999精品在线视频,手机成人午夜在线视频,久久不卡国产精品无码,中日无码在线观看,成人av手机在线观看,日韩精品亚洲一区中文字幕,亚洲av无码人妻,四虎国产在线观看 ?

維吾爾族血糖異常人群腸道菌群ERIC-PCR指紋圖譜分析

2010-11-07 08:40:13張雪雁李琳琳
中國科技信息 2010年11期
關鍵詞:血糖糖尿病

張雪雁 李琳琳

維吾爾族血糖異常人群腸道菌群ERIC-PCR指紋圖譜分析

張雪雁 李琳琳

目的:應用ERIC-PCR指紋圖譜技術,以新疆地區維吾爾族人群腸道菌群為研究對象,初步探討血糖不同人群的腸道菌群結構特征以及與2型糖尿病的關系。方法:以不同血糖人群的糞便為樣本,直接提取細菌總DNA,以此為模板進行ERIC-PCR擴增,得到反映腸道菌群結構特征的DNA指紋圖譜,并進行比較分析。結果:正常空腹血糖人群的腸道菌群結構有一定差異,但它們卻有著共同的結構特征;正常空腹血糖人群與2型糖尿病人群和糖耐量減低人群間的腸道菌群結構差異較大。結論:通過分析比較指紋圖譜的差異,提示維吾爾族人群的腸道菌群結構很有可能與2型糖尿病有一定的關系。

2型糖尿病;菌群結構;ERIC-PCR;DNA指紋圖譜

人類腸道定植著一個十分復雜而又相對穩定的微生物區系,這個區系棲息的細菌大約有400多種,數量達1014左右[1],形成一個極其復雜的微生態系統。這些固有的腸道細菌含有種類繁多的酶系統,參與宿主能量、物質及遺傳信息轉運等一系列生理過程[2-4]。

通過對新疆部分地區2型糖尿病進行流行病學調查研究,結果顯示:新疆維吾爾族2型糖尿病的患病率較高,約為14%。醫學研究表明,在高蛋白多肉食與高纖維飲食地區生活的人群相比較,兩種人群的糞便中細菌種類與數量有顯著的區別。基于維吾爾族的飲食結構特點及生活環境特點,提示其腸道菌群的種類與數量具有一定的特征,這可能與2型糖尿病的發生有關。

本文以維吾爾族正常空腹血糖組人群、糖耐量減低組人群和2型糖尿病人群為研究對象,直接從糞便中提取細菌總基因組DNA,用ERIC-PCR指紋圖譜技術,對腸道菌群的結構特征進行分析,比較三組人群的腸道菌群的種類數量和種群的差異,以求找到腸道內與健康及2型糖尿病有重要關系的菌群及結構特點,初步探討維吾爾族2型糖尿病患病率較高的原因,尋找最佳的治療方案。

1 材料

1.1 樣品收集 根據WHO公布的糖尿病診斷標準,篩選了40例正常空腹血糖者和11例2型糖尿病患者。所用糞便樣品收集后立即在-20℃冷凍保存備用。

1.2 試劑 裂解液I:NaCl、Na2EDTA,pH8.0;裂解液II:NaCl、Tris-HCl,pH8.0。SDS、RNA酶、溶菌酶、蛋白酶K、Taq酶等均購自上海生工生物工程公司。

2 方法

2.1 樣品前處理 稱取1g樣品,用無菌PBS溶液渦旋混勻后低速離心,收集上清。重復三次。然后5000r/min離心上清,收集沉淀后-20℃保存備用。

2.2 細菌總DNA的提取 取處理好的樣品,依次加入裂解液I和溶菌酶,輕輕混勻10min后,冰浴70min;加入裂解液II、10%SDS,輕輕混勻加入蛋白酶K,混勻10min后37℃水浴過夜;分別加入等體積Tris-HCl飽和酚、飽和酚和氯仿異戊醇、氯仿抽提;加入無水乙醇沉淀過夜后,高速離心30min留沉淀,干燥后溶于TE中,加入RNA酶37℃水浴消化后-20℃冷凍備用。

2.3 ERIC-PCR 參照文獻[9],利用引物ERIC-1和ERIC-2進行擴增,反應條件:95℃預變性7min、經30個循環(94℃1min、52℃1min、65℃8min),最后65℃延伸16min。

2.4 檢測 取擴增產物8μl經1%瓊脂糖凝膠電泳后,進行檢測。

2.5 指紋圖譜分析 采用SPSS統計軟件進行統計分析。

3 結果

3.1 正常空腹血糖組人群的ERICPCR電泳檢測結果

圖1 和圖2顯示,不同個體的ERICPCR指紋圖譜雖存在有差異,但它們在800bp~900bp、1200bp~1500bp之間有明亮整齊的條帶存在。

圖1 正常空腹血糖組人群ERIC-PCR電泳檢測結果

圖2 正常空腹血糖組人群ERIC-PCR電泳檢測結果

3.2 正常空腹血糖組、糖耐量減低組和2型糖尿病組人群間腸道菌群結構的差異

3.2.1 三組人群ERIC-PCR電泳檢測結果

圖3 和圖4顯示,正常空腹血糖組人群的ERIC-PCR指紋圖譜在800bp~900bp、1200bp~1500bp之間有較明亮整齊的條帶存在,而2型糖尿病組和糖耐量減低組則條帶亮度弱或無條帶存在。

圖3 正常空腹血糖組人群和2型糖尿病組人群的ERIC-PCR電泳檢測結果

圖4 2型糖尿病組人群和糖耐量減低組的ERIC-PCR電泳檢測結果

3.2.2 三組人群的ERIC-PCR指紋圖譜在800~900bp、1200~1500bp條帶檢出率

表1、2顯示,正常空腹血糖組與糖耐量減低組(IGT)、2型糖尿病組(T2DM)之間具有顯著性差異。

4 討論

E R I C是腸桿菌基因間重復共有序列,具有一定的保守性,定位在基因組中可轉錄的非編碼區或與轉錄有關的區域內[5]。由于ERIC重復序列分布的位置及拷貝數在不同細菌中均不相同,通過擴增,這種差異可以反映在ERIC-PCR指紋圖譜中[6-9]。本文利用ERIC-PCR電泳指紋圖譜技術對維吾爾族正常空腹血糖組、IGT組和T2DM組人群間腸道菌群結構特征進行比較和分析。實驗結果顯示,40例正常空腹血糖組人群中,在800bp~900bp、1200bp~1500bp之間有明亮整齊的條帶存在的檢出率分別為72.50%、67.50%;14例IGT和T2DM組人群中,檢出率分別為21.43%、14.29%。由此可以推斷在正常空腹血糖組人群中普遍存在的800bp~900bp、1200bp~1500bp之間的DNA片段所代表的細菌很可能與血糖有關。IGT和T2DM組人群的腸道菌群在800bp~900bp、1200bp~1500bp之間的條帶信號缺失或很弱,說明IGT和T2DM組人群的腸道菌群失衡,發生血糖升高很有可能與這些DNA片段所代表的細菌缺失有關。

根據ERIC-PCR指紋圖譜提供的線索,很有希望找到一些與血糖相關的DNA片段,然后將這些DNA片段克隆測序,找到來源的細菌,看是否可以通過調整腸道菌群,找到維吾爾族2型糖尿病患病率水平高的原因,為尋找最佳的治療方案提供依據,這對于2型糖尿病的防治展示了較美好的前景。

表1 三組人群在800~900bp條帶檢出率

表2 三組人群在1200~1500bp條帶檢出率

[1] 田洪濤,張柏林,賈英民,等.雙歧桿菌與人體胃腸道微生態[J].河北農業大學學報.

[2] 陸德源土編.醫學微生物學[M].人民衛生出版社.

[3] 郭本恒.人腸道菌群的生理功能[J].中國乳品工業.

[4] 康白.微生態學原理.大連出版社.

[5] Hulton,C.S.,C.F.Higgins,er al.ERIC sequences∶a novel family of repetitive elements in the genomes of Escherichia coli, Salmonella typhimurium and other enterobacteria[J].Mol Microbiol.

[6] 喬德才,陳敬,魏桂芳,等.采用PCR指紋圖譜技術分析中長跑運動員腸道菌群結構特征.中國運動醫學雜志.

[7] 喬德才,劉瑾彥,陳敬,等.中長跑運動員胃腸菌群區系結構分布特征的微生態研究.中國運動醫學雜志.

[8] 魯海峰,魏桂芳,李仲逵,等.ERIC-PCR分子雜交技術分析大熊貓腸道菌群結構.中國微生態學雜志.

[9] 張美玲,魏桂芳,郭美蕻,等.健康兒童與發育不佳兒童腸道菌群結構的比較研究.中國微生態學雜志.

10.3969/j.issn.1001-8972.2010.11.098

猜你喜歡
血糖糖尿病
糖尿病知識問答
中老年保健(2022年5期)2022-08-24 02:35:42
糖尿病知識問答
中老年保健(2022年1期)2022-08-17 06:14:56
細嚼慢咽,對減肥和控血糖有用么
保健醫苑(2022年6期)2022-07-08 01:26:34
一吃餃子血糖就飆升,怎么辦?
糖尿病知識問答
中老年保健(2021年5期)2021-08-24 07:07:20
糖尿病知識問答
中老年保健(2021年9期)2021-08-24 03:51:04
糖尿病知識問答
中老年保健(2021年7期)2021-08-22 07:42:16
糖尿病知識問答
慎防這些藥物升高血糖
妊娠期血糖問題:輕視我后果嚴重!
媽媽寶寶(2017年3期)2017-02-21 01:22:30
主站蜘蛛池模板: 99人妻碰碰碰久久久久禁片| 亚洲精品在线影院| 91在线国内在线播放老师| 国产成人精彩在线视频50| 毛片一级在线| 污视频日本| 国产美女人喷水在线观看| 成人午夜免费观看| 欧美a在线看| 国产免费久久精品99re不卡| 伊人久热这里只有精品视频99| 国产高潮流白浆视频| 91九色国产在线| 亚欧美国产综合| 欧美黄网站免费观看| 久久性视频| 久久国产精品麻豆系列| 国产男人天堂| 国产99精品久久| 国产成人精品无码一区二| 自拍亚洲欧美精品| 九九视频免费在线观看| AV不卡无码免费一区二区三区| 97超爽成人免费视频在线播放| 青青青国产视频| 伊人蕉久影院| 福利视频一区| 午夜啪啪网| 在线欧美国产| 久久精品一卡日本电影| 无码在线激情片| 99这里只有精品免费视频| 精品国产99久久| 久久黄色视频影| 思思热在线视频精品| 茄子视频毛片免费观看| 波多野结衣爽到高潮漏水大喷| 亚洲国产综合自在线另类| 亚洲人成网站日本片| 免费看av在线网站网址| 亚洲国产av无码综合原创国产| 亚洲中文精品久久久久久不卡| 小说区 亚洲 自拍 另类| 国产精品视频第一专区| 久久人妻系列无码一区| 重口调教一区二区视频| 99精品高清在线播放| 日本免费福利视频| 久久精品无码中文字幕| 伊人久久婷婷| 日本成人在线不卡视频| 狠狠做深爱婷婷久久一区| 国产精品成人一区二区不卡 | 国产在线一区视频| 好吊色妇女免费视频免费| 中文字幕在线播放不卡| 欧洲极品无码一区二区三区| 天堂成人在线视频| 中文字幕在线日韩91| 欧美a在线| аv天堂最新中文在线| 97se亚洲| 青青草原国产| 婷婷五月在线视频| 欧美国产综合视频| 国产精品极品美女自在线看免费一区二区| 欧美亚洲激情| 国产亚洲视频中文字幕视频| 久久久成年黄色视频| 亚洲色图综合在线| 国产超碰一区二区三区| 亚洲一区二区三区国产精品| 十八禁美女裸体网站| 国产女人在线| a级毛片免费看| 国产精品深爱在线| 亚洲综合色在线| 欧美特级AAAAAA视频免费观看| 99re在线观看视频| 精品亚洲欧美中文字幕在线看| 亚洲一区二区三区麻豆| 久久成人免费|