張 艷
(長沙市蔬菜科學研究所,湖南 長沙 410003)
激光誘發突變育種自20世紀70年代初在我國起步以來,在農業、園藝、遺傳育種、生物工程等方面獲得了廣泛的應用[1-2],激光作為誘變源,不但激光促進作物生長發育,提高產量和品質,也可誘變選育新品種和新的育種資源,縮短育種周期。激光輻照能打破種子休眠,提高發芽率、發芽勢,促進苗期生長,早熟高產,并提高植物對環境的適應能力[3],我國已培育出油菜、豆角、番茄等40多個新品種[4]。實踐證明,用不同波長,輻照功率密度和輻照劑量不同的激光照射作物種子,可產生種種不同的效應[5-7]。由于激光對蔬菜種子作用的研究多集中于種子,而對辣椒(Capsicum frutescans)萌動種子種胚的研究少有報到,筆者采用CO2激光對萌動種子的胚進行照射,觀察不同照射時間對不同辣椒品種生物學效應的影響,并對激光輻射誘變效應進行探討,以期為辣椒誘變育種遺傳基礎研究提供參考。
供試辣椒品種:伏地尖椒、河西牛角椒、東山光皮椒、潭陽泡椒和湘晚13號。
采用CO2激光器,功率為140 J,光束直徑10 mm對不同辣椒品種萌動種子胚進行照射處理。激光照射時,材料距光源8 cm,同一品種設5 s、10 s、15 s、30 s 4個處理,分別采用沒有照射的同一品種辣椒為對照,田間管理措施一致,對辣椒材料的植株生長狀況和開花結果等情況進行調查。
對4個處理分別進行激光照射5 s,伏地尖椒、河西牛角椒、東山光皮椒和湘晚13號出現了雙頭苗,雙頭苗百分率分別為5%、2%、1%、2%,其他處理未發現成活的雙頭苗。其中伏地尖椒出現的雙頭苗數最多,明顯高于其他品種。出現雙頭苗的原因是激光照射使材料的胚芽發生變異,致使部分材料產生雙頭苗。后期的觀察也顯示,各芽的生長發育基本一致,始花節位變低,坐果早且多。
由圖1~圖5可以看出,當萌動胚激光照射時間為5 s時,各辣椒品種的生長得到促進,伏地尖椒、河西牛角椒和東山光皮椒生長促進明顯,在不同處理中,株高增長效果最好。當激光照射時間為10s時,伏地尖椒、潭陽泡椒和湘晚13號株高明顯高于對照,潭陽泡椒和湘晚13號株高在此照射時間株高增長最高,促進相應最明顯。當激光照射時間為15 s時,除河西牛角椒之外,其余品種都表現為株高變高,但不同品種的促進效應不盡一致。當處理時間為30 s時,伏地尖椒和河西牛角椒的株高明顯降低。由此可見,伏地尖椒、河西牛角椒和東山光皮椒的萌動胚在激光照射時f間為5 s左右時,生長的促進作用明顯,潭陽泡椒和湘晚13號的最佳處理時間為10 s左右,隨著激光照射時間的延長,株高的增長效應下降,甚至降低了植株株高,河西牛角椒的其余處理,株高都明顯低于對照,說明過量時長的激光照射并不利于株高的增加。
激光照射對辣椒植株的莖粗也有影響,當激光照射時間為5 s時,湘晚13號莖粗達到最粗,河西牛角椒、東山光皮椒和潭陽泡椒的莖粗在激光照射時間為10 s時最高,而伏地尖椒在激光照射時間為5 s和15 s出現兩個峰值(圖6)。總體而言,激光處理會使辣椒的莖變粗,但隨著處理時間的延長,莖粗的增加并不明顯,甚至會變細。

圖1 不同時長激光照射伏地尖椒種胚生長曲線

圖2 不同時長激光照射河西牛角椒種胚生長曲線

圖3 不同時長激光照射東山光皮椒種胚生長曲線

圖4 不同時長激光照射潭陽泡椒種胚生長曲線

圖5 不同時長激光照射湘晚13號種胚生長曲線

圖6 不同處理莖粗變化曲線
不同品種在受到不同時間的激光照射處理后,其變化趨勢并不一致,從表1中可以看出,伏地尖椒和東山光皮椒的變化趨勢比較一致,在激光照射時間為10 s時,始花節位達到最高,其余處理基本都比對照低,伏地尖椒經30 s激光照射處理,始花節位比對照略高。河西牛角椒的始花節位變化并不大,呈現先降后升的趨勢,在激光照射處理10 s時,始花節位最低。潭陽泡椒和湘晚13號在激光處理后都表現為始花節位降低,其中在激光照射10s時,始花節位最低。可見不同辣椒品種對激光照射時間的反應并不一致,處理時間一致時,有的明顯降低了始花節位,有的卻使始花節位升高。多數處理表現為使始花節位變低。

表1 不同處理對5個辣椒品種莖粗的影響
根據表2可以看出,“伏地尖”激光照射萌動胚,表現為現蕾、開花,結果時間延遲,蕾期延長,開花結果之間時間縮短,開花結果需時變長,當激光照射時間為10 s時,需時最長。河西牛角椒照射萌動胚,照射時間為5 s、10 s時,現蕾、開花和結果期提前,隨著照射時間的延長現蕾、開花、結果期延遲,當照射時間為15 s和30 s時,現蕾等相關所需時間比對照時間更長。4個處理表現出現蕾到開花之間時間縮短,開花結果之間時間增長。可見照射時間過長,對早、中熟品種發育有抑制作用。東山光皮椒經激光照射處理后,開花結果明顯提早,對現蕾、開花、結果之間時間的影響不是很大。潭陽泡椒所有處理區,從現蕾到結果所需時間比對照短,開花著果時間提前。其中,照射時間為5 s時,時間提前更為明顯,比對照提前10 d開花,提早6 d坐果。湘晚13號所有處理都表現為提前現蕾、開花和結果,從現蕾到開花之間時間縮短。其中,照射時間為5 s時,其提前的效果更為明顯。

表2 不同處理對5個辣椒品種開花結果的影響 (d)
經激光照射處理后,不同品種的表現存在差異,早熟品種現蕾、開花、結果時間延遲,而中、晚熟品種的現蕾、開花和結果時間提前,并且激光誘導能夠一定程度上縮短現蕾和開花之間的時間。
從試驗結果可知,激光刺激能對辣椒產生明顯的生物學效應,適量的對胚的處理能使辣椒的芽尖產生變化,提高辣椒植株前期生長勢,株高變高,莖粗增加,植株健壯;早熟品種的生育期推遲,而中晚熟品種則表現為生育期提前,同時激光處理能夠一定程度的縮短現蕾和開花之間的時間,但是,隨著處理時間的延長,其促進效應并不明顯,甚至不利于植株的生長發育,可見采用照射刺激需因作物、品種等不同而異。利用激光,要求獲得理想的結果,應掌握品種特性,清楚品種對激光的有利敏感時期以及激光刺激作物的有效劑量。激光誘導能夠使作物的生物學效應發生變化,原因還是激光誘導致其遺傳基礎發生一定程度的改變,這對其遺傳基礎的研究、對辣椒的誘變育種將起到十分重要的作用。
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