方法：對150例乙型肝炎病毒s抗原（HBsAg）陽性的樣本分別進行血清前S1抗原、乙型肝炎病毒-脫氧核糖核酸（HBVDNA）和ALT的檢測，前S1抗原采用酶聯免疫吸附法，HBV-DNA采用實時熒光定量聚合酶鏈反應法，ALT采用全自動生化分析儀檢測。結果：150例樣本HBV-DNA均為陽性（≥103IU/ml），其中前S1抗原陽性116例，兩者符合率為77.3%。前S1抗原陽性的116例中95例（81.9%）表現為乙型肝炎病毒的高復制（HBV-DNA＞104IU/ml），同時51例ALT不升高的樣本中35例（68.6%）HBV-DNA＞104IU/ml。結論：前S1抗原是反映乙肝病毒復制及復制程度高低的指標，與血清ALT同時檢測可以指導臨床慢性乙型肝炎患者的定期復檢及療效判定。

乙型肝炎病毒；前S1抗原；病毒復制；乙型肝炎病毒-脫氧核糖核酸

Author's addressDepartment of Clinical Laboratory，China-Japan Friendship Hospital，Beijing 100029，China

對乙肝患者定期進行肝功能和乙肝病毒核酸（hepatitis B virus-deoxyribonucleic acid，HBVDNA）定量檢測對判斷患者治療效果及其預后有重要意義，尤其是HBV-DNA的定量檢測能直觀、準確地反映出病毒在人體內的復制情況。但由于HBV-DNA定量通常采用實時熒光定量聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction，PCR）的方法進行，存在著檢查成本較高、耗時較長、檢測過程容易受污染等缺點，在基層實驗室的推廣應用受到一定的限制。前S1抗原 （pre-S1 antigen，pre-S1 Ag）是乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）外膜蛋白的組成成分之一，由108或119個氨基酸殘基組成，其表面含有肝細胞受體，在HBV感染肝細胞和機體免疫應答方面起著重要作用。已有研究[1～5]報道前S1抗原可以反映乙肝病毒復制和傳染性的強弱，我們綜合分析了HBsAg陽性患者的血清前S1抗原、丙氨酸氨基轉移酶（alanine aminotransferase，ALT）和 HBV-DNA 的變化，對前S1抗原與ALT聯合檢測的臨床應用價值進行探討，以期能為慢性乙肝患者是否有必要開始治療、治療效果監測及預后判斷方面提供一個更經濟、快速、簡便的檢測指標。

1 對象與方法

1.1 研究對象

150份HBsAg陽性的樣本，來源于2009年4月～8月本院門診及住院患者空腹12h后的血清樣本，其中男84例，女66例，年齡19～81歲。

1.2 檢測方法

ALT采用RANDOX試劑速率法測定，質控品批號536UN，404UE，所用儀器為日立7600全自動生化分析儀，測定當日質控均合格（在±2SD之間），＜40IU/ml為正常參考范圍。

前S1抗原采用上海阿爾法生物技術有限公司試劑盒 （批號20090318），酶聯免疫吸附試驗（ELISA）檢測，用ANTHOS酶標儀測定OD值；每一批次實驗的陰性對照、陽性對照都必須滿足試劑盒要求，結果判斷嚴格按照試劑盒說明進行。

HBV-DNA采用中山大學達安基因股份有限公司試劑盒 （批號 2009004）、Roche公司Lightcycler熒光定量PCR儀用實時熒光PCR方法檢測。每批測試均設陰性對照和弱陽性、陽性質控且質控結果合格（在±2SD之間），由試劑盒提供的 4 個濃度的標準工作品（1×104、1×105、1×106、1×107IU/ml） 計算出各標本的濃度值，＜1×103IU/ml為陰性參考范圍，≥1×103IU/ml為陽性，每批測試的線性相關系數均在 0.99≤｜r｜≤1。

表1 150例HBV-DNA陽性樣本中pre-S1 Ag和ALT的檢測結果

表3 116例pre-S1 Ag陽性的樣本中ALT和HBV-DNA的檢測結果

2 結果

150例HBsAg陽性的樣本HBV-DNA均為陽性（≥103IU/ml），其中前S1抗原和ALT的檢測結果見表1。前S1抗原和ALT不同檢測結果下乙肝病毒的復制情況見表2。116例前S1抗原陽性的樣本中ALT和HBV-DNA的檢測結果見表3。

3 討論

臨床對慢性乙肝患者經常根據其轉氨酶的變化和乙肝核酸定量來判斷其療效及預后，因為ALT可反映肝細胞的損傷，核酸定量可直接反映病毒的復制情況。但ALT的升高不單純出現在由于病毒侵害造成的肝細胞受損的情況，其很容易受到諸多因素的影響，必須結合其它指標來判斷病毒的復制及患者的療效；基于PCR方法進行的核酸定量一般都費用較高，用時也較長，對實驗室的環境和設備要求較高，對于一些基層檢驗科室不太適合開展。血清前S1抗原測定方法簡單、快速、成本較低，通常是加上“乙肝五項”組合為“乙肝六項”，使臨床檢測更為方便。

表1示，150例HBV-DNA陽性（≥103IU/ml）的患者中，前S1抗原陽性的有116例，兩者有77.3%的符合率；表現為ALT增高且前S1抗原陽性的有65例，占43.3%，這些患者的病毒復制程度很高，其中92.3%的乙肝病毒載量＞104IU/ml（表2）。值得注意的是，在前S1抗原陽性的116例患者中51例（44%）并不表現為ALT的升高，但其中病毒高水平復制 （＞104IU/ml）者有 35例，占68.6%（表3）。說明有相當數量的HBsAg陽性的患者雖然其肝細胞受損尚不嚴重，ALT還表現為正常，但其體內乙肝病毒的復制仍存在，甚至是高載量的復制。提醒臨床醫生在患者ALT正常的情況下雖然可以不考慮干預治療，但其體內的高病毒復制要引起足夠重視。

表2 pre-S1 Ag和ALT不同檢測結果下乙肝病毒的復制情況

有學者報道[6]在用核苷類似物干預后的慢性乙肝患者中，其前S1抗原與HBV-DNA呈現出不一致的變化，本研究未對患者樣本進行詳細的病種及病程分組，相關的研究還有待進一步進行，但從本實驗結果中也看到在150例HBV-DNA陽性的患者中有34例（22.7%）是前S1抗原陰性的患者，所以若單獨從前S1抗原的結果判定病毒復制情況的話，顯然會有將近1/4的患者漏診；不過我們發現這部分患者中有15例（44.1%）表現出ALT 的升高（表 1），且高病毒復制（＞104IU/ml）的患者占66.7%（表2），分析可能是由于肝細胞早期損傷時ALT出現變化較早，前S1抗原的反應出現較晚，或是前S1抗原檢測方法的靈敏度所限造成，所以有必要同時進行ALT的檢測，同時檢測血清前S1抗原和ALT水平能幫助我們更好地分析患者體內病毒的復制情況。

HBV的 e抗原（HBeAg）與病毒 Dane顆粒、HBV-DNA具有伴隨關系。但是，當HBV的前核心區發生突變時，HBeAg無法表達，表現為血清HBeAg或抗HBe測定陰性，而前 S1抗原作為病毒復制指標，能彌補HBeAg變異造成的誤診，是較 HBeAg 更為敏感的病毒復制指標[3，7，8]。 本研究結果前S1抗原與HBV-DNA的陽性符合率為77.3%，這與文獻報道基本一致[8～10]，且其陽性者病毒復制程度大都較高，表明前S1抗原可以作為乙肝病毒感染和復制的一個很好的輔助指標；而且其檢測方法相對簡單、快速、經濟，比HBV-DNA更易在臨床尤其是在不具備定量PCR實驗室的醫院進行推廣，再結合血清ALT的檢測可在很大程度上為臨床提供患者體內病毒復制的基本情況，幫助判斷患者療效及預后，亦為長期治療的慢性乙肝患者節約了醫藥費，應得到臨床的足夠重視與應用。

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Clinical value of detection of pre-S1 antigen and alanine aminotransferase in patients with hepatitis Bvirus and the virus replication

JIA Li，BU Xiao-xia，LI Jian-hua，et al//Journal of China-Japan Friendship Hospital，2010 Feb，24（1）：15-17

Objective：To investigate the clinical significance of pre-S1 antigen （pre-S1 Ag）of hepatitis B virus（HBV）and alanine aminotransferase （ALT）detection on the diagnosis of virus replication.Methods：Pre-S1 Ag，HBV-DNA and ALT of 150 serum samples，which HBsAg were positive，were detected by ELISA，real-time fluorescence polymerase chain reaction assay and auto-biochemical analysis respectively.Results：One hundred and sixteen samples were pre-S1 Ag positive in all samples and were HBV-DNA positive（≥103IU/ml），the coincident rate of pre-S1 Ag and HBV-DNA was 77.3%.Among the 116 pre-S1 Ag positive samples，95 of them （81.9%）had the higher level of HBV virus replication （HBV-DNA＞104IU/ml）.Fifty one samples had the common level of serum ALT，among them 35 samples were HBV-DNA＞104IU/ml.Conclusion：Pre-S1 Ag is a good indicator of HBV virus replication and the results which combined with serum ALT will guide the following up of chronic hepatitis B patients who need retest virus replication in a long time.

hepatitis B virus；pre-S1 antigen；virus replication；hepatitis B virus-deoxyribonucleic acid

R512.6+2；R446.61

A

1001-0025（2010）01-0015-03

10.3969/j.issn.1001-0025.2010.01.004

賈 莉（1969-），女，主管技師。

2009-12-14

2010-01-06