洞庭湖區東方田鼠對溴敵隆的敏感性

鄧武軍, 邢廷杰, 黃華南, 陳越華, 雷振東, 陳 劍,張美文, 李 波, 吳承和, 王 勇*

(1.中國科學院亞熱帶農業生態研究所,長沙 410125; 2.中國科學院研究生院,北京 100049;3.湖南省益陽市大通湖區農業水利局,413207; 4.湖南省農業廳植保植檢站,長沙 410005)

東方田鼠(Microtus fortis)是洞庭湖地區的主要農業害鼠之一[1-2],每年汛期受洪水脅迫由湖灘向堤垸內遷移,途中大量啃食農作物,破壞農業生產;同時,東方田鼠也是鉤端螺旋體病、腎綜合征出血熱等疾病的重要媒介生物[3]。在該地區進行的退田還湖以及平垸行洪等工程,大大擴大了東方田鼠的棲息地[4],使東方田鼠繁殖期延長,給當地鼠害防治帶來了一定的困難。近年來,洞庭湖區東方田鼠種群數量和分布范圍仍有繼續擴增趨勢,進入新一輪暴發期。2005年和2007年的汛期,洞庭湖地區水位上漲,均暴發了罕見的特大規模鼠害[5-6],鼠害防控形勢嚴峻。

國內抗凝血滅鼠劑敏感性研究[7-8]主要針對褐家鼠(Rattus norvegicus)、黃胸鼠(R.f lavipectus)和小家鼠(Mus musculus)等家棲鼠種,東方田鼠對抗凝血滅鼠劑敏感性研究僅見對殺鼠靈的報道[9]?？鼓獪缡髣┰谕坏貐^連續使用6～10年鼠類會產生不同程度的抗藥性[10],從而導致滅鼠效果下降。為預防和防治洞庭湖地區東方田鼠對第1代抗凝血滅鼠劑產生抗藥性,在使用第2代抗凝血滅鼠劑之前,有必要了解東方田鼠對其敏感性,為將來進行抗藥性監測提供科學依據。為此,作者于2007年8-10月測定了東方田鼠對溴敵隆的敏感性。

1 材料與方法

1.1 藥物來源及餌料配制

濃度為98%的溴敵隆原藥由農業部農藥檢定所提供。市售新鮮面粉、玉米粉按1∶1混合作餌料。用精確度為0.0001 g的天平稱取原藥,并用二甲基甲酰胺完全溶解后,加乙醇稀釋,再按比例與水混合,倒入誘餌,并充分混合,平鋪于盤中,在60℃烘箱中烘干,即得0.0002%溴敵隆毒餌供試。

1.2 試鼠來源

試鼠捕自益陽市大通湖區北洲子鎮的防洪大堤護坡和湖灘。

1.3 試驗方法

采用無選擇性攝食試驗方法[7]。試鼠實驗室內適應7 d以上,選擇成年(體重40 g以上)、健康、非孕、無外傷的個體,單籠飼養。試驗前稱體重、鑒別雌雄、對應鼠籠進行編號并記錄。先供給無毒前餌2 d,每天稱消耗量并更換新餌,第2天食餌量少于全部試鼠平均攝食量1/5者淘汰。接著,按體重大小(雌雄分開)隨機分為5組,分別供給毒餌 1、2、4、6、8 d,每天稱消耗量并更換新餌,第1天吃毒餌太少(不及前1天誘餌消耗量的1/10)者淘汰。食毒期結束后,存活鼠移至干凈飼養籠正常飼養觀察,試驗總期限(食毒期+觀察期)30 d。記錄出血日期、部位及死亡日期。將死亡鼠剖檢,既沒有外出血體征又沒有內出血病變者淘汰。試驗期產仔,以及既無出血體征又無內出血病變者淘汰。

1.4 統計學方法

采用SPSS軟件[11]進行幾率單位加權回歸法(Bliss法)的計算,先將試鼠按性別分開計算食毒期與其對應死亡率的關系,然后將性別之間對藥物的敏感性進行檢驗,如果差異無統計學意義則雌雄數據合并,求得回歸方程和 LFP50、LFP98、LFP99及其95%置信限。

2 結果與分析

2.1 食毒期與對應死亡率的關系

試鼠共89只,其中雌鼠46只,雄鼠43只,測定結果見表1。攻毒第2天開始出現死鼠,最后1只死于第19天,死亡高峰為開始攻毒后5～12 d。試驗各分5個食毒期,最低食毒期 1 d,雌鼠死亡率為63.6%,雄鼠死亡率為50.0%;最高食毒期6 d,雌雄鼠死亡率均為100%。通過食毒期與其對應死亡率之間的統計學分析,雌雄鼠對溴敵隆的敏感性無顯著差異(t＜t0.05,表2)。故將雌雄鼠數據合并,統計出敏感度基數,得到LFP50、LFP98和 LFP99及其 95%置信限分別為0.94(0.43～1.33)、5.63(3.51～20.83)d和7.14(4.15～33.52)d(表3)。

表1 東方田鼠攝食不同時間0.0002%溴敵隆毒餌的試驗結果

續表1

表2 東方田鼠對溴敵隆的敏感性比較1)

表3 東方田鼠對0.0002%溴敵隆毒餌的敏感度基數

2.2 個體差與敏感度

最敏感的個體是1 d食毒期組的雄鼠,體重47.1 g,食毒第2天死亡,致死劑量0.042 mg/kg;而最耐藥的個體是4 d食毒期組的雄鼠,體重51.2 g,存活劑量0.559 mg/kg,其劑量為前者的13.3倍。合計存活鼠平均攝藥劑量0.199 mg/kg;死亡鼠平均攝藥劑量0.558 mg/kg。雌鼠平均致死劑量0.556 mg/kg,雄鼠平均致死劑量0.560 mg/kg,兩者無顯著差異。

2.3 死亡時間

在89只試鼠中,死亡74只,存活15只,死亡時間為開始攻毒后2～19 d,死亡高峰時間為開始攻毒后5～12 d,平均死亡時間為開始攻毒后9.8 d,屬于抗凝血滅鼠劑的慢性中毒死亡時間范圍。其中雌鼠38只,平均死亡時間為開始攻毒后9.5 d;雄鼠36只,平均死亡時間為開始攻毒后10.1 d。

2.4 出血病變情況

死亡鼠全部進行解剖,觀察出血病變情況,均符合抗凝血滅鼠劑的毒理作用。在死亡鼠中,少數個體出現外出血體征,多以口、鼻、耳等出血為主,眼、陰道、尿道、爪尖、肛門亦見。經解剖觀察,內出血癥狀多為心、肺、胸腔滲血或淤血,其次為肝臟淤血、缺血或青黑,胃、腸、消化道和腹腔出血等癥狀。個別鼠在試驗期間曾有輕微中毒癥狀,但后來又恢復正常。

3 結論與討論

試驗結果表明,洞庭湖區的東方田鼠對溴敵隆滅鼠劑十分敏感,用正常使用濃度(0.005%)1/25倍的毒餌LFP50為0.94 d,而 LFP99卻為 7.14 d,這是由于東方田鼠對溴敵隆敏感性的個體差異較大。從表3(LFP99以及95%置信限)可看出,按WHO新修訂為用LFP99取整天數作為抗藥性檢驗食毒期[12],故本地區東方田鼠對0.0002%的溴敵隆毒餌食毒期超過8 d存活為產生抗藥。

溴敵隆雖然在全國許多地區使用,但只有少數地區作過敏感性本底資料的測定,全國范圍內的抗藥性標準仍未制訂。敏感性本底調查要求在未使用或很少使用過該類滅鼠劑的地區捕鼠做試驗,如果一旦大量使用該類滅鼠劑,該地區的正常敏感性本底資料將丟失。故筆者于2007年8-10月在洞庭湖區益陽市大通湖區北洲子鎮的防洪大堤護坡和湖灘捕捉東方田鼠進行敏感性測定,以期對該藥物的抗藥性標準提供參考。

根據WHO推薦的方法,我國對第1代抗凝血滅鼠劑已有了統一的抗性監測標準[7,12],黑線姬鼠和長爪沙鼠攝食0.005%殺鼠靈毒餌分別13 d和11 d存活,灰倉鼠和大足鼠攝食0.025%殺鼠靈毒餌分別為29 d和7 d存活為抗性鼠。但有關第2代抗凝血滅鼠劑的抗藥性檢驗標準尚未統一。有待今后繼續開展本地區的敏感性本底調查。丹麥以小家鼠攝食0.01%溴敵隆毒餌19 d存活視為抗性鼠[13]。姚丹丹等[14]認為黃胸鼠攝食0.0002%溴敵隆毒餌8 d存活為抗性鼠。本研究測定東方田鼠對溴敵隆的敏感性本底水平,國內尚未見有關報道,這可為今后進行東方田鼠對溴敵隆滅鼠劑的抗藥性監測以及建立第2代抗凝血滅鼠劑的抗藥性標準提供參數。本試驗的開展還能為今后控制和防治洞庭湖區東方田鼠大規模暴發提供科學指導。

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