消斑膏的制備與臨床療效觀察

黃壽妙，陳福軍，許少微

（浙江省平陽縣中醫院，浙江 溫州 325400）

黃褐斑是臨床常見的皮膚病，好發于中青年女性，嚴重影響美容。我院針對黃褐斑研制的消斑膏，經臨床應用，療效滿意，現將其制備和質量控制方法及臨床療效觀察情況報道如下。

1 儀器與試藥

LC-4A型高效液相色譜儀（日本島津）；SPD-2AS型紫外檢測器（日本島津）；C-R3A型數據處理機。丹參酮!A對照品由溫州醫學院天然藥物化學實驗室提供；甲醇為色譜純，水為雙重蒸餾水，其余試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 制備

處方：丹參 200 g，桑葚子 150 g，山萸肉 200 g，熟地 120 g，僵蠶100 g，生炒白術 150 g，龜板膠 200 g，白糖 250 g，女貞子 200 g，桃仁100 g。

制備[1-3]：取處方量除龜板膠、白糖外的上述藥材，加水浸泡2 h，提取3次，每次均加5倍量水煎煮1 h，合并煎液，靜置過夜，濾過，再加熱，使濾液濃縮約為原容積的2/5時，再加入龜板膠、白糖烊化，濾過，濾液繼續濃縮至規定的相對密度，放冷，即得。

2.2 質量控制

2.2.1 色譜條件

色譜柱：Zorbax BP-ODS柱（250 mm×4.6 mm，5"m）；流動相：甲醇 -水（79 ∶21）；檢測波長：270 nm；流速：1 mL/min；柱溫：25 ℃；進樣量：10"L。

2.2.2 溶液制備

精密稱取丹參酮!A對照品適量，加甲醇制成質量濃度為10.8"g/mL的溶液，作為對照品溶液。取本品約1.0 g，精密稱定，加甲醇少量使其完全溶解，并定量轉移至50 mL棕色量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，稱定質量（精密至0.01 g），超聲處理15 min，稱定質量，補加損失的質量，置冰浴中冷卻2 h以上，取出后濾膜(0.45"m)濾過，棄去初濾液，取續濾液，放至室溫，作為供試品溶液。按處方比例稱取除丹參的其他藥物適量，依照消斑膏的制備工藝和供試品溶液的制備方法制備陰性對照品溶液。

2.2.3 方法學考察

系統適用性試驗：量取供試品溶液、對照品溶液和陰性對照品溶液各10"L，分別注入高效液相色譜儀。結果供試品溶液色譜中，在與對照品溶液色譜相應位置上有一相同保留時間的色譜峰，而陰性對照品溶液在此保留時間無干擾（圖1）。

線性關系考察：分別精密吸取 2.5，5，10，15，20，25"L 的對照品溶液，注入高效液相色譜儀，每一質量濃度進樣2次，計算丹參酮!A的峰面積平均值，以峰面積平均值為縱坐標、丹參酮!A進樣量為橫坐標繪制標準曲線，得回歸方程 Y=56.98X+1.578 9×104，r=0.999 8。結果表明，丹參酮!A質量濃度在0.027～0.27"g/mL范圍內與峰面積線性關系良好。

圖1 高效液相色譜圖

穩定性試驗：依上述色譜條件，每隔1 h向色譜儀注入同一供試品溶液10"L，連續5次，測定丹參酮!A的峰面積 ，結果的RSD=1.1%（n=5），表明供試品溶液在5 h內基本穩定。

精密度試驗：精密量取對照品溶液10"L各5份，分別注入色譜儀，結果的 RSD=0.5%（n=5），表明儀器精密度良好。

加樣回收試驗：精密稱取已知含量的樣品6份，每份0.5 g，分別置錐形瓶中，再添加一定量的丹參酮!A對照品，每份用甲醇定容至50 mL，按上述色譜條件測定。結果見表1。

表1 加樣回收試驗結果（n=6）

2.2.4 樣品含量測定

分別精密稱取不同批次的消斑膏制劑1.0 g，按供試品溶液制備方法制備，分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20"L，注入高效液相色譜儀中，按上述色譜條件測定，結果3批樣品中丹參酮!A的含量分別為 0.664 7，0.653 8，0.668 8 mg/g。

2.3 臨床應用

2.3.1 一般資料

選擇我院皮膚科門診黃褐斑患者150例，年齡22～45歲，平均32歲，病程6個月至12年，平均4.2年。隨機分為治療組85例和對照組65例，兩組患者在年齡、一般情況和癥狀體征方面無統計學差異（P＞0.05），具有可比性。

2.3.2 治療方法

治療組口服消斑膏，每日2次，每次20～30 g，早晚空腹溫服。對照組口服維生素C 0.2 g，六味地黃丸8粒，均為每日3次。兩組以1個月為一療程，連服2個月。

2.3.3 療效標準

根據國家中醫藥管理局《中醫病證診斷療效標準》[2]，治愈為顏面皮膚恢復正常顏色，顯效為皮損消退80%，好轉為皮損消退30%，無效為皮損無明顯變化或消退不足30%。以前三者之和計算總有效率。

2.3.4 治療結果

治療組85例中治愈30例，顯效35例，好轉8例，無效12例，總有效率為85.88%；對照組65例中治愈19例，顯效12例，好轉10例，無效24例，總有效率為63.08%。兩組療效比較具有統計學差異（P＜0.05）。

3 討論

中醫稱黃褐斑為蝴蝶斑，中醫學認為該病發生的原因很多，發病機理復雜，但臨床觀察提示該病與肝、脾、腎等臟腑功能失調有關，瘀血內阻也是主要病因之一。消斑膏方中桃仁、當歸、丹參活血祛瘀，熟地、山萸肉、桑葚子、龜板膠、女貞子等補益肝腎、滋陰養血，白術健脾土利運化，僵蠶善行頭面而直達病所。方中諸藥制成煎膏劑以滋補為主，藥性滋潤，共奏調理沖任、補益肝腎、滋陰養血、消斑養顏之功效，臨床應用療效確切，值得推廣應用。采用高效液相色譜法對丹參的主要成分丹參酮!A進行含量測定，方法準確方便，重現性好，且簡單易行。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）[M].北京：化學工業出版社，2005：附錄 33.

[2]中國中西醫結合皮膚科學會色素病學組.黃褐斑的臨床診斷和療效判定標準[J].中國皮膚性病學雜志，1999，13：209.

[3]呂圭源，王一濤.中藥新產品開發學[M].北京：人民衛生出版社，1997：561-565.