苯妥英鈉片紫外光譜鑒別的影響因素考察

周筱莉，羅亞虹，周 妮

（廣西壯族自治區桂林食品藥品檢驗所，廣西桂林 541002）

苯妥英鈉片紫外光譜鑒別的影響因素考察

周筱莉，羅亞虹，周 妮

（廣西壯族自治區桂林食品藥品檢驗所，廣西桂林 541002）

目的：考察苯妥英鈉片紫外光譜鑒別過程中的各種影響因素。方法：對苯妥英鈉片的輔料、供試品溶液的制備過程、正庚烷溶劑進行考察及用不同器具試驗。用紫外-可見分光光度法在200～300 nm的波長處掃描并測定其最大吸收及吸光值。結果：苯妥英鈉片輔料中的糊精、供試品溶液的浸漬時間與研磨時間及用不同的器具試驗對紫外吸收有明顯影響。結論：苯妥英鈉片紫外光譜鑒別的影響因素較多，容易誤判，建議對本法進行修訂。

苯妥英鈉片；紫外光譜；鑒別；影響因素

苯妥英鈉片是抗癲癇大發作的首選藥物，也常用于抗心律失常、抗三叉神經痛、抗輕度高血壓等。由于苯妥英鈉有廣泛的生物學活性和藥理治療作用，臨床上也常將其用于其他疾病的治療。收載于《中國藥典》2005年版[1]苯妥英鈉片的［鑒別］（2）項是紫外光譜法，將樣品與高錳酸鉀和氫氧化鈉與水加熱反應，經正庚烷萃取制成供試液，規定在（248±2）nm波長處應有最大吸收。筆者在檢驗中，發現本法的檢驗結果重現性差。經對苯妥英鈉片中的輔料[2]、供試品溶液的制備過程、及用不同的容器試驗和正庚烷溶劑進行考察[3-4]，找到了苯妥英鈉片檢驗結果的影響因素。現將結果報道如下：

1 儀器與試藥

苯妥英鈉對照品：批號100210-200401（中檢所提供），樣品批號：070830、080101、090201、070601、090102、070501、0902161、080403、080602、081102，分別從各醫藥衛生部門監督抽驗。

高錳酸鉀批號：061017，氫氧化鈉批號：060418，正庚烷批號：20020607、20040303、20041209、07081402、20090330、090201、20090915（均為分析純），分別購自全國各化學試劑廠。

島津UV-2450紫外分光光度儀GR-202電子分析天平，可調壓電爐，酒精燈。

2 方法與結果

試驗方法均按照 《中國藥典》2005年版二部苯妥英鈉片的［鑒別］（2）操作。即取制備好的供試品溶液的續濾液0.2 ml，（相當于苯妥英鈉 10 mg）加高錳酸鉀 10 mg、氫氧化鈉0.25 g與水10 ml，小火加熱至沸并保持微沸2 min，放冷。各取5 ml加正庚烷20 ml，振搖提取，照紫外-可見分光光度法在（248±2） nm 的波長處測定吸光度（Aλmax）。

2.1 輔料對鑒別結果的影響

按處方量進行組方或拆方試驗。取苯妥英鈉原料藥500mg，分別加糊精、滑石粉、淀粉和硬脂酸鎂 70、70、70、和7.5 mg，混勻，加水10 ml浸漬，濾過，取續濾液0.2 ml按標準方法操作，測定，結果見表1。

表1 苯妥英鈉片輔料的考察結果

2.2 供試品浸漬、研磨時間的影響

取本品30片（共6份，每份5片，相當于苯妥英鈉500mg），分置6個乳缽中，研細，分別用水10 ml浸漬5、10、15 min，加水 10 ml研磨 5、10、15 min；過濾，測定，結果見表 2。

表2 供試品浸漬、研磨時間試驗結果 (批號090201)

2.3 正庚烷溶劑的影響因素考察

取正庚烷適量轉入石英杯中，在紫外-可見分光光度計上進行基線掃描后，以空氣為空白，在200～300 nm波長處掃描，并在 244～252 nm波長處測定紫外吸收。另取5批苯妥英鈉片供試品各 10 片（100 mg/片）或 20 片（50 mg/片）（相當于苯妥英鈉1 g），研細，加水20 ml浸漬，過濾，各取續濾液1.0 ml，置燒杯中，加高錳酸鉀50 mg、氫氧化鈉1.25 g與水50 ml，小火加熱至沸并保持微沸2 min，放冷。取5 ml/份，共5份。（每一批號平行試驗5份，分別用5批不同廠家的正庚烷提取供試液，以避免加熱反應的影響）用不同批號的正庚烷20 ml提取，測定，結果見表3。

表3 5批供試品考察不同廠家的正庚烷結果

2.4 用不同器具試驗影響因素考察

取25 ml的小燒杯依次加入制備好的供試品溶液0.2 ml（相當于苯妥英鈉10 mg）、高錳酸鉀10 mg、氫氧化鈉0.25 g與水10 ml，用可調壓電爐小火加熱至沸并保持微沸2 min，放冷；另取25 ml小試管（1.5 cm×18.0 cm）依次加入供試品溶液0.2 ml、高錳酸鉀10 mg、氫氧化鈉0.25 g與水10 ml，在酒精燈上小火加熱5 min，放冷。各取5 ml加正庚烷20 ml，振搖提取，取其上清液照紫外-可見分光光度法在（248±2）nm的波長處測定，結果見表 4。

表4 10批供試品用燒杯試驗與用試管試驗結果

3 討論

從表1可見，苯妥英鈉片中的輔料主要有糊精、滑石粉、淀粉和硬脂酸鎂。通過拆方試驗分析，由于輔料中糊精的干擾[5-6]，可使紫外光譜吸光度降低40%～50%。由于各廠家的生產工藝不同，平行試驗測得的紫外吸光度差別較大,分析可能原因為有些藥廠生產的苯妥英鈉片中的輔料沒有糊精及受藥品原料的純度和投料比例的影響。

由表2所見，由于苯妥英鈉在空氣中及水中不穩定，因此，在空氣中暴露時間及在水中研磨時間過長，可加速其分解和水解，使測得的吸光度偏低。因此供試品溶液的制備最好是將其研細的粉末置于具塞瓶中浸漬。并先加試劑后加供試品溶液再加水進行加熱反應，這樣可縮短供試品暴露空氣中的時間，使測得的數據接近真值。

含有雜原子的有機溶劑，通常均具有很強的末端吸收；當溶劑不純時，可增加干擾吸收[1]。《中國藥典》附錄紫外-可見分光光度法對溶劑的要求：測定供試品之前，要先檢查所用的溶劑在供試品所用的波長附近是否符合要求。按照苯妥英鈉片的測定波長在（248±2）nm，正庚烷在244～252 nm的吸光度要求應在0.20～0.10之間。經考察7批中有2批不符合藥用要求，可影響紫外吸收，合格的正庚烷影響不大（表3）。因此每次使用前，都應檢查正庚烷的紫外吸收，檢驗合格再用于試驗。

由于藥品標準沒有注明加熱時的溫度和用何種容器進行試驗，使得試驗溫度無法控制。實驗中發現，僅僅用小火加熱5 min，如果沒有沸騰，有時測得結果無紫外吸收或吸光度很低，重現性差。改為小火加熱至沸并保持微沸2 min，可使檢驗數據重現。表4測定結果顯示，用小燒杯加熱不能反應完全，同時用燒杯取樣加速樣品在空氣中分解而使測得數據降低。改用小試管試驗并用酒精燈小火加熱反應測得的吸光度比用小燒杯試驗加熱反應高，可把對苯妥英鈉片的紫外光譜鑒別影響因素降到最低限度。

由于苯妥英鈉片紫外光譜鑒別的影響因素較多，容易誤判，建議對本法進行修訂[7-8]。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].二部.北京:化學工業出版社,2005:324,附錄22.

[2]李燕,趙利剛,靖博.不同輔料對辛伐他汀片劑穩定性的影響因素[J].中國藥劑雜志,2009,15(5):30-31.

[3]楊瑞瑞,楊海燕.刺五加注射液含量測定方法影響因素考察[J].中國藥業,2009,19(25):55-56.

[4]胡碧波,黃祖帥.杭白菊中主要黃銅甙的測定及影響因素考察[J].中國中藥雜志,2006,21(1):88-89.

[5]陸濱,陰鳳霞.糊精對醋酸地塞米松等小劑量藥物含量測定的影響[J].中國藥業,2003,12(1):40.

[6]羅貴萍.糊精溶液對氯化鈉含量測定的影響[J].河北醫藥,2006,28(9):868-869.

[7]賈首時,張連成,劉峰.反相高效液相色譜法測定苯妥英鈉片的含量[J].藥物鑒定,2007,16(17):24.

[8]黃志遠.苯妥英鈉的HPLC測定[J].今日藥學,2009,19(1):40-41.

Influencing factors of UV action spectrum of phenytoin sodium tablets

ZHOU Xiaoli,LUO Yahong,ZHOU Ni
(Guangxi Guilin Institute for Food and Drug Control,Guangxi Zhuang Autonomous Region,Guilin 541002,China)

Objective:To investigate the influencing factors in the process of action spectrum of phenytoin sodium tablets.Methods:Determined the auxiliary of phenytoin sodium tablets and in the process of preparation of the test solution and the menstruum of heptane and compare with different method of operation at 200 nm to 300 nm wavelength by UV spectrophotometry.Results:The dextrin of phenytoin sodium tablets,using different ware and method of operation could change obviously.Conclusion:The above influencing factors should be avoid due to cause lower determination results.

Phenytoin sodium tablets;UV action spectrum;Authentication;Influencing factors

R943

B

1674-4721（2010）10（a）-128-02

2010-07-16）