嘧菌酯殘留量的氣相色譜-質譜聯用法測定研究

陳 濤 劉永波 崔 磊

（青島市排水管理處，山東 青島 266071）

嘧菌酯又名腈嘧菌酯，原藥為棕色固體，M.P.114 116℃。純品為白色結晶固體，M.P.116℃。相對密度 1.34，蒸汽壓 1.1 ×10-7mPa（20℃）。水中溶解度 6mg/L（20℃），微溶于己烷、正辛醇，溶于甲醇、甲苯、丙酮，易溶于乙酸乙酯、乙腈、二氯甲烷。水溶液中光解半衰期為2 周，對水解穩定。嘧菌酯是一種甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑，高效、廣譜，對幾乎所有的真菌綱害如白粉病、銹病、穎枯病等均有良好的活性。可用于莖葉噴霧、種子處理，也可進行土壤處理，主要用于谷物、水稻、花生、葡萄、馬鈴薯、果樹、蔬菜、咖啡、草坪等。中國進出口檢驗檢疫標準SN/T1976-2007 規定了用氣相色譜法檢測嘧菌酯殘留。文獻報道對嘧菌酯殘留量的檢驗主要有氣相色譜法、氣質聯用法、液相色譜法、液-質聯用法，但氣相色譜法測定易受基質干擾，造成假陽性；液相色譜法前處理過程復雜，成本較高，亦存在像氣相色譜法類似的問題。國內尚未見用氣質聯用檢測蔬菜、水果中嘧菌酯殘留的文獻報道。本文研究建立了氣相色譜-質譜聯用法測定蔬菜、水果中嘧菌酯殘留量的分析方法，操作簡便，定性準確，回收率高，重現性好。

1 試驗部分

1.1 儀器與試劑

氣-質聯機Agilent 6890GC/5973MSD；均質器 IKA T18 basic；固相萃取柱：Cleanert Pesticarb-SPE 1000mg 6mL，Cleanert Florisil-SPE 1000mg 6mL；氮吹儀；六孔水浴鍋；離心機TDL-40B-W 型；超聲清洗器 SBS5200；食品加工器；電子天平；濾膜：0.22μm，有機相；

乙腈、丙酮、二氯甲烷、正己烷烷均為色譜純試劑（德國Merck 公司）；

無水硫酸鎂（AR），550℃～600℃烘4 h，存放于干燥器中；氯化鈉（AR），350℃烘 6 h，存放于干燥器中。

嘧菌酯標準物質購自Sigma-Aldrich 公司（純度99.3%）。

1.2 儀器分析條件

1.2.1 GC條件

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色譜柱：DB-35ms 毛細管色譜柱（30.0m ×0.25mm i.d.× 0.25μm）；載氣：He（99.999%）；流速：1.0 mL ·min-1；進樣口溫度：280℃；進樣方式：脈沖不分流進樣，20 psi，1.0 min；柱溫：200℃ 25℃·min-1290℃ （hold 20.00 min）,Post run：295℃，5.4 min；Total：29.0 min；進樣量：1.0μL；嘧菌酯保留時間：19.44 min。

1.2.2 MS條件

離子源：EI(70eV)；離子源溫度：230℃；四極桿溫度：150℃；接口溫度：295℃；EM 電壓：1812 V；采集方式：SIM；溶劑延遲：5.0 min；調諧方式：自動調諧。

1.3 樣品處理

準確稱取15.00 g 在食品加工器中加工好的樣品于100 mL 聚四氟乙烯離心管中（事先加入3 g～4.5 g 氯化鈉），加入30.0 mL 乙腈，在均質器中高速均質2.0 min。將均質好的樣品罐放入離心機中，4000r/min 離心10min，離心完畢后，吸取乙腈相過一鋪有濾紙的玻璃漏斗(濾紙上放3g～5g 無水硫酸鎂)。準確量取10 mL 乙腈相溶液，放入25 mL 燒杯中，80℃水浴上用蒸汽加熱，杯內緩緩通入氮氣流吹動，蒸發近干，加入2.0 mL 二氯甲烷。將Florisil 固相萃取柱和Pesticarb 固相萃取柱串聯，將二氯甲烷溶解的樣品加到已條件化的固相萃取柱上，過柱凈化，收集洗脫液放在氮吹儀上（水浴溫度60℃），緩緩蒸發至近干，用二氯甲烷準確定容至2.0 mL，過0.22μm 濾膜，樣品進GC-MS 分析。

2 結果與討論

2.1 固相萃取柱使用的優點

固相萃取柱的使用克服了液-液萃取及一般柱層洗的缺點，使萃取、凈化一步完成，而將Florisil 固相萃取柱和Pesticarb 固相萃取柱串聯使用，則有效地消除了基質干擾和色素帶來假陽性的影響，而且節省有機溶劑，最大限度地減少大量使用有機溶劑對環境造成的二次污染。

2.2 定性及定量離子的選擇

定量及定性離子的選擇應考慮以下幾點：特征性高、質量數高、對稱性高且重現性好、與柱流失碎片離子不同。鑒于以上條件，本方法選擇 m/z344、m/z345、m/z372、m/z403 作為嘧菌酯的SIM 離子。其中m/z344 為定量離子，其余三個為定性離子。

2.3 檢出限（LOD）的確定

檢出限是衡量儀器或方法靈敏度的指標。它應低于目標化合物的最大殘留限量（MRL）值，最好低一個數量級。最低檢出限（LOD）是在色譜圖上可清楚確認的分析目的物色譜峰的下限。通常為噪音的3 倍（S/N=3）。本方法中嘧菌酯的最低檢出限為：0.0016mg ·kg-1。

2.4 標準曲線的繪制

準確稱取嘧菌酯標準品50.00mg，轉入10mL 容量瓶，用二氯甲烷定容至刻度線作為母液，于冰箱內保存。將母液用二氯甲烷稀釋配成0.1，0.5，1.0，2.0，5.0μg ·mL-1 系列濃度的標準溶液。取系列濃度的嘧菌酯標準溶液1.0μL 進樣測定。以峰面積為縱坐標，進樣濃度為橫坐標繪制標準曲線。嘧菌酯的標準回歸方程為：Y（Response）=2.68 ×105X(Amt)－1.45 ×103,r=0.9999。

2.5 精密度和準確度

向不同基質樣品如香蔥、油菜、草莓、蘋果中分別添加 0.1μg ·mL-1～1.0μg ·mL-1的嘧菌酯標準溶液，六次平行測定，平均回收率為88.0%～105.0%之間，相對標準偏差(RSD)<5.0%，符合農殘分析要求。表1為香蔥中添加嘧菌酯標樣的回收率及相對標準偏差。

3 結論

該方法已成功運用到本實驗室中多種蔬菜、水果樣品的測定，與傳統的氣相色譜法和高效液相色譜法相比，具有快速方便，回收率和靈敏度高等優點，采用選擇離子方式（SIM）有效地消除了基質干擾帶來的假陽性，適用于接收樣品的常規實驗室分析。

[1]農業部農藥檢定所.農藥殘留量實用檢測方法手冊.第三卷[M].北京：中國農業科技出版社，2005.

[2]SN/T1976-2007 進出口水果和蔬菜中嘧菌酯殘留量的檢測方法-氣相色譜法 [S].北京：中國標準出版社，2007.

[3]JAP-076 腈嘧菌酯檢測方法[S].