摘要:通過(guò)在FUGW中克隆入各外源基因表達(dá)盒,如紅系特異表達(dá)人β珠蛋白(HBC),或山羊乳腺特異表達(dá)人血清白蛋白(pBLG-ALB)等,研究以HIv-1為骨架的慢病毒載體FUGW在其假病毒的轉(zhuǎn)錄本中內(nèi)含子的剪切情況,將慢病毒載體制備成假病毒后抽提其坼弓毒RNA,通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄和PCR驗(yàn)證其內(nèi)含子剪切保留情況;同時(shí),在相對(duì)應(yīng)的慢病毒假病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因小鼠中也進(jìn)行類(lèi)似的PCR驗(yàn)證.在制備假病毒的轉(zhuǎn)錄過(guò)程中,其外源基因所攜帶的肉含子在病毒所包含的基因組RNA中被部分保護(hù)不被剪切,且優(yōu)先保護(hù)5’端的內(nèi)含子此現(xiàn)象正好與野生型HIV-1的保護(hù)順序相反.
關(guān)鍵詞:艾滋病毒;慢病毒載體:內(nèi)含子;剪切:剪切保護(hù)
中圖分類(lèi)號(hào):Q752 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1007-7847(2011)03-0195-08