全蝎生物酶制劑對小鼠 H22肝癌、S180肉瘤移植瘤的抑制生長作用

陳國光 馬 琴

(1太原市第四人民醫院,山西省太原市西礦街 231號,030053;2山西醫科大學)

全蝎又名全蟲,為鉗蝎科動物東亞鉗蝎(Buthus martensiikirsch)的干燥體 。性味咸 、辛 、平,有毒 ,具有清熱解毒、熄風止痙、祛風除濕之功效,符合中醫扶正固本、軟堅散結、活血祛瘀、清熱解毒治療腫瘤的原則[1]。筆者以全蝎酶提物和全蝎原粉作用于 H22肝癌、S180肉瘤移植瘤小鼠,觀察其對腫瘤生長的影響,為全蝎抗腫瘤和全蝎在現代中藥制劑中的提取方法提供實驗依據。

1 材料

1.1 動物 昆明種小鼠,雌性,體重 18～22g,北京醫科大學動物室提供。合格證號碼:(京動字)scxk-2002-001。本室動物室自然飼養。

1.2 腫瘤細胞株 S180小鼠肉瘤腹水型荷瘤小鼠、H22小鼠肝癌腹水型荷瘤小鼠。均引自北大醫院腫瘤研究所。

1.3 實驗用藥 全蝎酶解提取物,由北京中醫藥大學藥學院王玉蓉教授提供,每 m L含酶提物 0.0669g,相當于生藥 0.08g。復方天仙膠囊,通化白山藥業股份有限公司出品,批號:0310061。環磷酰胺(MTX)注射液:江蘇恒瑞醫藥股份有限公司,批號:04111221。

2 方法

2.1 腫瘤接種 據文獻[2-3]稍加改動,無菌條件下抽取傳代 7天的腫瘤腹水液,無菌生理鹽水 1∶3稀釋,混勻,冰浴中放置,取 0.2mL注入小鼠右腋皮下為移植性實體瘤。

2.2 動物分組 實驗分兩批進行,第一批接種 S180肉瘤腹水,接種次日荷瘤鼠隨機分腫瘤對照組、陽性對照組、全蝎酶提物大、中、小劑量組 5組,每組最少 10只。全蝎酶提物大、中、小劑量組分別按成人臨床劑量的40倍、20倍和 10倍,灌服全蝎酶提物 1.616g/kg、0.808g/kg和 0.404g/kg;灌服體積為 0.5mL,每天 1次,連續 10天。陽性對照組灌服復方天仙膠囊0.75g/kg,相當于成人用藥量的 20倍,每天 1次,連續10天。腫瘤對照組灌服等體積蒸餾水,每天 1次,連續 10天。第二批接種 H22小鼠肝癌腹水,接種次日荷瘤鼠隨機分腫瘤對照組、陽性對照組、全蝎酶提物大、中、小劑量組 5組,每組最少 10只。全蝎酶提物大、中、小劑量組和腫瘤對照組同第一批。陽性對照組一次性皮下注射環磷酰胺 80mg/kg,相當于臨床成人用藥量的 6倍。

2.3 觀察抑瘤率 停藥次日,移植性實體瘤動物脫頸椎處死,稱體重后剝離皮下完整瘤塊,萬分之一電子天平上稱重并計算抑瘤率。

表1 各組藥物對小鼠 S180肉瘤的抑制試驗結果

表2 各組藥物對小鼠H22肝癌的抑制試驗結果

表3 各組藥物對 H22肝癌移植瘤小鼠一般狀態和器官指數的影響

2.4 觀察藥物對荷瘤小鼠一般狀態的影響 腫瘤接種后每天觀察記錄動物的精神、運動、生存的狀況,隔日稱體重。

2.5 觀察藥物對荷瘤小鼠免疫器官的影響 摘取小鼠的脾臟和胸腺并稱重(mg),并計算器官指數。

3 結果

3.1 各實驗組藥物對小鼠 S180肉瘤移植瘤的抑制作用 全蝎酶提物大、中、小劑量對 S180肉瘤有一定的抑制腫瘤生長的趨勢,抑瘤率分別為 11.54%、8.40%和29.78%,見表 1所示。

3.2 各實驗組藥物對 H22小鼠肝癌移植瘤的抑制作用 全蝎酶提物大、中、小劑量對 H22小鼠肝癌移植瘤均表現出明顯的抑制生長作用,全蝎酶提物的抑瘤作用好于全蝎原粉。其抑瘤率分別為 35.58%、42.09%、39.61%,隨著全蝎酶解提取物劑量的增大,其抗 H22移植瘤的療效變化不明顯,甚至高劑量組(1.616g/kg)要低于其他兩組。對照藥環磷酰胺表現出十分明顯的抑瘤作用,抑瘤率達 76.10%。見表 2。

3.3 實驗藥物對荷瘤小鼠一般狀況和器官指數的影響 試驗所用藥物對 S180肉瘤移植瘤小鼠和 H22肝癌移植瘤小鼠的一般狀況(活動、精神、皮毛)都無明顯的不良影響。實驗陽性對照藥環磷酰胺在用藥的前六天明顯抑制 H22肝癌移植瘤小鼠的體重增長,實驗結束時小鼠的體重明顯低于腫瘤對照組。全蝎酶提物中劑量組在實驗結束時荷瘤小鼠體重也低于腫瘤對照組。實驗藥物對 H22肝癌移植瘤小鼠器官指數的影響見表 3所示。

4 討論

全蝎是一味名貴中藥,民間素有口服蝎毒稀釋液治療癌癥的經驗。大量的臨床研究也證明,全蝎、全蝎復方、粗制蝎毒及蝎毒抗癌因子,對肝癌、肺癌、鼻咽癌、食道癌等均有較好的治療效果[4]。既往研究表明蝎毒具有明顯的細胞毒性及保護血管內皮,削弱腫瘤細胞浸潤生長的能力[5]。田愛琴等用不同濃度的蝎毒(SVC)培養基培養人食管癌 Eca109細胞株細胞引起 DNA合成抑制,阻斷 G0/G1向 S期的增殖[6]。另有報道,全蝎乙醇粗提物能防止荷瘤小鼠胸腺萎縮,恢復并增強胸腺免疫功能,故停藥后機體對腫瘤生長仍有較高的抑制作用[7]。本實驗結果也表明全蝎有明顯的抑制 H22肝癌生長的作用,且從全蝎酶提物對荷瘤小鼠一般狀況和體重的增長情況看其毒副作用明顯小于陽性對照藥(環磷酰胺)。

全蝎的傳統臨床應用主要有打粉、用水煎煮等方法,這些方法存在服用劑量大、不利儲存、微生物難以控制等諸多弊端。若入煎劑經高溫煎煮,其有效成分是否被破壞,此用藥方式是否合理也未見文獻報道[8]。本實驗通過觀察全蝎生物酶提取物的抗腫瘤效果。為全蝎在現代中藥中的提取方法提供了實驗依據。全蝎生物酶解提取物具有一定優勢的抑制腫瘤生長的作用已初步在實驗中得到證實,但其提取工藝有待進一步完善,具體的作用機理尚有待進一步深入研究。

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