一種能促進皮膚中透明質酸合成的新型美容多肽

　　前言
　　
　　近年來，玻尿酸(俗稱透明質酸，HA)因為其作為化妝品成分的應用受到了廣泛的關注。它最為卓越的特性在于它能鎖住大約1000倍自身重量的水分。但是，作為化妝品成分，透明質酸在使用方面也有一些缺點。如果能正確使用，它能在肌膚表面起到極好的保濕效果。但是即使分子粒徑從3MD百下降到大約50KD，透明質酸的短鏈依然因為太大而無法正常滲透入肌膚。注射是將透明質酸運送到正確位置的一種方法。但是累積重復注射并不是運用化妝品活性成分的最方便的方法。
　　因此，我們一直在尋找另一種合適的方法，能夠使化妝品成分刺激肌膚自身的功能，從而提升透明質酸的水平。
　　
　　
　　產品描述
　　
　　實驗首先篩選了450種縮氨酸。這些縮氨酸都是為了刺激I型膠原蛋白而設計的，能刺激透明質酸的合成。對篩選出的結構進行進一步的分析，并將優化過的縮氨酸進行測試。最后，我們選擇了如圖1所示的三肽作為化妝品活性成分的開發對象。
　　我們發現，三肽1不僅促進了透明質酸的合成，同時也加強了核心蛋白聚糖和基膜聚糖的水平。這兩種蛋白聚糖能控制膠原纖維的直徑，對膠原纖維的性質起到很重要的作用。蛋白聚糖是由一條或多條糖或糖的衍生物鏈經過修飾而組成的蛋白質。
　　三肽是由1000ppm的縮氨酸溶于水溶性丙三醇溶液，不添加乳化劑、防腐劑、聚乙二醇、植物乳化劑、硅膠或聚合物等添加劑。
　　溶液包含370ppm的氯化鎂。
　　
　　體外功效
　　
　　透明質酸
　　
　　實驗在96孔板細胞培養板上培養了正常人體纖維母細胞(NHF)。三天后，加入不含胎牛血清的適量1號縮氨酸，繼續培養三天。實驗采用ECHELON公司(鹽湖城，美國猶他州)的透明質酸分析設備測量了成長中期分泌的透明質酸。圖2說明了當1號縮氨酸濃度為12.5μmol／L時透明質酸增加了302％。
　　
　　核心蛋白聚糖及基膜聚糖合成
　　
　　實驗在96孔板細胞培養板上培養了正常人體纖維母細胞(NHF)。三天后，加入不含胎牛血清的適量1號縮氨酸。采用酶聯免疫法(EIA)，通過4％的多聚甲醛固定細胞，用0.5％的氚核－X100浸泡。然后用5％的脫脂牛奶封閉非特定的結合部位。細胞培養板一式兩份，分別用如下之一的方式培養。
　　采用山羊抗基膜聚糖(L－20)抗體(santaCruz Biotechnology，sc-27718)培養細胞給基膜聚糖著色。該抗體采用山羊抗小鼠HRP共軛二抗體(Pierce)檢測。
　　采用山羊抗核心蛋白聚糖抗體(R&D系統，AF143)培養細胞并給核心蛋白聚糖著色。采用兔抗羊HRP共軛二抗體(Pierce)檢測。
　　在添加了基質后用酶標儀(Multiskan Ascent，Thermolabsystems)在492nm處對目標合成物進行測量。圖3顯示了在劑量為12.5μmol／L時，三肽1對基膜聚糖及核心蛋白聚糖的合成影響達到穩定。
　　
　　體內功效
　　
　　我們在雙盲體內實驗中對40名女性志愿者(55－65歲，有明顯的面部及上臂肌膚松弛現象)進行實驗，研究了新化學活性成分的功效。志愿者們每天兩次在面部及上臂使用含25ppm三肽1的配方乳液。
　　圖4顯示了兩個月后的治理功效。通過cutometer測定儀分別檢測了緊實度、拉張性及彈性這幾個生物力學參數。
　　
　　兩三個月后，運用primos身體技術對雙下巴在垂直面上的改變進行了記錄。圖5顯示了與DO相比，在面上有明顯的改變。這種改變是任何對照組都無法達到的。
　　
　　安全性及生態性
　　
　　標準且明確的安全性實驗表明：三肽1用于化妝品中是安全的。獲得的數據表明產品對環境沒有任何危害性影響。整個制造過程符合責任關懷計劃的標準，即產品是安全、健康的，且從保護人類及環境的角度出發。
　　
　　配方
　　
　　用三肽1做面霜、凝膠、乳液等的配方非常簡單。通常情況下，該原料可在最后一步添加香精時添加。如果配方需要在高溫下增加原料，三肽可在80℃下穩定兩個小時，而不會降解。配方包括原料可以適應的pH值范圍很廣，3-7之間變化能保證其穩定。即使在10％的溶液中它在50℃下放置兩個月之后仍然可保持穩定。這說明那些微不足道的氯化鎂對配方的穩定性沒有任何影